“发汗”对续断质量的影响

摘 要：目的：研究续断产地加工“发汗”对其质量的影响。方法：通过对续断“发汗”前后水溶性浸出物、醇溶性浸出物、总皂苷和川续断皂苷Ⅵ含量变化的比较进行研究。结果：续断“发汗”后浸出物和醇溶性浸出物和总皂苷均有不同程度降低，但“发汗”后川续断皂苷Ⅵ的含量升高了。结论：本研究表明续断产地加工“发汗”有一定的合理性，建议续断的产地加工坚持发汗处理。

关键词：续断；发汗；质量影响

中图分类号：R943.1文献标识码：A文章编号：1673-7717(2011)12-2636-03

Effects of primary processing on quality of Dipsacus asperoides

JIN Qi1，2,LAI Pingfan1,DU Weifeng3,WU Fang1,XU Shanshan1

(1.Zhejiang Chinese Traditional Medical University, Hangzhou 310053,Zhejiang,China；

2.Gannan Medical University, Ganzhou 341000,Jiangxi,China；3.Zhejiang Chinese Medical

University, Rearch Center of TCM Processing Technology,Hangzhou 311401,Zhejiang,China)

Abstract:Objective:To study the effects of primary processing on quality of Dipsacus asperoides.Methods:It was studied through comparing the content variation of akebia saponin D, total saponins,water and alcohol extracts.Results:The content variation of akebia saponin D,total saponins,water and alcohol extracts were decreased after primary processing,but the quantity of akebia saponin D was incressed.Conclution:This research shows that habitat processing method of Dipsacus asperoides is reasonable in some degree,so it is advised to insist the habitat processing of Dipsacus asperoides.

Key words:Dipsacus asperoides;primary processing;effects of quality

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收稿日期：2011-08-19

基金项目：国家科技重大专项课题资助项目（2009ZX09308-004）

作者简介：金奇（1984-），男，湖南邵阳人，硕士研究生，研究方向：生药品种鉴定与品质评价研究。

通讯作者：来平凡（1961-），男，浙江杭州人，教授，博士研究生导师，研究方向：生药品种鉴定与品质评价研究。续断为川续断科植物川续断Dipsacus asper Wall ex Henry干燥根。味苦、辛，微温，归肝、肾经，具有补肝肾，行血脉，续折伤的功效，临床上多用于腰膝酸软、风湿痹痛、崩漏、胎漏、跌打损伤等症\[1\]，产于四川、贵州、湖北、重庆和湖南等地。续断传统的产地加工中，“发汗”处理是必不可少的一个环节。本研究对不同的产地“发汗”前后对续断质量的影响进行了较为系统、全面的研究，以说明产地传统初加工的必要性。

1 续断药材质量评价指标的建立

随着研究的不断深入，已明确续断中总皂苷有明显地促进成骨细胞分化和形成\[2-6\]而有抗骨质疏松\[7,8\]、治疗骨折的作用\[9-12\]和治疗阿尔茨海默症的作用\[13-15\]，而川续断皂苷Ⅵ是续断中治疗AD和白血病的活性物质\[16,17\]。通过对《中华人民共和国药典》2010版(一部)及续断相关文献的比较分析，本研究选择总皂苷与川续断皂苷Ⅵ的含量及醇溶性、水溶性浸出物作为评价指标对其进行研究。

1.1 仪器、试药和药材

Agilent1200高效液相色谱仪(美国安捷伦公司），UV-2450紫外-可见分光光度仪（日本岛津），KQ-500DB型数控超声波清洁器（昆山市超声仪器有限公司），AL204电子天平(瑞士梅特勒-托利多公司)。DFT-50手提式高速万能粉碎机(温岭市林大机械有限公司)，DKS-12型不锈钢新型电热恒温水浴锅（宁波江南仪器厂）。化学对照品川续断皂苷Ⅵ(中国药品生物制品检定所，供含量测定用，批号：111685-200401)。乙腈为色谱纯；水为纯化水,其他试剂均为分析纯。药材均购于浙江中医大学中药饮片厂，经浙江中医药大学来平凡教授鉴定为中国药典规定的川续断Dipsacus asper Wall ex Henry的干燥根。

1.2 水溶性浸出物和醇溶性浸出物含量比较

依照《中华人民共和国药典》2005年版一部“续断”项下“浸出物”项规定的方法及附录XA浸出物测定法测定续断的水溶性浸出物和醇溶性浸出物（乙醇浓度95%）\[1\]。

