灯心草抗氧化活性成分研究

【摘 要】：采用DPPH法对两种灯心草属植物不同溶剂提取物进行抗氧化活性研究。结果表明灯心草乙酸乙酯提取物的抗氧化活性最强。评价了从该活性部位分离出的四个化合物清除DPPH自由基的活性，化合物3显示了一定的清除DPPH自由基的活性。

【关键词】：灯心草属灯心草抗氧化活性

【中图分类号】R282．71；R284．2【文献标识码】A【文章编号】1007－8517（2008）08－0028－03

Studying on antioxidant constituents from Juncus effusus L．

LU fengYong Jiang University，Nanning 530001

SHEN Jian－ling South Central Universities for Nationalities， Wuchang 430074

AbstractThe antioxidant activities of each extract from two Juncaceae plants were determined by using DPPH free radical scavenging method． The experimental results indicated that EtOAc extract of Juncus effusus L． had the strongest antioxidation activiies． The antioxidant activities offour compounds isolated from this plant were tested． The results showed that thecompound 3 displayed modrate scavenging DPPH free radical activities compared with BHT．

Key words Juncaceae Juncus effusus L antioxidation activities

灯心草属植物是多年生稀一年生草本，本属约240种。广泛分布于世界各地，主产温带和寒带。通常生长在草洵、沼泽、水边及阴湿的环境中。我国有77种，1亚种和10变种1。《中药大词典》2记载为药用的灯心草属植物就有走茎灯心草Juncus amplifolius A． Camus， 扁杆灯心草J． diastrophanthus Buchen， 灯心草J． effusus L． var． decipiens Buchen． f． utilis Mark．， 拟灯心草J． setchunensis Buchen． var． effusoides Buchen．， 野灯心草J． leschenaultii Gay．5种。国外主要对三种灯心草属植物J． roemerianus， J．effusus ， J． acutus的化学成分进行了研究，其中对灯心草J． effusus的研究最为活跃，从该植物分得大量9，10－二氢菲类化合物3。本文采用系统溶剂提取法，对灯心草和龙须草的乙醇提取物依次用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇和水进行提取，然后采用DPPH法对8个提取物进行抗氧化活性研究。结果表明灯心草乙酸乙酯提取物的抗氧化活性最强。并对从该活性部位分离出的四个化合物4，5，其结构分别鉴为effusenone A（1），毛地黄黄酮－5，3′－二甲酯（2），2，7－dihydroxy－1－methyl－5－hydroxymethyl－phenanthrene（3），7－hydroxy－1－methyl－2－methoxy－pyrene（4）。采用DPPH法对4个化合物进行抗氧化活性研究，结果表明化合物3显示了一定的抗氧化活性。

1 材料与方法

1．1 仪器和材料

E－722型可见分光光度计，上海光谱仪器有限公司生产；1，1－二苯－ 2－苦肼基（DPPH・）， Sigma公司生产；2，6－二叔丁基对甲酚（BHT），上海盈元化工有限公司生产 所用溶剂均为分析纯，由上海试一化学试剂有限公司生产。

化合物（1）～（4）由中南民族大学生命科学学院天然产物化学研究室提供。

灯心草购于广西南宁药材批发站，龙须草2007年8月采于湖北省罗田县天堂寨，分别鉴定为灯心草Juncus effusus L．的干燥茎髓和龙须草J． setchunensis Buchen。

1．2 方法

1．2．1 提取分离

灯心草和龙须草（50g）粉碎后用95％乙醇室温浸泡三次，每次24小时。真空抽滤得滤液，减压旋蒸，得乙醇提取物。将乙醇提取物用90％甲醇－水溶解然后用石油醚萃取两次，合并上层并蒸干，得到石油醚提取物。减压回收下层的甲醇得浸膏，然后用水溶解，依次用乙酸乙酯和正丁醇分别萃取两次，蒸干，得到乙酸乙酯、正丁醇和水层提取物。

1．2．2 抗氧化活性测定

采用DPPH・氧化法5。向3mL 25ug／mL 的DPPH・溶液中加入150ul试样（空白对照用等量甲醇代替），总体积3．15mL，混匀，于37℃放置30分钟后，在520nm处测其吸光值。

样品对DPPH・的清除率＝［ODblank－ODsample／ ODblank］×100％。式中，ODblank：DPPH・与溶剂混合液的吸光度，ODsample：DPPH・与样品反应后的吸光度。

2 结果与讨论

2．1 提取物对DPPH・的清除作用

由图2和图3可知，灯心草和龙须草的乙酸乙酯和正丁醇提取物均比其石油醚和水提取物的活性强，但灯心草和龙须草各提取物对DPPH・的清除能力有明显差异。随着提取物加入量的增加清除作用加强，表明在一定范围内提取物清除自由基的能力与其浓度呈明显的量效关系。不同部位不同溶剂提取物清除DPPH・的能力不同。以各提取物对DPPH・的半抑制率做比较，其活性顺序依次为灯心草乙酸乙酯＞灯心草正丁醇＞龙须草乙酸乙酯＞龙须草正丁醇＞灯心草水提取物＞龙须草石油醚＞灯心草石油醚＞龙须草水提取物。其中以灯心草的乙酸乙酯提取物的抗氧化作用最强，其对DPPH・的清除能力IC50为10．76 mg／mL，所有提取物的活性都低于标准抗氧化剂BHT（IC50＝4．42mg／mL）。

2．2 化合物对DPPH・的清除作用

由图4可知，化合物3对DPPH・有强的清除能力，其IC50为5．42mg／mL，与BHT（IC50＝4．42mg／mL）相当，其余化合物1，2和4的IC50分别为63．72mg／mL，71．76mg／mL和104．09mg／mL。从结构上分析，其抗氧化活性与酚羟基数目和位置有关，化合物3有两个酚羟基和1个羟甲基，活性最强，化合物1和2都有两个羟基，活性次之，化合物4有1个酚羟基，其活性最小。

3 结论

采用DPPH・法对两种灯心草属植物不同溶剂提取物进行抗氧化活性研究，结果表明灯心草乙酸乙酯提取物的抗氧化活性最强。以生物活性导向分离从灯心草乙酸乙酯提取物分离到4个化合物，其结构分别属于萜类、黄酮、菲和芘类化合物。评价了四个化合物的清除DPPH・的活性，结果表明化合物菲类化合物3显示了与BHT相当的抗氧化活性。灯心草属植物含有大量类菲类化合物，该类化合物均有一定的抗氧化作用，通过以上研究发现灯心草的活性成分的结构类型，为进一步从该植物中寻找高效、低毒的天然抗氧化剂打下了基础。

参考文献

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（收稿日期：2008．6．28）