奇丹颗粒抗炎镇痛作用的实验研究

作者：江涛 楚博 唐春萍 杨超燕 陆伟根 曾昭智 张锦红

【摘要】 目的 探讨奇丹颗粒 治疗 子宫内膜异位症的抗炎镇痛作用。方法 采用二甲苯所致的小鼠耳廓肿胀、角叉菜胶所致大鼠足跖肿胀、大鼠棉球肉芽肿等急慢性炎症模型以及乙酸所致毛细血管通透性增高实验；热板法、乙酸诱导小鼠疼痛反应以及缩宫素所致实验性痛经模型，观察奇丹颗粒的抗炎镇痛作用。结果 奇丹颗粒能明显抑制乙酸和热刺激所致的小鼠疼痛反应；对缩宫素所致实验性痛经小鼠具有良好的镇痛作用，对乙酸所致小鼠腹腔毛细血管通透性增高以及大鼠角叉菜胶足趾肿胀、二甲苯所致小鼠耳廓肿胀、大鼠棉球肉芽肿等急慢性炎症模型均有明显抑制作用。结论 奇丹颗粒具有良好的抗炎镇痛作用，这些药理作用为其临床治疗子宫内膜异位症提供了实验依据。

【关键词】 奇丹颗粒 子宫内膜异位症 抗炎 镇痛

奇丹颗粒由黄芪、丹参、生蒲黄、五灵脂、三棱、莪术、没药、大血藤、败酱草等组成，具有活血祛瘀、行气止痛等功效。前期的研究（另文发表）表明：奇丹颗粒可通过调节子宫内膜异位症大鼠的内分泌,改善血液流变学异常，抑制异位内膜的血管形成，从而有效抑制异位内膜的生长。鉴于子宫内膜异位症常表现有下腹疼痛、痛经等临床症状，笔者对奇丹颗粒进行了抗炎、镇痛作用的研究，旨在为其临床治疗子宫内膜异位症提供药 理学 实验依据。

1 实验材料

1.1 药物与试剂

奇丹颗粒，规格：10 g生药/g，上海医药 工业 研究院提供，批号: 20070510；己烯雌酚（1 mg/ml）：广州白云山明兴制药有限公司，批号：061101；罗通定片：30 mg/片，广州康和药业有限公司，批号：041001；吲哚美辛：25 mg/片，广州华南药业有限公司，批号：060301；缩宫素注射液：规格：10 u/ml, 批号：061201， 广州白云山明星制药有限公司；乙酸泼尼松片：5 mg/片，天津太平洋制药有限公司，批号：070406；角叉菜胶：为sigma公司产品，批号：127h1227。

1.2 仪器

智能热板仪，型号：yls?6a，山东省医学 科学 院设备站；pv?200型足肿容积测量仪，成都泰盟科技有限公司生产。

1.3 动物

sd大鼠（合格证：2007a003）；nih小鼠（合格证号2007a004）；广东省医学实验动物中心提供，符合spf级标准。

1.4 统计学处理

数据以(±s）表示，采用spss12.0软件进行单因素方差分析，以p<0.05为差异有显著性。

2 方法与结果

2.1 镇痛试验［2］

2.1.1 奇丹颗粒对热刺激引起的小鼠疼痛反应的影响 取雌性nih小鼠，体质量18～22 g，将小鼠置于（55±0.5）℃热板上测小鼠基础痛阈值，选取基础痛阈在5～30 s的小鼠75只，随机分成5组，即生理盐水组、罗通定片阳性药物组、奇丹颗粒高、中、低剂量组。各组每天灌胃给药1次，连续5 d，末次给药后1 h、2 h测各小鼠痛阈值。 计算 痛阈提高百分率，比较各组间差异。结果见表1。

表1 奇丹颗粒对小鼠热板致痛反应的影响（略）

table 1 the effects of qidan granules on pain experiments induced by hot plate in mice

