黄柏盐炙工艺影响因素分析论文

【摘要】目的：确定影响黄柏盐炙工艺的因素。方法:以盐酸小檗碱为检测指标，用HPLC法分别考察不同闷润时间、加盐量、炒制时间和温度等因素下不同炮制品中盐酸小檗碱的含量。结果：黄柏经盐润后，盐酸小檗碱的含量增加；闷润2个小时盐酸小檗碱的含量最高；随着炒制温度的提高和时间的延长，盐炙黄柏和清炒黄柏中盐酸小檗碱的含量均有下降的趋势，但盐炙黄柏中盐酸小檗碱的含量均较相应的清炒黄柏中的含量高。结论：加盐量、闷润时间、炒制温度与时间均为影响盐炙黄柏炮制工艺的影响因素。

【关键词】黄柏盐炙工艺

黄柏为芸香科植物黄皮树PhellodendronchinenseSchneid．的干燥树皮。该药苦、寒。归肾、膀胱经。具有清热燥湿，泻火除蒸，解毒疗疮之效。已经有二千多年的药用历史，为中医传统的清热泻火药。自晋代以来大量的医药文献中，计有净制、切制、蜜制、酒制、盐制、炭制、乳汁制等近20种炮制方法。2005年版《中国药典》[1]只收载了盐制和炭制的方法。

中医传统理论认为黄柏盐炙可引药入肾，缓和苦燥之性，增强滋肾阴、泻相火、退虚热的作用。在2005年版《中国药典》[1]的附录药材炮制通则中对盐制黄柏是这样规定的：“取净药材，加盐水拌匀，闷透，置锅内，以文火加热，炒至规定的程度时，取出，放凉。每100kg净药材用食盐2kg。”但对黄柏的盐制工艺如溶解盐的加水量、闷润时间、加盐量、炒制的温度和时间、炒制的程度等并未做出明确的规定，这就导致盐制黄柏的炮制品质量有很大差异。特别是加盐量和炒制程度，各省的炮制规范有很大差异。如《湖南省中药材炮制规范》[2]（1983年版）规定：……炒至外表呈黄褐色，取出即可。每100kg药材用盐5kg。而《四川中药饮片炮制规范》[3]中则规定：……炒至黑黄色为度。每100kg药材用盐2kg。为了阐明炮制机理，本文以黄柏中的主要成分盐酸小檗碱为检测指标，对影响黄柏盐制工艺的几个因素进行了考察，为今后制定黄柏盐制的合理炮制工艺，阐明炮制机理提供科学依据。

1仪器与试剂

LC-10ATVP高效液相色谱仪、SPD-10AVP紫外检测器（岛津）；KQ-250型超声波清洗器（昆山市仪器有限公司）；SartoriusDp225D型电子天平；QE-200克药材粉碎机（武义县屹立工具有限公司）；黄柏药材，购自四川省药材公司，经辽宁中医药大学药用植物教研室王冰教授鉴定为芸香科植物黄皮树PhellodendronchinenseSchneid.的干燥树皮。盐酸小檗碱对照品（中国药品生物制品检定所，批号：0713-9906）；乙腈为色谱纯，水为重蒸馏水，其它试剂均为分析纯。

2黄柏中盐酸小檗碱的含量测定

2.1色谱条件色谱柱TC-C18（150mm×4.6mm，安捷伦）；流动相：乙腈-0.1%磷酸溶液（50：50）（每100ml加十二烷基硫酸钠0.1g），检测波长为265nm；流速：1ml/min；柱温为30℃。理论板数按盐酸小檗碱计算应不低于4000。

2.2对照品溶液的制备精密称取在100℃干燥5小时的盐酸小檗碱对照品适量，加甲醇制成每1ml含0.1mg的溶液，即得。每次进样5μl。

2.3供试品溶液的制备取本品粉末（过40目筛），精密称定，置100ml量瓶中，加甲醇约80ml，超声处理（功率250W，频率40kHz）30分钟，放冷，用甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。每次进样10μl。

2.4线性关系考察精密称取盐酸小檗碱对照品5.06mg,置50ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀,即得每1ml含盐酸小檗碱0.1012mg的对照品溶液。分别精密吸取对照品溶液2.5、5.0、7.5、10.0、12.5?L，按上述色谱条件测定，以峰面积积分值为纵坐标，盐酸小檗碱进样量（?g）为横坐标，经线性回归处理，回归方程为Y=2299814.229x-7561,r=0.9998。结果表明盐酸小檗碱的进样量在0．253～1.265?g范围内呈良好的线性关系。

2.5精密度试验取对照品溶液重复进样5次，每次进样5?L，测得峰面积积分值，平均峰面积为1094362.8，RSD为0.98%。

2.6稳定性实验取生品的供试品溶液一份，分别在0、1、2、3、6、10、12、24h分别测得峰面积，平均峰面积为1059038.5，RSD=1.04%，表明在24小时内基本稳定。

