阿托伐他汀钙对动脉粥样硬化大鼠血脂水平及CRP—mRNA表达的影响

[摘要] 目的 探讨阿托伐他汀钙对动脉粥样硬化（AS）大鼠血脂水平及CRP-mRNA表达的影响。 方法 选取45只健康雄性大鼠随机分为3组，对照组喂食基础饲料，AS模型组、观察组均喂食高脂饲料，4周后观察组给予阿托伐他汀钙灌胃，8周后测量所有大鼠的低密度、高密度脂蛋白胆固醇（LDL-C、HDL-C）和CRP-mRNA表达水平。 结果 观察组的LDL-C明显低于对照组和AS模型组，HDL-C明显高于对照组和AS模型组，差异有统计学意义（P

[关键词] 阿托伐他汀钙；动脉粥样硬化；大鼠；低密度脂蛋白胆固醇；CRP-mRNA表达

[中图分类号] R543 [文献标识码] A [文章编号] 1674-4721（2013）12（c）-0034-02

动脉粥样硬化（atherosclerosis，AS）可致动脉管壁增厚、变硬、管腔狭窄等，直接引发多种心脑血管事件的发生[1]。目前对AS防治思路的研究，低密度脂蛋白胆固醇（low density lipoprotein-cholesterol，LDL-C）研究一直处于中心位置，大量研究证实，LDL-C水平与AS严重程度密切相关[2]。C反应蛋白（C-reactive protein，CRP）作为AS重要的促炎症因子，在参与AS形成和发展中扮演了重要角色[3]。本文以大鼠AS模型为载体，探讨阿托伐他汀钙对AS大鼠血脂水平和CRP-mRNA表达的影响，研究其临床价值，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 资料来源

选取45只健康Wistar雄性大鼠，月龄3～4个月，体质量190～220 g，均由南昌医学院动物实验室提供（2012-0009），且依清洁级对大鼠专人饲养。

1.2 方法

1.2.1 主要药品及试剂 阿托伐他汀钙（美国辉瑞制药有限公司，H20093819）；胆固醇、胆酸钠（河南平顶山市东珠生物制品有限公司，H19993993）；丙基硫氧嘧啶购自苏州恒益医药原料有限公司；低分子量标准蛋白购自中科院上海生物化学研究所等。

1.2.2 主要仪器设备 PCR扩增仪（美国Eppendorf公司）；RS-28高速低温离心机（德国贺利氏公司）；全自动生化分析仪（美国贝克曼公司）；超低温冰箱（海尔公司）；BX60显微镜（德国Olympus公司）。

1.2.3 实验方法 将45只健康Wistar雄性大鼠基础喂养1周后，随机分为对照组、AS模型组和阿托伐他汀钙治疗的观察组，各15只。对照组继续喂养基础饲料，AS模型组和观察组则改喂食高脂饲料（3%胆固醇、0.5%胆酸钠、0.2%丙基硫氧嘧啶、5%白糖、10%猪油、81.3%基础饲料）。观察组在喂养高脂饲料4周后，改给予溶于生理盐水的阿托伐他汀钙5 mg/（kg·d）灌胃，其余2组则给予同等体积的生理盐水灌胃。整个实验持续8周。

1.3 标本采集及检测

实验第8周末对大鼠麻醉后分离取单侧颈动脉血，分离后提取血清和血浆，采用全自动生化分析仪测定血脂HDL-C、LDL-C水平。采用Trizol[3]一步法提取RNA并做鉴定，RNA含量采用紫外分光光度计检测法。应用酶联免疫分析法测定大鼠CRP-mRNA水平；大鼠处死后取主动脉弓纵切面，石蜡包埋，连续切片，HE染色，光镜下观察大鼠主动脉病理形态学变化。

1.4 统计学方法

采用SPSS 13.0统计软件对数据进行分析和处理，计量资料以x±s表示，采用F检验，以P

2 结果

2.1 3组大鼠血脂和CRP-mRNA表达水平的比较

观察组的LDL-C低于对照组和AS模型组，HDL-C高于对照组和AS模型组（P

表1 3组大鼠血脂和CRP-mRNA表达水平的比较（mmol/L，x±s）

与对照组和AS模型组比较，*P

2.2 3组大鼠主动脉的病理结果

对照组：大鼠主动脉内膜、中膜和外膜分界清楚，光镜下见内皮细胞完整，内膜光滑；中膜主要由呈同心排列的弹性纤维膜组成，基质内可见环形的平滑肌细胞；外膜较薄，为疏松结缔组织，内含少量平滑肌细胞（图1A）。AS模型组：大鼠主动脉可见多处隆起于内膜表面的斑块，斑块表面为纤维膜，深部为大量粥糜样物质（图1B）。观察组：大鼠主动脉可见内膜增厚且血管平滑肌细胞增生，弹性膜薄厚不均，内皮细胞不完整，内皮下有少量坏死物，有少量淋巴细胞和泡沫细胞，中膜萎缩，有断裂分离现象，但尚无明显的斑块形成（图1C）。

3 讨论

AS的病因目前尚不完全清楚，早期AS多见损伤性的脂质条纹，有研究发现其多由大量胆固醇的巨噬细胞源性泡沫细胞构成[4]。大量胆固醇酯在巨噬细胞内积聚，形成泡沫细胞，可能是AS形成早期的特征性病理生理过程[5-7]。LDL-C作为AS的炎症指标，高度参与了胆固醇逆转运发挥抗AS作用，其具有抗AS作用在于胆固醇逆转运[8]，其与AS发生有密切关系，为判断和治疗AS提供了重要的参考依据。

他汀类调脂药在AS、冠心病的防治中占有重要地位，不仅能通过抑制三羟基三甲基戊二酰辅酶A还原酶阻断羟甲戊酸途径及增加肝脏LDL-C受体表达，从而降低血浆LDL-C的浓度，还能升高HDL-C水平[9]。本实验采取高脂饮食喂养直接导致大鼠HDL-C降低和LDL-C升高，阿托伐他汀钙灌胃后显示，LDL-C明显降低，HDL-C明显升高，提示阿托伐他汀钙对降低AS大鼠LDL-C、提高HDL-C有显著效果。LDL-C水平与AS及心脑血管疾病发生风险有密切联系，降低LDL-C水平对减少AS的发生有积极意义[10]。

有研究发现，在肺炎衣原体所致的AS模型中观察到斑块中出现明显的炎症改变，同时伴有CRP-mRNA和蛋白表达明显升高，提示AS可能与CRP-mRNA和高蛋白表达有一定的关联[11-14]。有研究发现他汀类药物可降低颈动脉粥样斑块累及的平滑肌细胞CRP-mRNA表达而抑制炎症反应[15]。本研究显示，服用阿托伐他汀钙治疗的观察组CRP-mRNA表达水平明显低于AS模型组，提示他汀类药物降低了AS模型大鼠AS段CRP-mRNA的表达，可为临床抗心血管药物治疗提供新思路。

综上所述，阿托伐他汀钙可降低AS大鼠LDL-C水平，升高HDL-C水平，并抑制AS段CRP-mRNA表达，从而延缓AS的进程。

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（收稿日期：2013-10-28 本文编辑：李亚聪）