与生理盐水组比较:*p<0.05，**p<0.01

表1结果表明：奇丹颗粒中、高剂量可非常显著提高药后1～2 h小鼠痛阈提高百分率（p<0.05或p<0.01），提示奇丹颗粒具有镇痛作用。

2.1.2 奇丹颗粒对乙酸引起的小鼠扭体反应的影响 取nih小鼠75只，体质量18～22 g，雌雄各半，随机分为5组，即生理盐水对照组、吲哚美辛阳性药物组、奇丹颗粒高、中、低剂量组。各组每天灌胃给药1次，连续5 d，末次给药后1 h各鼠腹腔注射0. 6％乙酸生理盐水溶液（0.2 ml/只），观察15 min内出现扭体反应的次数，比较各组差异，结果见表2。

表2结果表明，与生理盐水组比较，吲哚美辛、奇丹颗粒高、中、低剂量组能显著减少由乙酸引起的小鼠扭体次数(p<0.05～0.01)，提示奇丹颗粒具有镇痛作用。

表2 奇丹颗粒对乙酸引起的小鼠扭体反应的影响（略）

table 2 the effects of qidan granules on acetic acid?induced writhing reaction in mice

与生理盐水组比较：*p<0.05，**p<0.01

2.1.3 奇丹颗粒对缩宫素所致小鼠痛经模型的影响［2］

取雌性nih小鼠90只，体质量18～22 g，随机分为6组，即正常对照组、模型组、吲哚美辛阳性药物组、奇丹颗粒高、中、低剂量组，除正常对照组外，其余各组每只小鼠皮下注射己烯雌酚注射液0.2 mg，以后每天注射0.1 mg，共注射10 d。于试验开始第6天，各组每天灌胃给药1次，连续5 d，末次给药后1 h各鼠腹腔注射缩宫素0.05 ml/只,记录扭体次数。结果见表3。

表3 奇丹颗粒对缩宫素所致小鼠痛经模型的影响 （略）

table 3 effects of qidan granuleson oxytocin?induced dysmenorrhea in mice

与正常对照组比较:##p<0.01;与模型组比较：*p<0. 05，**p<0.01

表3结果表明:与正常对照组比较,模型组小鼠有明显扭体反应(p<0.01)，说明小鼠痛经造模成功;吲哚美辛,奇丹颗粒高、中、低剂量组与模型组比较,可以显著减少小鼠扭体次数(p<0.05～0. 01)，提示奇丹颗粒对实验性痛经小鼠具有良好的镇痛作用,可抑制小鼠痛经的发生。

2.2 抗炎实验［3］

2.2.1 奇丹颗粒对二甲苯致小鼠耳肿胀的影响 取nih小鼠75只，雄性，体质量18～22 g，分组及给药同2.1.2项。末次给药后1 h，于小鼠右耳两面涂二甲苯50 μl，左耳不涂为正常耳对照，致炎30 min后，脱颈椎处死，用直径9 mm的打孔器分别在左、右耳同一部位打下圆耳片， 电子 天平称重，求左、右耳片重量差值为肿胀度，比较组间差异，并 计算 抑制率。结果见表4。

结果表明：奇丹颗粒中、高剂量能显著减轻二甲苯致炎小鼠的耳廓肿胀度（p<0.05～0.01），提示奇丹颗粒具有抗炎消肿作用。

2.2.2 奇丹颗粒对小鼠腹腔毛细血管通透性的影响 取nih小鼠75只，雌雄各半，体质量18～22 g，分组及给药同2.1.2项。末次给药后1 h，于各小鼠尾静脉注射0.5%伊文思蓝生理盐水溶液0.1 ml/10 g体质量，立即腹腔注射0.6%乙酸0.2 ml/只，20 min后脱颈椎处死小鼠，剖开腹腔，用5 ml生理盐水冲洗数次，收集洗液定容为10 ml，离心1 000 r/min×5 min，取上清液在分光光度计590 nm处测吸收（a）值，比较各组间差异。

抑制率（%)=空白组耳肿胀度-给药组耳肿胀度空白组耳肿胀度×100%

表4 奇丹颗粒对二甲苯致小鼠耳肿胀的影响（略）

table 4 effects of qidan granules on dimethylbenzene?induced acute ear swelling in mice

