小尾寒羊胚胎移植技术探讨

摘 要：在我国，胚胎移植技术的羊用研究开始于20世纪70年代，到了20世纪80年代技术已经相对成熟，鲜胚的移植成功率达到了60%以上，有些单位和部门移植成功率甚至达到了70%以上。羊的胚胎移植技术的迅猛发展为我国养羊产业的现代化规模化增添了腾飞的动力。胚胎移植技术在动物种群的纯繁扩增、缩短世代间隔时间加速品种改良进程、保存优良品种资源等方面起到了重要的作用。本实验采用小尾寒羊做胚胎移植受体羊，移植胚胎用纯种杜泊羊与小尾寒羊杂交所得。

关键词：小尾寒羊 胚胎移植 经产羊 育成羊

1、材料与方法

1.1实验动物

受体母羊为经产小尾寒羊60只，育成小尾寒羊60只。供体母羊为3岁龄小尾寒羊20只，分为2组，一组输冻精，一组输鲜精。公羊为纯种杜泊羊2只，实验羊均正常饲养，健康无疾病。

1.2 主要实验药品

血促性素（PMSG） 1000IU/支 宁波第二激素厂

促卵泡素（FSH）宁波三生药业有限公司

促黄体素（LH）200IU/支 宁波三生药业有限公司

CIDR 新西兰哈密尔顿生物公司

1.3受体羊同期处理方法

采用埋置阴道栓的方法处理受体母羊，所有受体母羊统一埋置CIDR，埋栓当天为0天，第13天同样时间段撤栓，撤栓同时注射PMSG330IU。撤栓后12小时即可用试情公羊试情，隔12小时继续试情。

1.4供体羊处理方法

供体羊同样采用CIDR埋置法，埋栓当天为0天，第13天撤栓。撤栓前60小时开始给供体羊注射FSH，注射剂量依据体重调整。撤栓前24小时注射PMSG330IU。撤栓同时注射PG，剂量依据体重调整。撤栓后36小时输精，输精后注射LH。

1.5 供体羊的冲胚方法

供体羊手术前24小时空腹，手术时腹部备皮消毒，用羊用手术车保定，麻醉后在乳前腹中两条乳静脉间用手术刀片切口，手术切口约为4～5cm左右。用手或借助子宫钳把子宫慢慢牵引至体外，用医用消毒纱布固定。在子宫角分叉处一侧打孔，插入冲胚管，注入5ml左右气体，使气球膨胀，注意气体量要随时监控。在子宫角前段和输卵管连接处插入套管针，套管针通行顺畅，感觉到在腔内时注入冲卵液，注意冲卵液的注入速度要均衡，一次注入20ml～30ml左右。

1.6受体羊的移植方法

受体羊手术前24小时空腹，手术时腹部备皮消毒，羊用手术车保定，麻醉后在乳下2cm腹中线两侧切口，手术切口1cm～2cm左右。左侧插入腹腔内窥镜观察卵巢发育情况，右侧插入子宫抓钳。将黄体发育良好一侧子宫角轻提至体外，用移植针扎孔，注意扎孔时避开血管，从孔内注入胚胎。

2、结果

2.1 供体羊超排结果

本实验共使用20只小尾寒羊做供体，全部，统一采用腹腔镜输精法输精，其中输冻精组共取得胚胎数63枚，鲜精组共取得胚胎数69枚，其取得胚胎的详细情况详见下表1。

2.2 受体羊移植结果

实验共分经产羊、育成羊两组，统一饲养，不分群。具体移植情况见下表2。

2.3 受体羊产羔情况

可移植母羊受体为103只，但由于实验准备问题，取得的可移植用胚胎数目为98枚，所以最终移植母羊98只。具体妊娠情况见表3。

3、讨论与小结

3.1 实验所用冻精及鲜精在输精前全部在显微镜下检测，且每隔两小时检测一次，全部达到了输精所需标准，最终冻精组胚胎可用率为71.43%（45/63），鲜精组胚胎可用率为76.81%（53/69）。平均每只得胚数冻精组为6.3枚，鲜精组为6.9枚。可以看出冻精和鲜精在同等实验条件下，所得胚胎情况基本相等，冻精在仔细严格的操作规范下也可达到预期效果。

3.2 所有受体母羊埋置的同为CIDR栓，CIDR栓优点为掉栓少，对阴道污染少，但其成本高。实验所有羊只，只有一枚掉栓。经产组和育成组率分别为91.67%和95%。可移植率经产组为86.67%（52/60），育成组为85%（51/60），可以看出经产羊和育成羊在做胚胎移植受体方面差别不大，这就为经产羊的重复利用增加了可行性。但在实验中要注意受体羊的保护，尽量避免粘连情况的发生。

3.3 实验受体羊经产组的妊娠率为59.62%（31/52），育成组的妊娠率为63.04%（29/46）。两组相差不大，这也进一步说明了经产羊和育成羊在做受体时没有明显差距。

作者简介

王植朔（1982-），男，山东东阿人，硕士，主要从事羊的繁殖研究。