农残速测中常见结果异常分析

摘 要：农残速测在实际应用中经常会出现一些结果异常现象，以至于造成个别镇检测人员对农残速测方法的科学性及可靠性提出了质疑。本文简要介绍常见的检测结果异常现象产生原因及避免方法做一简单分析。

关键词：农残速测；酶抑制法；问题

中图分类号：S481.8 文献标识码：A

采用酶抑制原理进行的农残速测，因其检测时间快、成本较低、操作简便，是目前基层检测机构中广泛采用的农药残留检测方法。目前蓝田县农检中心采用厦门绿洲农残速测仪，主要工作任务就是应用农残速测仪对生产及销售环节的农产品进行例行监测和监督抽检。但是，农残速测在实际应用中经常会出现一些结果异常现象，以至于造成个别镇检测人员对农残速测方法的科学性及可靠性提出了质疑。笔者通过1a多的工作实践，认为检测异常结果的出现除少数是因为仪器故障和试剂质量的原因以外，多数原因都是由于试剂配制、检测室温度、样品前处理（即待测液制备）方法、操作熟练程度等因素所致。在此，笔者对常见的检测结果异常现象产生原因及避免方法做一简单分析。

1 常见的结果异常现象

1.1 假阳性

即在6个通道的抑制率中同时出现2个或2个以上≥50%。这是经常出现的情况。

1.2 0.01%或负值

即在同时检测出的6个抑制率中同时出现2个或2个以上为0.01%。这种偶尔出现的现象。

1.3 个别通道没数值

这种现象出现几率不大。

2 可能导致检测结果异常的因素

2.1 速测仪器

目前，蓝田县配置的12台速测仪中有3台出现某个分光光度计光源不亮的故障。当速测仪器的某个紫外光源出现故障不亮时，则该通道会出现抑制率无数值的异常情况。

2.2 检测试剂

从农残速测的酶抑制原理可以看出，检测所用的试剂是确保检测结果正确的关键和基础。在缓冲剂、酶、显色剂、底物这4种试剂中，酶和底物最易出现问题。如果在工作中没有严格按照酶试剂所要求的保存温度和反应温度进行保存和使用试剂，致使酶活性降低或失去活性，酶在底物中不起作用，底物不能被水解，也因此无法与显色剂结合生成黄色。此时，就会出现假阳性。而底物也存在自动水解的问题。

2.3 操作技术

在当抑制率出现异常结果时，首先应先检查仪器和试剂，在确认仪器无故障、试剂正常有效的前提下，肯定就是我们的操作出现了问题。试剂配制是否规范，空白对照检测值是否正确，样品提取方法得当，检测室的坏境温度是否合适，样品检测和对照检测温度和时间是否一致，检测人员操作是否熟练，加入底物后是否迅速放入比色池，这些都是影响检测结果的重要因素。

3 结果异常原因分析及避免办法

3.1 假阳性

当6个通道的抑制率同时有2个或2个以上≥50%，这一般即可判定为假阳性。具体原因可从以下几方面去查找：

3.1.1 对照检测值

从农残速测的基本原理可以看出，抑制率是样品值与空白对照值的一个比率，故空白对照值是检测结果正确与否的关键。故出现系统性的假阳性（即全部或多数样品是阳性）时，应检查对照值是否正常和准确。

3.1.2 反应温度

温度对酶的活性和稳定性影响很大，实验室必须在恒温条件下进行，所以，如果实验室不能满足恒温条件时应将10min的酶反应过程放在水浴锅中进行，故在冬季检测时都必须使用水浴锅。在夏季，酶液在稍高温度下其活性会随着时间延长而明显下降。上午配制好的试剂，其上午所做的对照检测值一般要比其下午的对照检测值大，如下午进行检测没有重新作对照检测，那么这时检测出的结果则常常会出现假阳性。所以夏季得试剂应随用随配，每次进行检测前都必须先做出准确的对照检测值。

3.1.3 取样方法

有的果蔬其取样方法不当也会造成假阳性。如生姜、葱、蒜、韭菜、香菜、西红柿、青椒、胡萝卜等蔬菜因其本身含有对酶有影响的次生物质或叶绿素较高，容易产生假阳性。对以上样品应使用整株浸泡法或冲洗法取样。当一组抑制率中出现2个以上抑制率为阳性时，应检查取样方法是否得当。

3.1.4 反应时间

不同抑制时间影响酶的抑制率，随着酶抑制时间的延长，抑制率也随之提高。如检测结果中同时出现几个抑制率为阳性，操作者要检查自己在实验操作过程中是否由于操作不熟练等原因导致样品加入底物后没有迅速放入比色池。

3.2 抑制率出现多个0.01%或负值

这一般是由于对照检测值小于实际值造成的系统错误。抑制率是样品值于对照值比较而得到的，如果在作对照检测时，由于操作不熟练加入的试剂量不准确而导致测出的对照值小于实际值，就会出现检测出的抑制率中有多个0.01%的异常现象。在实际工作中出现这种情况时，要重做对照。在工作中应正确掌握移液枪的使用方法，避免溶液洗空或推液不尽导致所取溶液体积不准，造成检测数据偏差。

3.3 个别通道无数值

一般是由于速测仪器的紫外光灯光源出现了故障。当比色池中某个通道紫外灯不亮时检测出的结果中会没有数值。故出现这种问题应先查看速测仪的紫外灯。如果确认仪器没有出现此问题后，检测人员应再想想是否某类试剂（酶、底物、显色剂）没有加入。