1325份血培养标本细菌耐药性分析及耐药酶检测研究

【摘要】 目的 分析1325份血培养标本结果， 对病原菌的耐药性及耐药酶进行检测， 规范和指导抗生素的使用。方法 抽取血培养标本1325份， 采取SPI鉴定系统检测细菌及真菌的构成及分布情况， 细菌和真菌药敏试验分布应用KB（Kirby-Bauer）纸片扩散法和MIC法进行。结果 1325份血培养标本中， 病原菌分离出305株， 阳性率23.02%， 其中202株为革兰阴性杆菌66.23%， 主要为大肠埃希菌（30.92%）、铜绿假单胞菌（26.13%）、肺炎克雷伯菌（24.52%）、不动杆菌属（16.31%）及其他菌种（2.12%）；85株为革兰阳性菌（27.87%）， 主要为溶血葡萄球菌（34.21%）、表皮葡萄球菌（28.50%）、肠球菌（21.33%）、金黄色葡萄球菌（12.72%）， 其他菌种（3.24%）；其余18株为真菌（5.90%）；药敏试验显示革兰阳性球菌对青霉素、苯唑西林的耐药率较高， 革兰阴性杆菌对氨苄西林、哌拉西林等抗生素的耐药率较高。结论 1325份血培养结果显示菌种多样化、复杂化， 及时行血培养， 监测病原菌对各抗生素的耐药性， 对于减轻抗生素滥用现象， 指导临床正确、有针对性用药及减少耐药菌株产生有着积极的临床意义。

【关键词】 细菌耐药性；耐药酶；血培养

目前， 我国大部分医院都存在滥用抗菌药物的现象， 这加快了临床病原菌的变异及耐药性生成的进程， 远远超过了目前抗菌药物的研制进度[1]， 长此以往， 将到导致未来几十年内无药可用的严重问题， 因此及时监测病原菌的耐药性， 指导临床正确用药， 是目前抗感染领域内急需解决的首要问题。随机抽取本院住院及门诊患者血培养标本1325份， 对其中部分阴性杆菌及表面葡萄球行药敏试验分析， 旨在为规范和指导本院临床正确用药提供参考， 现将结果整理报告如下。

1 材料与方法

1. 1 材料 抽取本院2012年03月～2013年12月住院及门诊患者血培养标本1325份为研究对象， 共分离出305株菌株。

1. 2 仪器及试剂 金黄色葡萄球菌、白色念株菌、铜绿假单胞菌以及大肠埃希菌均购买自上海抚生生物技术有限公司；行血标本培养用的血培养仪（包含相关配套培养瓶）、M-H琼脂及哥伦比亚琼脂均购买自法国生物梅里埃公司；MIC法使用的真菌药敏试剂盒均购买自株海市银科医学工程有限公司；KB药敏纸片均购买自广州纳特生物科技有限公司。

1. 3 方法 科室在抽取血样标本时， 均严格依照无菌操作规则进行， 其中儿童患者采血3～5 ml， 成人患者采血5～10 ml[2]， 血标本采集后分别注入儿童瓶和成人瓶中， 并立即送入微生物室， 储存于全自动血培养仪中；若培养仪结果提示为阳性， 行转种培养， 有细菌生长为阳性；若仪器结果提示为阴性， 标本培养5 d后盲转；本文试验中采取API鉴定系统对获得菌种进行鉴定；对获得细菌菌株采取KB法行药敏试验， 对真菌菌株应用MIC法行药敏试验。

1. 4 结果判定 均依据2000年NCCLS的判断标准对本文培养结果及药敏试验结果进行判断[3]。

2 结果

2. 1 培养结果分析 2012～2013年1325份血标本培养细菌检测分布情况显示， 有305株标本结果显示为阳性， 阳性率为23.02%；305株阳性标本中， 其中202株为革兰阴性杆菌， 占66.23%；85株为革兰阳性菌， 占27.87%；18株为真菌， 占5.90%。

2. 2 菌种分布 202株革兰阴性杆菌中，最为常见的菌种依次为大肠埃希菌、铜绿假单胞菌、肺炎克雷伯菌、不动杆菌属及其他，所占比例依次为30.92%、26.13%、24.52%、16.31%和2.12%；85株革兰阳性菌中， 其中最为常见的菌种依次为溶血葡萄球菌、表皮葡萄球菌、肠球菌、金黄色葡萄球菌及其他， 所占比例依次为34.21%、28.50%、21.33%、12.72%、3.24%。其余8株为真菌， 占5.90%。

2. 3 耐药率检测 对上述菌种行药敏试验， 发现对于革兰阴性杆菌， 其多对哌拉西林、氨苄西林等抗菌药物有着较高的耐药性；而对于革兰阳性菌， 其对青霉素、苯唑西林等抗菌药物有着较高的耐药率， 详细检测结果见表1。

3 讨论

临床上滥用抗生素的现象屡见不鲜， 报道多有提及， 而这一现象的泛滥直接加快了细菌耐药率的增长， 尤其诸如耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）、高水平庆大霉素耐药（HLGR）、耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌（MRCNS）及产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）为典型代表的革兰性杆菌耐药率日益高涨的问题， 已经成为当前感染领域亟需解决的问题。对于ESBLs细菌而言， 其多表现为多重耐药性， 有研究报道显示质粒可介导其耐药基因， 这为同种细菌与不同种细菌之间的交叉传播提供了平台， 若未能及时给与相应抗生素预防及治疗， 可引发较为严重的院内交叉感染， 同时也会导致细菌耐药性向外院扩散；另外还有研究显示， 该类菌株行药敏试验时， 会呈现出对单酰胺类和头孢类抗生素敏感， 而在临床上的耐药率却较高， 致使临床治疗效果削弱， 延误了治疗。同时， 还有研究报道显示， 细菌性感染疾病容易加重患者病情， 引发较为严重的并发症；从临床数据看来， 感染性疾病作为临床上较为常见的一类病症， 其恶化乃至导致患者死亡， 很大程度上与菌血症及败血症的发生有着直接关系， 因此提升临床上检测病原菌水平， 对各细菌菌种的耐药率进行监测， 为临床合理使用抗生素提供有价值的指导性意见， 对于降低或治愈感染性疾病是极为重要的。

本文研究数据显示， 血培养标本中主要以格兰阴性杆菌为主（66.23%）， 其次为革兰阳性菌；行药敏试验发现格兰阴性杆菌对氨苄西林、头孢唑林、哌拉西林、庆大霉素等抗生素的耐药率较高；而革兰阳性菌对青霉素、苯唑西林等抗生素耐药率较高， 而这一实践监测数据显示， 强化临床上对血培养细菌的监测， 行药敏试验， 依据试验结果给予针对性的抗生素治疗， 尽量减少使用的不必要的广谱抗菌素， 对于降低或延缓耐药菌株的出现有着积极意义， 值得临床重视。

参考文献

[1] 晋兴，黄波，武爱荣，等.血液或无菌体液培养阳性标本中病原菌检测结果分析. 现代生物医学进展， 2013（29）：5708-5712， 5715.

[2] 刘静，王志娟，李昊，等.血培养标本中病原菌分布及其耐药性分析.第二十四届航天医学年会暨第七届航天护理年会论文汇编.中国航天科工集团公司， 2008：4.

[3] 陶黎黎，胡必杰，周春妹，等. 3644瓶阳性血培养病原菌分析及双份血培养意义评价.中华医院感染学杂志， 2010（2）：258-261.

[收稿日期：2014-05-08]