HPLC法测定盐酸二甲双胍缓释片的含量

【摘要】 目的 建立HPLC法测定盐酸二甲双胍缓释片的含量。方法 采用Diamonsil C18色谱柱(250 mm×4．6 mm,5 μm);流动相：0．01 mol/L磷酸二氢钾缓冲液含0．015 mol/L高氯酸(pH3．0)∶甲醇＝9∶1；流速：1 ml/min;检测波长为233 nm，以峰面积计算。结果 线性范围：25～375 μg/ml，r＝0．999 0。平均加样回收率为(99．9±0．8)％，RSD=0．8%，n=15。结论 本法简便、快捷，结果准确，重现性好，可用于盐酸二甲双胍缓释片的含量测定。

【关键词】HPLC法；盐酸二甲双胍；缓释片；含量测定

Determination of metformin hydrochloride sustained-release tablets by HPLC

LI Min-wei，REN Bin，HUANG Bi-ying，et al.Dept.of Pharmacy，the First Affiliated Hospital of Sun Yat-sen University，Guangdong，Guangzhou 510080，China

【Abstract】 Objective To establish a HPLC method to measure the content of metformin hydrochloride sustained-release tablets.Methods A Diamonsil C18 column(250 mm×4．6 mm,5 μm)was used.The mobile phase was a mixture of 0．01 mol/L KH2POH4 buffer with 0．015 mol/L perchloric acid(pH 3．0)∶methanol＝9∶1,and the flow rate was 1．0 ml/min.The detection wav-elength was at 233 nm.Results The linear calibration curves were obtained over the range 25 μg/ml to 375 μg/ml of metformin hydrochloride.The recovery of the assay was(99．9 ± 0．8)%，RSD=0．8%(n=15).Conclusion The method appeared to be simple，convenient and precise.It can be used for determining the content of metformin hydrochloride sustained-release tablets.

【Key words】

HPLC；Metformin hydrochloride；Sustained-release tablets；Content determination

盐酸二甲双胍是一种双胍类口服降糖药，用于非胰岛素依赖型糖尿病的治疗。该药主要作用于胰岛外组织，抑制肠吸收葡萄糖，增加周围组织对胰岛素的敏感性，增加非胰岛素依赖肝糖原异生作用。将二甲双胍制成缓释剂型后，可使药效维持时间明显延长，提高疗效。本文参考文献 [1，2]建立了HPLC法测定盐酸二甲双胍缓释片的含量，试验结果表明，该法简便、快捷、准确、重现性好。

1 仪器与试药

美国Waters公司高效液相色谱仪(515型泵，7725型手动进样器，996型光电二极管阵列检测器，Millennium32色谱工作站)；AG245电子天平(瑞士Mettler-Toledo公司)；MODELHN1012超声仪(中国华南超声设备厂)；Sigma 3K18高速冷冻离心机。

盐酸二甲双胍缓释片(规格每片500 mg，A厂：批号010402；B厂：批号040902；C厂：批号0501001；D厂：批号041212)；盐酸二甲双胍对照品(上海第十五制药厂生产，含量99．6％)；所用试剂均为分析纯，水为二次蒸馏水。

2 方法与结果

2．1 色谱条件 色谱柱：Diamonsil C18(250 mm×4．6 mm,5 μm)；流动相：0．01 mol/L KH2POH4缓冲液含0．015 mol/L高氯酸(pH3．0)∶甲醇＝9∶1；流速：1．0 ml/min；柱温：室温；检测波长233 nm；进样量20 μl。在该色谱条件下，盐酸二甲双胍保留时间为3．8 min，色谱图见图1。

2．2 检测波长的选择 取盐酸二甲双胍对照品适量，用2％甲醇溶解。照分光光度法(中国药典2005年版二部附录ⅣA)，在200～800 nm波长处扫描，结果显示，在233 nm波长处有最大吸收。

2．3 标准曲线 精密称取干燥恒重盐酸二甲双胍对照品约125 mg置于50 ml容量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，配成2．5 mg/ml的对照品储备液。分别精密吸取盐酸二甲双胍对照品储备液0．5、1、2、3、4．5、6、7．5 ml置于50 ml容量瓶中，加2％甲醇稀释至刻度，充分摇匀，配成25、50、100、150、225、300、375 μg/ml的标准溶液。吸取20 μl进样。以盐酸二甲双胍标准溶液的浓度C对其峰面积A进行线性回归，得回归方程为A＝2．77×105C＋9．06×105(r＝0．999 0)。试验结果表明，在25～375 μg/ml范围内盐酸二甲双胍的浓度和峰面积呈良好的线性关系。

2．4 回收率试验 称取已知含量的盐酸二甲双胍供试品(C厂)粉末适量(约相当于盐酸二甲双胍50 mg)，置于50 ml容量瓶中，分别精密加入盐酸二甲双胍对照品储备液适量(相当于盐酸二甲双胍45、50、55 mg)，加甲醇适量，超声20 min使溶解，定容，离心(10 800 r/min)5 min，过滤，吸取续滤液1 ml，置于10 ml容量瓶中，加水稀释至刻度，吸取20 μl进样。以实测值减去样品含量再除以盐酸二甲双胍对照品加入量，计算加样回收率。结果平均加样回收率为(99．9±0．8)％(n＝15)，RSD为0．8％，见表1。

2．5 样品测定 取4个厂家的盐酸二甲双胍缓释片各20片，精密称定，研细，混匀。精密称取适量(相当于盐酸二甲双胍500 mg)，置50 ml容量瓶中，加甲醇适量，超声20 min使溶解，定容，离心(10 800 r/min)5 min，过滤，吸取续滤液1 ml，置于50 ml容量瓶中，加水稀释至刻度，吸取20 μl进样。结果各厂家样品的含量分别为A厂104．7％，B厂99．9％，C厂102．6％，D厂98．7％，见表2。

2．6 精密度和重复性 精密称取供试品(C厂家)粉末适量(约相当于盐酸二甲双胍500 mg），共5份，按样品的测定项下操作，分别测定样品含量，结果平均为102．9％，RSD为0．7％。

3 讨论

盐酸二甲双胍水溶性强，保留时间短，且与杂质峰难以分离，加入0．015 mol/L高氯酸后，保留时间延长，分离度提高，峰型对称，片剂辅料及杂质没有干扰。

供试品为缓释制剂，辅料多为高分子材料，遇水成凝胶状物，所以用甲醇提取，经超声等处理后平均加样回收率为(99．9±0．8)％。

本文所用HPLC法简便、快捷、结果准确、重现性好，可作为盐酸二甲双胍缓释片质量控制的有效方法。

参考文献

1 马虹,黄洁夫.临床医生用药大全.广东科技出版社,2000：1157.

2 中华人民共和国国家药典委员会.中国药典.化学工业出版社,2005：458．附录28.