核桃叶提取液对离体灌流蛙心活动的实验研究

【摘要】 目的：通过核桃叶提取液对离体蛙心灌流影响实验，初步探讨核桃叶对心脏活动的影响及作用机制。方法：取蛙心110只，按照随机数字表法将其分为11组，作用效果方块5个组（正常对照组和核桃叶极低、低、中、高浓度组）、作用机制方块6个组（正常对照组、核桃叶提取液组、阿托品低浓度、阿托品高浓度组、阿托品低浓度+核桃叶提取液组、阿托品高浓度+核桃叶提取液组），在每组的蛙心灌流管内加入相应的液体，用BL-410生物机能实验系统记录各组给药前和给药后离体蛙心率和心收缩幅度，并进行比较分析。结果：各核桃叶组的心率与正常对照组均无明显差异（P>0.05）；给药后核桃叶各组的心收缩幅度均明显低于正常对照组（P

【关键词】 核桃叶提取液； 抑制； 离体蛙心； 心收缩力

中图分类号 R931.71 文献标识码 A 文章编号 1674-6805（2015）2-0003-03

The Experimental Study of Juglandis Folia Extracts on the Isolated Perfused Frog Heart Activities/SONG Qing，LIU Ting-xiu，LI Jing，et al.//Chinese and Foreign Medical Research，2015，13（2）：3-5

【Abstract】 Objective：To primarily discuss the influence of juglandis folia on cardiomotility and its mechanism of action through the experiments of effects of juglandis folia extracts on isolated frog heart irrigation.Method：110 frog hearts were selected and divided into 11 groups according to the random number table method：5 groups of effects square （normal control group，very low，low，medium and high juglandis folia extract concentration group） and 6 groups of mechanism square （normal control group，juglandis folia extract group，Atropine low concentration group，Atropine high concentration group，Atropine low concentration group+juglandis folia extract group，Atropine high concentration group+juglandis folia extract group）.Corresponding liquid was added into frog heart perfusion tube of each group.Heart rate and heart contraction of isolated frog in each group before and after medication were recorded by BL-410 Biological Functional Experiment system.The results were compared and analyzed.Result：There were no significant differences in the heart rate between each juglandis folia group and normal control group（P>0.05）.The value of heart contraction of each juglandis folia group after medication were significantly lower than that of normal control group（P

【Key words】 Juglandis folia extracts； Inhibition； Isolated frog heart； Cardiac contractility

First-author’s address：Youjiang Medical College for Nationalities，Baise 533000，China

doi：10.14033/ki.cfmr.2015.02.002

核桃又名胡桃（Juglan regial）是胡桃科核桃属（Juglans L.）植物，其果实核桃仁具有补肾壮阳、健脑益智、养颜美容、温肺润肠、抗氧化、预防心血管疾病和镇痛等作用[1-3]。核桃叶具有抗氧化、抗衰老、抗炎、抑制肿瘤细胞生长、增强学习记忆力和免疫力的作用[4-7]。目前尚未发现有核桃叶对心血管研究的文献报道。本实验用核桃叶提取液对离体蛙心灌流进行实验研究，初步探讨核桃叶对心脏活动的影响及作用机制，为核桃叶的开发利用提供实验依据。

1 材料与方法

1.1 实验动物

选取青蛙110只，体重120～180 g，雌雄不限，由广西右江民族医学院实验动物中心提供。

1.2 药材、实验器材

核桃叶（采自广西百色市郊）晒干备用；阿托品（河南润弘制药股份有限公司）；0.85%NaCl注射液（贵州天地药业有限责任公司）；氢氧化钠（天津市福晨化学试剂厂）；JH-2肌张力传感器（航天医学工程研究所）；BL-410生物机能实验系统（成都泰盟科技有限公司）；BS600L电子天平（上海友声衡器有限公司）；pH试纸（江苏泰州市奥克滤纸厂）。

1.3 核桃叶提取液的制备

将100 g核桃叶加入4000 ml的水中浸泡1 h，文火煮沸2 h，16层纱布过滤后再用滤纸过滤，滤液用文火隔水浓缩至100 ml（相当于生药1 g/ml），冷却后放入4 ℃冰箱保存，用时以0.01 mol/ml NaOH将水提液pH调至7.5，并用蒸馏水配制成0.1、0.2、0.4、0.6 g/ml的核桃叶提取液。