热浸法 取供试品约2g精密称定，置100mL的锥形瓶中，精密加水50mL，密塞，称定重量，静置1h后，连接回流冷凝管，加热至沸腾，并保持微沸1h。放冷后，取下锥形瓶，密塞，再称定重量，用水补足减失的重量，摇匀，用干燥滤器滤过，精密量取滤液2mL，置已干燥至恒重的蒸发皿中，在水浴上蒸干后，于105℃干燥3h，置干燥器中冷却30min，迅速精密称定重量。除另有规定外，以干燥品计算供试品中水溶性浸出物的含量(%)。醇浸出物仍照上述，只需将水换成95%的乙醇。测定结果如表1～2。

由表1和表2可以看出续断“发汗”后水溶性浸出物和醇溶性浸出物含量都降低了。

1.3 紫外分光光度法测定“发汗”前后总皂苷的含量\[5\]

1.3.1 对照品溶液的配制

取齐墩果酸对照品40.0mg，精密称定，置10mL的容量瓶中，加入甲醇至刻度，摇匀，制成4mg·mL-1的齐墩果酸溶液。再精密吸取1mL，至10mL容量瓶中，加入甲醇至刻度，摇匀，即得0.40mg·mL-1的齐墩果酸对照品溶液。

1.3.2 显色方法及测定波长的选择

精密吸取齐墩果酸对照品溶液0.2mL至具塞试管中，水浴挥干溶剂，以空白试剂为对照，加入新配制的5%香草醛-冰醋酸0.2mL，高氯酸0.8mL，密塞摇匀，于60℃水浴中加热20min，立即取出，冰水浴冷却后加入冰醋酸5mL，摇匀。于200～800nm波长范围内进行扫描，选取最大吸收波长548nm为测定波长。

1.3.3 标准曲线的制备 分别精密吸取上述对照品溶液0.0、0.1、0.2、0.3、0.5、0.7mL至具塞试管中，0.5mL甲醇溶液做空白对照，参照“1.3.2”项下自“水浴挥干溶剂”起依法操作，在548nm处测定吸光度，以吸光度（Y）为纵坐标，对照品浓度（mg·mL-1）（X）为横坐标，绘制标准曲线如图2-1，并计算回归方程得：Y=40.872X+0.0392，r=0.9991。

图1 紫外分光光度法测定续断总皂苷标准曲线1.3.4 样品溶液的制备 取续断样品粉末（过3号筛）约1.0g，精密称定，加入20倍量50%乙醇，超声提取2次，30min每次，滤过，滤液置50mL容量瓶中，加入50%乙醇至刻度，摇匀，再取1mL，至10mL容量瓶中，加入50%乙醇至刻度，摇匀，即得。

1.3.5 样品中总皂苷的含量测定 精密吸取各样品溶液0.5mL于具塞口试管中，参照“1.3.2”项下自“水浴挥干溶剂”起依法操作，50%乙醇溶液做空白，在548nm处测定样品液的吸光度值，计算不同产地续断样品中总皂苷的含量。总皂苷含量结果见表3。

由上表可以看出“发汗”后续断药材总皂苷的含量都降低了。

1.4 “发汗”前后川续断皂苷Ⅵ含量比较

1.4.1 测定方法 依照《中华人民共和国药典》2010年版一部“续断”项下“含量测定”项规定的方法(高效液相法)测定川续断皂苷Ⅵ含量\[1\]。用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；流动相为甲醇∶ 水(30∶ 70)；检测波长为212nm。理论板数按川续断皂苷Ⅵ峰计算不低于3000。

1.4.2 结果 发汗与不发汗对续断皂苷Ⅵ含量的影响比较结果见表4。

表4 不同产地续断发汗前后续断皂苷Ⅵ含量的比较

由表4可以得知续断“发汗”后续断皂苷Ⅵ含量均有所升高。

2 分析与讨论

续断“发汗”后水溶性浸出物、水溶性浸出物和总皂苷都降低了，但“发汗”能使续断皂苷Ⅵ含量也有所升高。上述结果的原因可能是续断在以麻袋覆盖堆置“发汗”的过程中酶解了相关物质所致。本研究结果表明“发汗”这一传统的产地加工方法具有一定的科学性，建议产地加工“发汗”工艺应该得到坚持，但“发汗”机理还待进一步研究。受市场经济的影响,药农的加工趋于简单化,要么不发汗直接晒干或烘干,要么“发汗”的时间、温度达不到要求,导致商品续断品质下降,这种状况亟待改变。

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