时间：2022-07-30 06:51:22
【摘 要】目的：研究六味地黄汤（煎剂）及其加味枸杞子、六味地黄丸对生精障碍大鼠的与相关生殖激素的影响。方法：以醋酸棉酚建造生精障碍模型大鼠，以六味地黄汤及其加味方枸杞子、六味地黄丸灌胃治疗，考察实验组大鼠的数量、质量、血清T、FSH、LH水平。结果：实验组大鼠的数量与模型组比较有显著性差异（P
【关键词】六味地黄汤；枸杞子；大鼠；；生殖激素
【中图分类号】R285.5 【文献标识码】A 【文章编号】1004―7484（2013）09―0575―02
男性不育症是现代社会男性一种重要的身心疾患，它给男性带来了沉重的心理枷锁，不仅影响到婚姻、家庭、社会的稳定，而且也影响我们人类社会自身的生存繁衍和发展。
六味地黄汤（丸）（简称LW）是滋阴补肾的经典名方，其功效是滋阴补肾，兼益肝阴，主治肾阴不足等。据《仁术便览》载：“六味地黄丸（汤），男妇俱宜服。东垣治妇人阴血不足无子者，服之能使胎孕。” 现代临床实践表明六味地黄丸（汤）治疗少、弱的男性不育症疗效显著，但对其机理尚未明了[1-5]。枸杞子滋补肝肾，主治虚劳精亏，血虚萎黄，是治疗男性不育的主要中药之一。本研究建造生精障碍模型大鼠，研究六味地黄汤及其加味枸杞子对生精障碍大鼠的及生殖内分泌激素的影响，报道如下。
1材料与方法
1.1药品、试剂与仪器
促黄体生成激素（LH）、促卵泡刺激素（FSH）、睾酮（Testosterone）放射免疫检测试剂盒：天津德普生物技术和医学产品有限公司；氯化钾、果糖、磷酸二氢钾、苦味酸、等，AR级，均为国产。
市售六味地黄丸：河南宛西制药厂生产，浓缩丸，每8丸含生药3g；醋酸棉酚（Gossypol acetate）：国产，纯度99.9%（HPLC法）；枸杞子等药材购自中药饮片有限公司，符合《中国药典》规定。
Olympus光学显微镜、Olympus BX60F5型摄影显微镜：均为日本Olympus Optical Co.Ltd生产；SN-695B型智能放免测量仪：上海原子核研究所日环仪器一厂。
1.2 实验动物
Wistar雄性大鼠50只，清洁级，体质量140～160g。
1.3 实验方法
1.3.1 实验药剂的制备
LW煎剂：按LW复方，取各药材粉碎过30目筛，准确称取各药材，加5～7倍量去离子水，沸水合煎60min，共3次，合并上清，55～60℃浓缩，制备成1.0g生药/ml。冷藏，备用。LW加味枸杞子方煎剂的制备同上。
LW丸溶解液：LW丸加3～4倍量去离子水，充分溶解，制成1.0g生药/ml。冷藏，备用。
实验中使用的Bouins液、营养液等参照有关文献配制。
1. 3.2 生精障碍大鼠模型的建造与治疗
Wistar雄性大鼠适应性饲养2天后随机分为正常对照组（10只）和建造模型组（40只）。
以醋酸棉酚按50mg/kg体质量灌胃，隔日一次，连续2周，建造大鼠生精障碍模型。
将40只生精障碍模型大鼠再随机分为模型组、LW煎剂组、LW丸剂组、LW加枸杞子组，每组10只。实验组按10.0g生药/kg体质量，分别给以相应的药物灌胃；正常对照组、模型组给以等量的生理盐水灌胃；每日一次，连续3周。
1.3.3 实验大鼠的处理及相关检测
各组大鼠于末次给药2h后，眼眶取血于洁净的玻璃试管中，静置，待血液凝固，离心，取血清，冷藏，待测。立即处死大鼠，剖腹取出、附睾，剔除脂肪和结缔组织，吸干血液、组织液，电子天平称重。
取附睾尾部，计数并观察其活力情况；同时做爬高试验，记录30分钟的爬高距离，以考察的质量。