1.4 离体灌流蛙心制备

参照实验教材的方法配制任氏液和制备离体灌流蛙心，蛙心灌流管内的灌流液为任氏液，制备完成的离体灌流蛙心的收缩稳定后用于实验[8]。

1.5 实验方法

本研究分为两个实验方块：作用效果方块和作用机制方块；作用效果方块分为正常对照组和核桃叶极低、低、中、高浓度组，作用机制方块分为正常对照组、核桃叶提取液组、阿托品低浓度、阿托品高浓度组、阿托品低浓度+核桃叶提取液组、阿托品高浓度+核桃叶提取液组。将离体蛙心随机分入上述各个组中，每组10只。在心舒期用蛙心夹夹住心尖，经滑动杠杆和张力传感器连接BL-410生物机能实验系统，调节基线在2.5 g左右，保持心脏舒张末期蛙心灌流管内任氏液的液平面在2 cm高度，记录离体灌流蛙心活动曲线，待心肌收缩曲线稳定后，作用效果方块的正常对照组（加入0.85%NaCl注射液）和核桃叶极低、低、中、高浓度组（分别加入0.1、0.2、0.4、0.6 g/ml的核桃叶提取液）的蛙心灌流管内加入相应的液体30 μl，作用机制方块的正常对照组（加入0.85%NaCl注射液40 μl）、核桃叶提取液组（加入0.6 g/ml的核桃叶提取液40 μl）、阿托品低浓度和阿托品高浓度组（分别加入0.05%阿托品和0.1%阿托品20 μl）、阿托品低浓度+核桃叶提取液组（先后加入0.05%阿托品20 μl和0.6 g/ml的核桃叶提取液

40 μl）、阿托品高浓度+核桃叶提取液组（先后加入0.1%阿托品20 μl和0.6 g/ml的核桃叶提取液40 μl）的蛙心灌流管内加入相应的液体。

1.6 实验数据测量

测量1 min内曲线全部收缩波的平均张力作为心收缩力（g），测量1 min内曲线收缩波的个数作为心率（times/min）。给药前和给药后1 min分别进行心收缩力及心率的测量。

1.7 统计学处理

采用SPSS 16.0软件对所得数据进行统计分析，计量资料用（x±s）表示，比较采用方差分析，以P

2 结果

2.1 作用效果方块各组离体蛙心活动比较

各组给药前和给药后的心率相互间的两两比较均无明显差异（P>0.05）。各组给药前的心收缩幅度两两比较均无明显性差异（P>0.05）；给药后核桃叶各组的心收缩幅度均明显低于正常对照组（P

2.2 作用机制方块各组离体蛙心活动比较

各组给药前和给药后的心率相互间的两两比较均无明显差异（P>0.05）。各组给药前的心收缩幅度两两比较均无明显性差异（P>0.05）；给药后各组心收缩幅度比较：阿托品低浓度和阿托品高浓度组与正常对照组比较差异均无统计学意义（P>0.05），阿托品低浓度+核桃叶提取液组明显低于阿托品低浓度组（P

3 讨论

心脏活动的外在表现在心率和心收缩力两方面。在心脏内，存在着影响心脏活动的两大受体系统：一是M受体系统，其激动时可导致心收缩力减弱和心率减慢；二是β受体系统，其激动时可导致心收缩力增强和心率加快。阿托品是M受体的拮抗剂，可阻断M受体的效应[9]。

本实验结果显示，各浓度组的核桃叶提取液给药后的心率与正常对照组均无明显差异，而心收缩幅度均明显低于正常对照组（P

此外，随着全球的人均寿命延长，社会老龄化显而易见，而老龄人随着全身各系统器官功能的退化，出现记忆力、免疫力和抵抗力下降，易发生衰老、心脑疾病、炎症感染、肿瘤繁殖等不良状况；而核桃叶具有抗氧化、抗衰老、抗炎、抑制肿瘤细胞生长、增强学习记忆力和免疫力的作用[4-7]。本研究同时表明，核桃叶不影响心率而能降低心收缩力，这对老龄人常出现的心绞痛可能有缓解作用。因此，基于核桃叶这些众多方面的作用均有利于老龄人的需求，核桃叶有望成为中老龄人的保健品，还有待今后的开发研究。

参考文献

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[8]陈世民，莫燕娜，赵善民，等.实验生理科学[M].第2版.上海：上海科学技术出版社，2011：60，144-145.

[9]朱大年，王庭槐，罗自强，等.生理学[M].第8版.北京：人民卫生出版社，2013：132-134.

（收稿日期：2014-09-29） （编辑：欧丽）