金标法在无偿献血工作中的应用分析

我国是乙型肝炎高度流行区，乙肝表面抗原(HBsAg)携带者达10％，HBsAg阳性是造成血液检验不合格的主要原因之一。为减少因HBsAg阳性导致的血液报废，金标法已被广泛用于献血前HBsAg检测。虽然金标法在准确度、敏感度上都不及ELISA法，但ELISA法操作费时，程序较为复杂，适宜作确定实验用。金标法检测HBsAg具有简便、快速、无需特殊仪器设备、易观察结果等优点，适合于无偿献血者现场采血前筛查，可有效降低血液报废率，减少工作人员交叉感染风险。但在利用金标法检测HBsAg过程中，偶尔会出现HBsAg阳性漏检现象。笔者对漏检原因进行了分析，现报告如下。

1 加样量不规范

试剂说明书规定加样量为50 μl，如果血量过少，会造成HBsAg浓度比实际浓度降低，引起漏检；如果血量过多，会造成血液外溢，且滤膜无法有效阻挡红细胞，使红细胞和血清一起向检测线移动，造成检测背景呈红色，影响弱阳性结果判读。

2 观察时间过短

采血车上空间相对狭小，人员较为集中，让大批量献血者等待20~30 min后再观察结果有一定困难，往往等不到规定的反应时间就报告结果，造成弱阳性标本漏检。

3 温度、湿度等环境因素

温度、湿度过高或过低，都会影响抗原抗体反应，也可影响血清在滤膜上的层析速度，进而影响试验结果。

4 金标试剂本身的局限性

金标法试剂的灵敏度不及ELISA法，会造成部分弱阳性标本的漏检，高剂量的阳性标本可能存在后带现象；少数标本可能存在乙肝病毒亚型变异而造成漏检。另外试剂保存不当、受潮，也可导致阳性标本的漏检。

为了扬长避短，更好的应用金标法，尽量减少金标法在应用中出现的差错，笔者认为要注意以下几点：①建立标准操作规程(SOP)，工作人员必须学习、掌握；②选购灵敏度高、特异性好的优质试剂，并按规定条件保存、使用；③严格遵守操作规程，加样量要准确，耐心做好献血员工作，保证有足够的反应时间；控制环境条件，尽量保持适宜的温度、湿度；打开后未用完的试纸条，要密封保存，以防受潮；④严格按操作说明书进行检测步骤，不能前后颠倒顺序，或者多加、少加某一试剂；⑤要保证一人一个加样管，不能一管多用，否则易造成假阳性；⑥对有些检测结果不清楚的，似阴非阴，似阳非阳，一定要重新做，以确保结果的准确性；⑦血液标本送到血站检验科使用ELISA 试剂检测后，如果发现有漏检标本，应分析查找原因，有针对性的采取措施，减少阳性标本的漏检，节约宝贵的血液资源。

金标法由于受实验条件及方法学的限制，不能够完全取代ELISA法。献血后的血液标本，应按有关规定，送回站内使用ELISA法做初检、复检两次检测，以保证检验质量，保证临床用血安全。