甲减大鼠甲状腺激素水平与动情期及妊娠结局的关系探讨

【摘要】目的通过观察甲减大鼠治疗前后动情期、受孕率及甲状腺激素水平的变化，探讨动情期、妊娠结局变化与甲状腺激素水平之间的联系。方法采用丙硫氧嘧啶建立甲减大鼠模型，观察比较正常大鼠、甲减大鼠治疗前后的动情期及妊娠结局的变化，发光免疫法测定各组大鼠血清中FT4、TPO-Ab、TSH的浓度变化。结果甲减组大鼠动情期紊乱，甲减组与正常组及甲减治疗组比较，TPO-Ab、TSH水平升高，FT4水平呈下降趋势，比较差异有统计学意义（P0.05）；甲减组大鼠经治疗后有再次妊娠的机会。结论甲状腺激素水平减低可引起大鼠动情期紊乱，同时可能是导致不孕的原因；甲减经治疗后妊娠结局有一定改善。

【关键词】甲状腺功能减退症；动情期；大鼠；甲状腺激素

063文章编号：1004-7484（2014）-06-3057-02

甲状腺功能减退症（hypothyroidism，简称甲减）是由各种原因导致的低甲状腺激素血症或甲状腺激素抵抗而引起的全身性低代谢综合征。国外报告的临床甲减患病率为0.8%-1.0%，发病率为3.5/1000；我国学者报告的临床甲减患者患病率是1.0%，发病率为2.9/1000。甲状腺功能异常可影响下丘脑-垂体-卵巢功能轴，过高过低均会造成排卵障碍或卵巢功能低下而导致不孕。

1材料与方法

1.1实验材料

1.1.1实验动物选用清洁级成年Wistar健康大鼠105只（雌性70只，均为初胎），周龄12-14周，体重200-240g，由山西医科大学实验动物中心提供。

1.1.2主要试剂及仪器丙硫氧嘧啶（Propylthiouracil Tablets）；左甲状腺素（Levothyroxine Sodium Tablets）；FT4、TPO-Ab、TSH试剂盒；HE染色一系列试剂；电热恒温箱（美国SHEL.LAB2323型）；贝克曼DX1800微粒子化学发光分析仪。

1.2实验方法

1.2.1实验动物分组70只雌鼠，随机取正常组10只，余60只造甲减模型，模型造好后随即分为甲减组（30只），甲减治疗组（30只）。大鼠在期按完全随机分组法将雌性和雄性大鼠以2：1合笼过夜，次日清晨找到阴道脱落栓者为妊娠第一天。观察1个妊娠周期（21天左右）。

1.2.2甲减大鼠模型的制备大鼠开始喂养，每天上午11：00喂服丙硫氧嘧啶（PropylthiouracilTablets）。采用0.1‰浓度丙硫氧嘧啶液，根据10ml/Kg体重，1日1次喂药。

1.2.3阴道脱落细胞学检查大鼠于实验开始后每天15：00进行一次阴道脱落细胞学检查，确保被选用大鼠均有正常动情周期。甲减大鼠模型造好后每天15：00进行一次阴道脱落细胞学检查。甲减治疗组在治疗1个月后同前进行一次阴道脱落细胞学检查。

1.2.4甲减大鼠的药物治疗给予喂5‰左甲状腺素治疗1个月。

1.3检测指标及方法

1.3.1动情期的观察方法：采用棉拭子制备阴道涂片，常规HE染色，光学显微镜下观察阴道脱落细胞变化，看动情前期、动情间期、动情期、动情后期的变化。

1.3.2甲状腺激素水平正常组、甲减组与甲减治疗组大鼠均在合笼前尾静脉采血，1500转/分离心，获取血清，保存于-20℃。FT4、TPO-Ab、TSH检测采用贝克曼DXI800微粒子化学发光分析仪，检测步骤完全按操作说明规范进行。

