基质金属蛋白酶9在动脉粥样硬化中的表达

【摘要】 目的 本研究主要就基质金属蛋白酶9在小鼠动脉粥样硬化斑块血管中的具体表达情况展开分析讨论。方法 选择5周龄的雄性SPF级C57BL/6J小鼠8只作为对照组，另选8只周龄、性别，等级相同的载脂蛋白E基因（Apo-E）被敲除的小鼠作为观察组，将本研究的所有小鼠利用高脂食物分别喂到15周，20周时来对其进行取材检测。结果 两组小鼠的血清总胆固醇含量、基质金属蛋白酶9（MMP-9）的阳性表达、mRNA的平均光密度、蛋白平均光密度等情况存在明显的差异，具有统计学意义，P0.05。结论 在高脂喂食的Apo-E被敲除的小鼠模型中，MMP-9的阳性表达可能与小鼠体内的胶原纤维含量明显降低、动脉粥样化斑块形成等因素有关。

【关键词】 基质金属蛋白酶9；动脉粥样硬化；载脂蛋白E基因敲除

doi：10.3969/j.issn.1004-7484（s）.2013.08.137 文章编号：1004-7484（2013）-08-4229-01

所谓的基质金属蛋白酶是一种依赖于锌元素的细胞外基质降解分子，同时它还是一种可以参与到细胞外基质监管以及重塑的信号，它可以直接导致慢性炎症的形成。本研究将对基质金属蛋白酶9在小鼠动脉粥样硬化斑块血管中的具体表达情况进行对比分析，现报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选择5周龄的雄性SPF级C57BL/6J小鼠8只作为对照组，另选8只周龄、性别，等级相同的载脂蛋白E基因（Apo-E）被敲除的小鼠作为观察组，将本研究的所有小鼠利用高脂食物分别喂到15周，20周时来对其进行取材检测。

1.2 方法 ①取血：对所有小鼠进行称重后，用戊巴比妥钠来对小鼠进行麻醉处理，待麻醉起效后，摘除小鼠的眼球取血。将收集到的血液滴入含有抑肽酶的抗凝管中，然后对其进行离心处理后放入相应的试管中，并放入零下20℃的冰箱中保存。②血管标本的提取：小鼠在取血完成后，将其固定在操作台上，在对其皮肤进行消毒后，将其腹腔、胸腔打开，并将其心脏暴露在视野下。利用冻生理盐水将其心脏以及肝脏清洗到白色时，将其心脏发出的主动脉到主动脉分叉处的血管一同取下，对其进行清洗后，制成标本，并放置在零下80℃的条件下存储备用。③血清总胆固醇的测定采用全自动生化分析仪来完成。主动脉血管标本在零下80℃的条件下放置1周后，利用荧光定量PCR技术来对免疫组化检测MMP-9蛋白以及MMP-9mRNA的表达情况进行比较。

1.3 统计学分析 采用SPSS18.0软件对本研究的数据进行统计学的分析，计数资料的对比用X2检验，而计量资料的对比用t检验，P

2 结 果

2.1 观察组小鼠的AS模型评价 经过15周、20周的喂养后，观察组小鼠的体重为（29.10±2.49）kg，对照组小鼠的体重为（33.20±5.21）kg，两组小鼠的体重存在一定差异，具有可比性，但不具备统计学意义，P>0.05。两组小鼠的血清总胆固醇分别为（13.52±1.60）mEq/L和（2.12±0.39）mEq/L，他们之间的差异具有统计学意义，P

2.2 MMP-9蛋白以及MMP-9mRNA的表达 见表1。

3 讨 论

本研究采用了逆转录聚合酶与免疫组织化学来对载脂蛋白E基因被敲除的小鼠体内的MMP-9的表达情况进行研究。本研究的结果显示，在采用高脂来对其进行喂食的Apo-E被敲除的小鼠模型中，存在十分典型的AS斑块，其体内的胶原纤维也出现了明显减少的情况，其MMP-9在蛋白水平以及mRNA的相关表达上均出现了明显上调的情况。此外，本研究的结果还表明，小鼠的动脉粥样硬化的斑块中，小鼠的MMP-9的表达也出现了明显升高的情况。由此可见，在高脂喂食的Apo-E被敲除的小鼠模型中，MMP-9的阳性表达可能与小鼠体内的胶原纤维含量明显降低、动脉粥样化斑块形成等因素有关。

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