紫外分光光度法测定汉防己甲素注射液的含量分析

汉防己甲素也称粉防己碱。临床主要用于治疗早期轻度高血压，也可用于治疗重症高血压以及高血压危象[1]。其药理作用有对抗过敏介质的释放和作用；使心肌的收缩力降低，使心动的频率减慢，并扩张末梢的血管，进而降低外周阻力减轻心脏后负荷；降低患者的心肌耗氧量，有效抑制兴奋一收缩偶联及松弛血管的平滑肌[2]。为更好的对汉防己甲素注射液的质量进行控制，本文采用紫外分光光度法对汉防己甲素注射液的含量进行测量，通过实验证明该法可以作为汉防己甲素注射液的质量控制标准。现报告如下：

1 仪器与试药

日本岛津生产的紫外可见分光光度计（UV―260）， 美国生产电子天平（AA200）。含量为1.5%的自制汉防己甲素注射液，汉防己甲素样品，分析纯盐酸，分析纯氯仿，分析纯苯等试剂。

2 方法

2.1 制备标准汉防己甲素的精制品

首先取汉防己甲素样品适量，加入丙酮进行溶解，经滤过和浓缩后得出针状的结晶体，将所得到的结晶体在苯中进行溶解，加入活性炭进行脱色后再使用无水乙醇进行重结晶精制，最后将所得精制品放在110摄氏度温度下至恒重。

2.2 制备标准品的溶液

将在110摄氏度温度下至恒重的汉防己甲素精制品精密称取15毫克，放置在100毫升的容量瓶中，加入浓度为0.1mol每升的盐酸先溶解再定容，再取稀释液1毫升放置在另一个100毫升容量瓶中，再加浓度为0.1mol每升的盐酸先溶解再定容，摇匀后完成。

2.3 配备供试品的溶液

取含量为1.5%的自制汉防己甲素注射液1毫升，放置在100毫升的容量瓶中，如入浓度为0.1mol每升的盐酸先溶解再定容，在精密量取稀释液2.5毫升，放置在10毫升的容量瓶中，加入浓度为0.1mol每升的盐酸先溶解再定容，摇匀后完成。

2.4 选择测定的波长

取适量的汉防己甲素的精制品，使用注射液的溶剂进行稀释到适当的溶度，以注射液溶剂为空白试剂对照，使用紫外分光光度在200纳米到400纳米之间进行扫描，测得在284纳米下有最大吸收。

2.5 绘制标准曲线

分别精密量取标准品溶液1.0毫升，1.5毫升，2.0毫升，2.5毫升，3.0毫升，3.5毫升，4.0毫升并分别放置在10毫升容量瓶中，每个容量瓶分别加入浓度为0.1mol每升的盐酸先溶解再定容，使用0.1mol每升的盐酸作为空白溶剂，在284纳米处测量吸收度，并以浓度为纵坐标，以吸收度为横坐标，绘制标准曲线，测得回归方程是C=90.18A+0.1849（r=0.999 9），汉防己甲素在15.0~60.0μg/mL的范围内，浓度和吸收度具有良好线性关系。

2.6 汉防己甲素注射液溶剂干扰试验

使用0.1mol每升的盐酸，作为空白试剂，测出汉防己甲素注射液溶剂的吸收度是0.001。

2.7 汉防己甲素注射液含量的测定

选择自制的含量为1.5%的汉防己甲素注射液的样品共3批，按“配备供试品的溶液”项下方法进行制备，使用紫外分光光度计在284纳米下对吸收度进行测量，按所得汉防己甲素的回归方程进行计算。

3 结果

汉防己甲素注射液选择0.1mol/L的HCl作为溶剂，并将其稀释为浓度为15.0~60.0μg/mL，再选择在284nm波长处使用紫外分光光度法进行测定，可见浓度与吸收度间存在明显的线性关系，3批样品进行含量测定，均在标示量97~101%间。

4 讨论

目前对汉防己甲素注射液的含量测定方法我国的药典还没有标准的参照方法，对于其含量的测量好主要采用薄层分离再使用容量法进行测量，进行实验的操作复杂，误差比较大[3]，本文采用紫外分光光度法对汉防己甲素的制备标准曲线、稳定性好的溶剂、最大吸收峰及确定最佳测定浓度范围等进行分析，并对其进行含量测定。汉防己甲素注射液选择0.1mol/L的HCl作为溶剂，并将其稀释为浓度为15.0~60.0μg/mL，再选择在284nm波长处使用紫外分光光度法进行测定，可见浓度与吸收度间存在明显的线性关系，3批样品进行含量测定，均在标示量97~101%间。对汉防己甲素注射液的溶剂进行测量，主要是排除溶剂的干扰因素，本文自制的汉防己甲素的溶剂是0.5%的氯化钠、0.1%的焦亚硫酸钠、0.03%的EDTA―2Na[4]，测得其吸收度为0.001，对实验的正常进行没有较大影响。结果显示，采用紫外分光光度法对汉防己甲素注射液进行含量测定的结果可靠性高，对比目前常用的提取容量法，具有出结果快速，准确性高的优势，尤其适合在药剂的快速检验中使用。

参考文献

[1]刘云海，舒文，紫外分光光度法测定汉防己甲素注射液的含量[J]，医药导报，2001,20（11）：711―711.

[2]邵青烟，俞丽君，晏敏红，紫外分光光度法测定汉防己甲素片溶出度 [J]，浙江预防医学，2003,15（11）：74―75.

[3] 谭桂山，徐平生，袁寿洪，等，汉防己微囊中汉防己甲素的含量测定[J]，中国药学杂志，2003，38（7）：424―426.

[4] Shen YC,Chou CJ,Chiou WF.Anti-inflammatory effects of the partially purifyied extract of radix Stephaniae tetrandrae:comparative studies of its active principles tetrandrine and fangchinoline and fangchinoline on human polymorphonuclear leukocyte functions[J].MolPharmacol.2004 Nov;60(5):1083-1090.