复方羊角片补充检验方法的研究

【摘要】 目的建立复方羊角片补充检验方法。 方法用补充检验方法对复方羊角片进行异性有机物鉴别。 结果此补充检验方法可检出复方羊角片处方药材白芷的植物组织。 结论该方法操作简便、重现性好,可用于建立复方羊角片补充检验方法。

【关键词】复方羊角片;补充检验方法;异性有机物

复方羊角片收载于《卫生部药品标准中药成方制剂第八册》系由羊角镑片,加水煎煮二次,3 h/次,分次滤过,合并滤液,浓缩成膏;其余川芎等三味粉碎成粗粉,照流浸膏剂项下的渗漉法,以30%乙醇为溶剂,进行渗漉,至漉液无色或无生物碱反应为止,收集渗漉液,回收乙醇,浓缩成膏,与羊角膏及辅料适量混匀,制粒,干燥,压制成1000片,包糖衣,即得。药材全部提成浸膏加蔗糖和糊精制成,为全浸膏制剂,不应含有植物组织。本实验在对某企业生产的该药品进行质量检验时,检出了淀粉粒、草酸钙簇晶、导管、木栓细胞等异性有机物,该异性有机物判断为处方药材白芷的植物组织。针对该药品含有的异性有机物,本实验制定了补充检验方法,并进行了方法学研究。

1 仪器与材料

1.1 仪器

CX31RTSF型生物显微镜奥林巴斯株式会社生产100倍;CX41RTSF型生物显微镜奥林巴斯株式会社生产100倍/400倍。

1.2 试药

甘油,沈阳市试剂五厂,分析纯,批号:0303031;冰醋酸,天津市化学试剂一厂,分析纯,批号:070925;

水合氯醛,北京市朝阳区八里庄化工制药厂,化学纯,批号:990802。

1.3 白芷对照药材

白芷中国药品生物制品检定所批号:120945200406。

1.4 供试品 复方羊角片

1.5 阴性样品 自制

2 环境条件

温度:20℃,相对湿度:45%。

3 专属性试验

3.1 白芷对照药材显微特征 粉末黄白色。淀粉粒极多,为粉末的主体。单粒圆球形(较大者)、椭圆形或圆多角形,直径3~20μm,脐点十字状、裂缝状、点状、三叉状或星状,大粒层纹隐约可见;复粒较多,由2~12分粒组成,少数可至20粒以上(见图1)。草酸钙簇晶呈类圆形或圆簇状,半透明,直径6~18μm。网纹、梯纹及螺纹导管,直径18~75μm。木栓细胞呈类多角形,壁薄,木化。油管多已破碎,黄色。油管碎片旁的细胞中淀粉粒溶化后留有网格样痕迹。

3.2 阴性试验

操作方法[1]:根据该标准的制法制作阴性样品,取阴性样品2片,除去包衣,研细,称取细粉0.1 g,加水10 ml使溶解,离心,弃去上清液,沉淀加水2 ml使溶解,摇匀,吸取混悬液1滴于载玻片上,,加甘油醋酸试液1滴,置显微镜100倍下,在盖玻片上按下图位置选取9个检查点检视。

检验结果:9个检查点视野中均未检出任何植物组织(见图2)。

3.3 供试品试验 操作方法[2]:取本品2片,除去包衣,研细,称取细粉0.1 g,加水10 ml使溶解,离心,弃去上清液,沉淀加水2 ml使溶解,摇匀,吸取混悬液1滴于载玻片上,加甘油醋酸试液1滴(片1)(见图3);另吸取混悬液1滴于载玻片上,加水合氯醛试液1滴,加热透化(片2)(见图4)。2张片分别置显微镜100倍下,在盖玻片上按阴性试验操作方法中的示意图选取9个检查点检视。

图1 白芷对照药材显微特征

图2 阴性样品显微特征

图3 甘油醋酸试液装片可见淀粉粒

图4 水合氯醛试液装片可见油管碎片

检验结果:片1在4个检查点视野中检出了淀粉粒,片2在3个检查点视野中检出了草酸钙簇晶、导管等植物组织。

4 重复性试验

操作方法:取本品溶化性检查的溶液静置数分钟,待混悬物沉降后,倾去上清液,剩余约30 ml溶液,离心,弃去上清液,沉淀加水2 ml使溶解, 混匀。吸取混悬液1滴于载玻片上,加甘油醋酸试液1滴,同法制作6张显微片(片1~6);另吸取混悬液1滴于载玻片上,加水合氯醛试液1滴,加热透化,同法制作6张显微片(片7~12),分别置显微镜100倍下,在盖玻片上按阴性试验操作方法中的示意图选取9个检查点检视。

检验结果:

片1 2个检查点检出植物组织(淀粉粒)

片2 3个检查点检出植物组织(淀粉粒)

片3 3个检查点检出植物组织(淀粉粒、草酸钙簇晶)

片4 2个检查点检出植物组织(淀粉粒)

片5 3个检查点检出植物组织(淀粉粒、草酸钙簇晶)

片6 3个检查点检出植物组织(淀粉粒、草酸钙簇晶)

片7 3个检查点检出植物组织(淀粉粒、草酸钙簇晶)

片8 2个检查点检出植物组织(木栓细胞、油管)

片9 2个检查点检出植物组织(导管、油管)

片10 3个检查点检出植物组织(导管、油管、草酸钙簇晶)

片11 2个检查点检出植物组织(木栓细胞、油管)

片12 3个检查点检出植物组织(草酸钙簇晶、油管)

表1

表2

5 讨论

目前复方羊角片的检验方法简单,不能够全面控制制剂的内在质量,针对这一点,本实验为该制剂制定了补充检验方法,鉴别异性有机物白芷成分,这项补充检验方法重现性好,阴性对照无干扰,具有专属性,可有效的该控制的质量。

参 考 文 献

[1]国家药典委员会.中华人民共和国药典(一部).化学工业出版社,2005.

[2] 徐国钧.中药材粉末显微鉴定.人民卫生出版社,1986.