2.7重复性试验取同一批的生品五份，分别精密称定，按上述样品溶液制备方法和色谱条件测定，平均含量为0.451%，RSD为2.26%。

2.8加样回收率试验采用加样回收法，取已知含量的生品精密称定，再分别精密加入盐酸小檗碱对照品适量，按上述样品溶液制备方法和色谱条件测定，计算平均回收率为99.03％，RSD为2.21%（n=5）。

3影响黄柏盐炙工艺的因素考察

3.1溶解盐的溶媒（水）用量的考察取100g黄柏饮片6份，按每100g药材加入2g盐的比例，分别加入20ml、30ml、40ml的水将2g盐溶解（每个溶液量各做2份），用喷壶均匀喷洒在药材表面，并置密闭容器中闷润90分钟。结果：当溶媒用量为20ml时，药材未能完全润透；用量为40ml时，药材未能将水完全吸尽，容器底部仍有剩余液体；当用量为30ml时，药材完全将盐水全部吸尽，且药材润透。故将溶解盐的溶媒（水）用量定在每100g药材用水30ml将盐溶解。

3.2加盐量的考察

3.2.1盐对黄柏中盐酸小檗碱含量的影响取黄柏50g其中一份不加盐只喷入15ml的水，另一份用同样量的水将药材量2%的盐溶解，再喷入药材；各做2份。闷润90分钟后，取出，摊开自然干燥，测定含量，结果见表1。表1加盐与不加盐的含量比较

3.2.2加盐量对黄柏中盐酸小檗碱含量的影响取黄柏50g，再分别取药材量1%、2%、3%、4%、5%、6%的盐，均用同样量的水（按每100g药材用水30ml）溶解，喷入，闷润90分钟，取出，摊开自然干燥，测定含量，结果见表2。表2加盐量对含量的影响

3.3闷润时间的影响取黄柏50g，用药材量2%的盐、30%的水喷入，分别不闷润、闷润1h、2h、4h、6h和8h，然后在140℃的温度下炒5分钟，晾凉后，粉碎过筛，测含量，结果见表3。表3闷润时间对含量的影响

3.4炒制时间和温度的影响

3.4.1清炒法对盐酸小檗碱含量的影响取黄柏50g，分别在130℃、140℃、150℃、160℃和170℃分别炒3、5、7分钟，结果见表4。表4炒制温度和时间对含量的影响（清炒法）

3.4.2水润炒对盐酸小檗碱含量的影响取黄柏50g，按药材量30%的水喷入闷润90分钟后，分别在130℃、140℃、150℃、160℃和170℃炒3、5、7分钟，结果见表5。表5炒制温度和时间对含量的影响（水润炒法）

3.4.3盐炙法对盐酸小檗碱含量的影响取黄柏50g，按药材量2%的盐和30%的水闷润90分钟，分别在130℃、140℃、150℃、160℃和170℃炒3、5、7分钟，结果见表6。表6炒制温度和时间对含量的影响（盐炙法）

4讨论与结论

4.1传统中医药理论认为，药物经盐炙后，增强疗效。从实验结果来看，黄柏经盐水喷润后无论炒与未炒盐酸小檗碱的含量皆较生品有所增加；且随着含盐量的增加，盐酸小檗碱的含量先随之增加，后又缓慢下降。认为盐的加入不仅使药材组织变得松脆，易于粉碎，更有利于有效成分的溶出，使盐酸小檗碱的含量增加。

4.2闷润时间对黄柏中盐酸小檗碱的含量也有影响，但影响不太大。从结果来看，闷润2个小时不但使药材润透，且有效成分的含量也比较高。

4.3从炒制温度和时间对黄柏中盐酸小檗碱含量的影响结果上看，随着炒制温度的提高和时间的延长，盐酸小檗碱的含量有下降趋势，温度越高，炒制时间越长，含量越低。清炒法和水润法相比较，水润法比清炒法中盐酸小檗碱的含量稍高，估计是药材经水闷润后再炒制，破坏了药材中的粘液质成分，使有效成分易于溶出。在相同的温度和时间下，盐炙法的含量要明显高于清炒法和水润法，这进一步验证了盐炙法不仅使能引药下行，增强滋阴降为的作用，更有助于药物的粉碎，使有效成分的易于溶出。

4.4从以上影响黄柏盐炙因素的考察结果来看，闷润时间、加盐量与炒制温度与时间对盐酸小檗碱的含量皆有影响。这为下一步确定黄柏盐炙的合理炮制工艺、阐明黄柏炮制的机理，制定黄柏炮制品的质量标准提供了可靠的依据。

【参考文献】

[1]国家药典委员会．中国药典[S]．2005年版一部．北京：化学工业出版社，2005：214．

[2]湖南省卫生厅．湖南省中药材炮制规范[S]．湖南人民出版社出版，1983：261．

[3]四川省卫生局．四川中药饮片炮制规范[S]．四川人民出版社出版，1978：253．