放射免疫测定法（Radioimmunoassay，RIA）测定大鼠血清生殖激素T、FSH、LH。以t检验比较各实验组与模型组之间的差异。
2结果与分析
2.1 对实验大鼠的性器官、的影响
2.1.1 对实验大鼠生殖器官重量的影响
LW及其加味枸杞子方均能使实验组大鼠、附睾重量增加，不同组增幅不同，详见表1。
2.1.2 对实验大鼠的数量和质量的影响
Wistar大鼠以醋酸棉酚建造成生精障碍后，经LW不同剂型及其加味方治疗，实验各组的数量和质量均有显著改变，详见表2。
实验表明：模型组的数量显著低于正常对照组和LW各组，有非常显著性差异（P
活力观察：在计数之前在显微镜下观察的活力，模型组活力很差，a级很少，绝大多数原地缓慢移动；而正常对照组、LW不同剂型组和LW加味枸杞子组的活力明显优于模型组，活跃，多数直线运动，a级明显增多。
2.2 LW及其加味枸杞子对雄性大鼠生殖激素的影响
LW不同剂型及其加味枸杞子可显著影响实验各组大鼠的生殖内分泌激素水平，详见表3。
模型组大鼠血清的睾酮（T）水平显著低于正常对照组、LW煎剂和LW加味枸杞子组（P0.05）。表明LW煎剂及其加味枸杞子可显著地提高生精障碍大鼠血清的睾酮水平。
模型组大鼠血清的促黄体生成素（LH）水平低于正常对照组和LW治疗后各实验组，有显著性差异（P0.05）。表明LW不同剂型及其加味枸杞子均可显著地提高生精障碍大鼠血清的LH水平。
模型组大鼠血清的促卵泡刺激素（FSH）水平高于正常对照组、LW煎剂和LW加味枸杞子治疗组（P
实验表明，LW丸剂对实验雄性大鼠生殖内分泌激素调节作用明显低于LW煎剂和LW加味枸杞子煎剂。
3讨论
棉酚的雄性抗生育作用主要是其能抑制的发生[6]。本实验模型组的数量、质量与正常对照组比较，均有显著性差异（P
3.1对实验大鼠的性器官、的影响
与附睾的重量、的数量是生精功能的直接反映，本实验计数结果：模型组大鼠的数量最少，显著低于各LW给药实验组，有非常显著性差异（P
活力是质量的重要表现，显微镜下观察的活力情况，结果表明：模型组的较少，活动情况很差，大多数仅有缓慢的蠕动。各给药实验组的数量明显多于模型组，活力也明显优于模型组，大多数活跃地运动，a、b级显著增多。
爬高试验是评价活力（质量）的有效的方法[7]。实验结果表明：正常对照组和LW给药实验各组30分钟爬高均高于模型组，与模型组比较有显著性差异（P
3.2对雄性大鼠生殖内分泌激素的影响
生殖内分泌功能在男性不育中发挥重要作用。的发生是在下丘脑―垂体―的内分泌系统调控下进行的。
实验结果显示模型组的T水平显著低于正常对照组（P
3.3 LW不同剂型及其加味枸杞子对实验性生精障碍大鼠的治疗效果
本实验结果表明LW不同剂型和LW加味枸杞子对实验性生精障碍大鼠治疗后的性器官、质量与数量、生殖内分泌激素等指标综合判断，LW煎剂和LW加味枸杞子煎剂的疗效优于LW丸剂，以LW加味枸杞子煎剂的疗效最佳。实验结果提示有进一步深入研究的意义。
参考文献：
[1] 靳风烁，方玉华，邓晓洪.克罗米芬和六味地黄丸治疗男性不育的临床观察[J].中西医结合杂志，1991，11（6）：368-369.
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[8] 史小林主编.人类生殖学[M].北京：科学出版社，2002：347-362.
作者简介：
朱 瑞（1984- ），女，安徽寿县人，学士，助理实验师。