适于香菇菌棒生产接种的液体菌种培养基配方筛选

摘要：选取6种常用的香菇液体菌种培养基，通过对菌丝生物量、菌棒培养状况和出菇状况的比较，筛选适合香菇菌棒的最佳液体菌种培养基配方。结果表明，配方③（玉米粉2%、马铃薯淀粉2%、酵母膏0.2%、麸皮1%、磷酸二氢钾0.1%、硫酸镁0.1%）适于香菇菌棒的直接接种，其上接种的香菇菌棒整个生长周期仅为205天。

关键词：香菇；液体菌种培养基；出菇；生长周期

中图分类号：S646.1+2文献标识号：A文章编号：1001-4942（2014）12-0051-03

近年来，我国香菇市场增长稳定，生产发展迅速，随着香菇产业的发展，对香菇生产工艺、 产量及品质提出了更高的要求。传统的香菇制种技术经过较为繁琐的母种、原种、栽培种三级培育， 最后才能扩大到栽培袋的生产。劳动强度大、工艺繁琐、污染率高、生长周期长、接种操作要求高等都大大制约了香菇的发展[1]。液体菌种技术的出现有效解决了以上难题，但由于种种原因，当前液体菌种在香菇栽培中的应用颇为有限。为此，本研究对香菇液体菌种培养基做了初步筛选，以期为香菇液体菌种的推广应用提供理论依据。

1材料与方法

1.1供试菌株

七河6号，由山东七河生物科技股份有限公司保藏。

1.2培养基配方

液体培养基配方共设6组： ①玉米粉2%，豆粉2%，磷酸二氢钾0.1%，硫酸镁0.1%[2]；②葡萄糖2%，黄豆粉4%，木屑4%[3]；③玉米粉2%，马铃薯淀粉2%，酵母膏0.2%，麸皮1%，磷酸二氢钾0.1%，硫酸镁0.1%；④麸皮10%，蔗糖1%，磷酸二氢钾0.2%，硫酸镁0.15%；⑤玉米粉2%，蔗糖2%，蛋白胨0.5%；⑥麸皮100%、麦芽糖3%、硫酸镁0.15%、磷酸二氢钾0.1%[4]。

栽培培养基配方：木屑79%，麸皮20%，石膏1%，含水量55%～60%。

1.3液体菌种培养方法

将活化的七河6号母种接入斜面培养基，25℃培养13 d，待菌丝长满斜面后再分别转入液体培养基摇瓶内，每瓶接种5块，每块菌丝0.5 cm2，每个处理（配方） 重复10瓶。将培养瓶置于180 r/min、25℃的条件下振荡培养7 d，待瓶内产生许多细小而稠密的菌球时终止培养。

1.4液体菌种中香菇菌丝体生物量的测定[5]

每个处理取6瓶，终止培养后将发酵成熟的培养液用100目滤网过滤，收集各菌株的菌丝体和滤液。菌丝体用蒸馏水清洗2次，60℃烘干至恒重，用电子天平称菌丝体干重计算生物量，发酵液pH 值用pH 计测定。

1.5液体菌种接种香菇菌棒培养特性比较[6]

试验采用的栽培袋规格为 55 cm×15 cm×0.054 cm，每袋装干料 0.8 kg，每棒接4穴，每穴注射6 mL液体菌种，以常规固体接种菌棒作为对照，接种后置20～25℃培养，适当通风，CO2浓度控制在3 000 mg/L以下，每处理20 袋。培养阶段，记录菌棒的平均满袋时间和平均成熟时间（以转色面积超过90%为准）。菌棒成熟后移入菇房脱袋出菇，并对出菇特性进行对比。

2结果与分析

2.1不同培养基中香菇菌丝体生物量和发酵液pH 值

由表1可见，配方③培养条件下的菌丝体生物量最多，且菌球大小较为均匀，适合作为液体菌种培养基配方使用。而配方④和⑥中的菌丝体生物量较低，均不适于采用。在起始pH值都为6的情况下，发酵液终止pH值大小与菌丝体重量呈负相关，其中配方③终止pH值最低，为3.11，配方⑥终止pH值最高，为4.32。

2.2不同培养基菌种接种香菇菌棒后菌丝生长情况

从表2可以看出，在菌棒不经刺孔的情况下，传统固体接种自然满袋天数为55天，成熟需120天，而液体菌种中最快的配方③仅需43天即可满袋，98天即可成熟，整个培养周期大大缩短。配方⑥平均满袋天数和成熟时间最长，可能是由于实际接种生物量太少，长势较弱，而且不能迅速长满。

2.3不同培养基菌种接种香菇菌棒的出菇特征

菌棒成熟转入出菇棚后一般经5～7天现蕾，因此试验中头潮菇现蕾前后顺序与成熟时没有发生变化，由表3可以看出出菇周期最短的为配方②和③，均为107天，较对照缩短了13天，而且利用这两种液体菌种接种香菇菌棒的生物转化率也较高，分别达到98.38%和97.44%，均高于对照的96.56%。由此可以看出，配方②和③较适于作为香菇液体菌种生产培养基；配方③整个发菌出菇周期为205天，较对照缩短了35天，配方②生长周期为215天，但生物转化率最高。

3讨论

本研究获得了较为理想的接种香菇菌棒的液体菌种配方，基本可以取代传统的菌种接种方式。但在试验过程中发现，液体菌种接种的香菇棒出菇时畸形菇稍多，整体品质与传统接种方法有差异，其机理有待进一步研究。总体来说，液体菌种接种具有明显的优势，周期大大缩短，产量甚至超过了传统接种方法[7]，液体菌种较传统的固体菌种具有用种量少、发菌快等优点[8]。因此液体菌种应用于香菇规模化生产具有很好的前景。目前的液体菌种应用得到广泛认可，在韩国 99%的金针菇工厂化生产企业采用液体菌种生产，大部分杏鲍菇工厂化生产企业也已采用液体菌种[9]。李贺等[10]认为在推进食用菌产业工厂化的进程当中，液体菌种代替固体菌种并广泛应用已经成为必然趋势，也只有通过大范围地使用液体菌种，才能实现我国食用菌产业从散户规模生产到工厂化、 智能化、 标准化生产的飞跃。

参考文献：

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[2]郭树凡， 张慧丽. 香菇液体菌种发酵条件的研究[J].中国食用菌，2005，24（1）：38-40.

[3]沈维铎，姚志伟，杨群. 香菇液体培养的工艺优化[J]. 武汉生物工程学院学报，2012（2）：86-89.

[4]秦秀丽. 香菇菌种液体培养基的优化[J].特产研究，2008，30（4）：49-50.

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[9]张引芳.食用菌工厂化生产中液体菌种的应用研究进展[J].菌物学报，2007，26（增刊）：393-397.

[10]李贺，王相刚，李艳芳，等.食用菌液体菌种生产研究进展[J].园艺与种苗，2012（6）：123-125.