与生理盐水组比较：*p<0.05,**p<0.01

表5 奇丹颗粒对小鼠腹腔毛细血管通透性的影响（略）

table 5 effects of qidan granules on abdominal capillary permeability in mice

与生理盐水组比较：*p<0.05,**p<0.01

表5结果表明：奇丹颗粒高、中剂量能显著抑制乙酸所致小鼠毛细血管通透性增高，提示奇丹颗粒有抑制炎症渗出作用。

2.2.3 奇丹颗粒对角叉菜胶致大鼠足肿胀的影响 取sd大鼠50只，体质量180～220 g，雄性，随机分为5组，即生理盐水组、吲哚美辛阳性对照组、奇丹颗粒低、中、高剂量组。各组每天灌胃给药1次，连续5 d，末次给药1 h后，先用足跖容积测量仪测定大鼠右足跖容积，然后在大鼠右后跖部皮下注射1％角叉菜胶0.1 ml／只致炎，分别于致炎后1 h、2 h、3 h、4 h、5 h测量足跖容积，计算足肿胀度，比较各组的差异。结果见表6。

足肿胀度（ml）＝肿胀后各时间点足容积（ml）－肿胀前足容积（ml）

表6 奇丹颗粒对角叉菜胶致大鼠足肿胀的影响 （略）

table 6 effects of qidan granules on carrageen?induced toe swelling in rats

与生理盐水组比较: *p<0.05,**p<0.01

表6结果表明: 奇丹颗粒高剂量组在第1～5 h对大鼠足肿胀有非常显著的抑制作用（p<0.05～0.01）；中剂量组可明显抑制2～5 h大鼠足肿胀（p<0.05）。提示奇丹颗粒具有抗炎消肿作用。

2.2.4 奇丹颗粒对大鼠棉球肉芽肿的影响 取雄性sd大鼠50只，体质量160～180 g，0.4%戊巴比妥钠，10 ml/kg腹腔注射麻醉，于每只大鼠两腋下各置1个50 mg的灭菌棉球后缝合。随机分为5组，即生理盐水组、乙酸泼尼松阳性药物对照组、奇丹颗粒低、中、高剂量组。手术当天开始灌胃给药,1次／d，连续给药7 d，第8天脱颈椎处死大鼠，剥离棉球肉芽组织，置60 ℃烘箱中烘6 h，称重，计算肉芽肿重量（按mg/100 g体质量），结果见表7。

表7 奇丹颗粒对大鼠棉球肉芽肿的影响（略）

table 7 effects of qidan granules on cotton pellet-induced granuloma formation in rats

与生理盐水组比较： *p<0.05,**p<0.01

表7结果表明: 与生理盐水组比较，奇丹颗粒低、中、高剂量对大鼠肉芽肿增生有显著的抑制作用（p<0.05～0.01）。提示奇丹颗粒可抑制慢性组织炎症反应。

3 讨论

子宫内膜异位症(endometriosis，ems)是育龄妇女的常见疾病,它是一种良性的妇科疾病，但有类似于恶性肿瘤的远处转移和种植生长的能力，其病灶部位常伴有炎症的发生，出现反复出血，形成大小不等的囊肿并使局部粘连与疤痕，临床主要表现有痛经、盆腔包块或触痛的结节、不孕、月经不调等。 文献 报道［4］：子宫内膜异位症患者体内异位的内膜细胞及腹腔液中较多的巨噬细胞可使腹腔液中前列腺素水平增高，一方面引起强烈的子宫平滑肌收缩;另一方面使局部产生炎性反应而激活缓激肽，导致机体痛觉敏感，这二者是引起疼痛出现的重要原因。本实验结果表明：奇丹颗粒对冰乙酸、热刺激以及缩宫素所致的疼痛反应具有抑制作用，可明显抑制二甲苯致小鼠耳肿胀、角叉菜胶致大鼠足肿胀及乙酸致小鼠腹腔毛细血管通透性的增高，对大鼠棉球肉芽肿形成有明显的抑制作用，可对抗子宫内膜异位症的炎症和疼痛反应　，这些作用为其临床 治疗 子宫内膜异位症提供了实验依据。

【 参考 文献】

［1］ 徐叔云，卞如濂，陈修．药理实验方法学［m］．3版．北京：人民卫生出版社，2002：882-885.

［2］ 李晨,方坤泉,陈水英，等．抗痛经冲剂药效学实验研究［j］．西北药学杂志，2002，17(1)；17-19．

［3］ 陈奇.中药药理研究方法学［m］．2版．北京：人民卫生出版社，1993：346-347.

［4］ 牛建昭. 现代 中西医妇 科学 .