1.3.3比较各组受孕率。

1.4统计方法采用SPSS17.0统计软件进行数据分析，统计学处理参数均采用χ±s表示，两组间比较采用t检验，P

2结果

2.1阴道脱落细胞学的变化甲减大鼠光镜下显示大鼠动情周期紊乱化上皮细胞；D动情后期出现大量白细胞，混有少量角化上皮细胞。A1-D1，甲减组动情期示动情间期、后期延长，甚至无动情期。A2-D2甲减治疗组动情期示正常的动情期。

2.2血清甲状腺激素水平

2.2.1甲减组中FT4水平呈下降趋势与甲减治疗组及正常组比较差异均有统计学意义（P0.05）。

2.2.2甲减组TSH、TPO-Ab水平呈上升趋势与正常组及甲减治疗组比较差异均有统计学意义（P0.05）。

2.3正常组全部受孕甲减组25只大鼠受孕，受孕率为83.33%，甲减治疗组中29只大鼠受孕，受孕率96.67%，甲减组大鼠受孕率小于甲减治疗组。

3讨论

甲状腺功能异常的妇女容易发生月经紊乱、不孕，在妊娠期，易并发各种疾病，如流产、胎盘早剥、妊娠期高血压疾病等。目前我国还在不断深入对甲状腺疾病与不孕及妊娠的分析与研究，甲状腺疾病一经发现，即给予治疗，故对甲状腺疾病合并不孕及妊娠的流行病学及研究进展造成了一定的困难。且我国孕前检查，缺乏对甲状腺功能检查的明确性，国内外研究已表明不孕与甲状腺疾病有关，故应引起重视。

本研究通过光镜下观察甲减不孕大鼠的动情周期变化，显示甲减大鼠动情周期紊乱，动情间期、后期延长，甚至无动情期（图A1-D1），治疗后动情期恢复正常。正常大鼠动情周期包括：动情前期（此期相当于人类月经周期的卵泡期），动情期（此期相当于排卵期，卵泡发育成熟并排卵），动情后期（此期相当于黄体期，黄体生成并逐渐成熟）和动情间期（此期相当于月经期，黄体退化并向卵泡期转换）。甲状腺功能减退时，可影响下丘脑-垂体-卵巢轴，TH分泌减少，对促甲状腺激素释放激素（TRH）和TSH的反馈抑制作用减弱，可引起高泌乳素（PRL）血症，使正常的卵泡发育及排卵所需的促性腺激素释放激素（GnRH）的分泌节律改变，LH排卵峰延迟，黄体功能不足。Kakuno等发现轻中度甲状腺功能减退患者月经紊乱的发病率为10.2%，重度甲减患者为34.8%。Krassas等的研究表明甲减患者月经紊乱的发生率为正常健康人群的3倍，以月经稀发最为常见。

本研究通过喂0.1/1000的丙硫氧嘧啶（10ml/kg）成功构建了甲状腺功能减退大鼠模型，通过发光免疫法测定正常组、甲减组及甲减治疗组血清中FT4、TPO-Ab及TSH水平，给予左甲状腺素片治疗。甲减组中FT4水平呈下降趋势，TPO-Ab、TSH呈上升趋势，与正常组及甲减治疗组比较差异有统计学意义（P0.05）。这与上面正常组、甲减大鼠及甲减治疗后动情期的变化方向相一致，表明甲减大鼠体内甲状腺激素水平的变化与动情期的变化存在着一定的联系。Arojoki等的研究发现，TSH升高患者中出现排卵障碍比例达6.3%，而甲状腺功能恢复正常后，甾体激素的代谢也随之正常。

本研究还显示甲减治疗组大鼠的妊娠结局。甲减大鼠经治疗后，甲状腺激素水平升高，受孕率升高，可有再次妊娠的机会。

4结论

甲状腺激素水平减低时，可出现大鼠动情期间期、后期的延长，甚至无动情期，可能是导致不孕的原因之一；甲减经治疗后妊娠结局有一定改善。

综上所述，甲状腺激素水平可作为影响排卵及甾体激素水平的一项指标，育龄期妇女孕前检查应常规进行甲功检测，早期发现并治疗甲状腺功能减退，及早去除不孕及不良妊娠结局的高危因素。

参考文献

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