甜茶素的研究进展

时间:2022-06-22 07:14:09

甜茶素的研究进展

摘 要:甜茶是近年发现的新茶种,甜茶素为其主要活性和甜味成分。现对甜茶素的提取分离、含量测定、药理性质和应用等方面的研究进展作一综述,为甜茶素的开发应用提供参考。

关键词:甜茶;甜茶素;研究进展

中图分类号: TS272.5+ 5文献标识码: A 文章编1672-979X(2008)05-0073-03

Progress on Rubusoside in Rubus suavissimus S. Lee

MA Jian-chun , HE Wei *,WU Zhen-feng

(Guangdong Pharmaceutical University, Guangzhou 510006, China)

Abstract:Sweet tea (Rubus suavissimus S. Lee) is a new species found recently, and rubusoside is a major active component and sweet component in Rubus suavissimus S.Lee. The latest research advances on rubusoside from sweet tea were reviewed in this paper, including extraction and separation, assaying, pharmacological action and application, which provide references for the development and application of rubusoside.

Key words:sweet tea; rubusoside; progress

甜茶(Rubus Suavissmus S. Lee)系蔷薇科悬钩子属植物,又名甘叶悬钩子,为多年生有刺灌木,广西民间常作茶饮用,叶味甜,故名甜茶[1]。主产于广西桂林、柳州、梧州等地区,是广西特有植物[2-3]。

甜茶性凉、味甘平,具有清热、润肺利咽、祛痰止咳等功效[4]。含甜茶素、黄酮、茶多酚、蛋白质、氨基酸、维生素及铁、锌、钙等矿物质,其主要成分是甜茶素。甜茶素有降血压、降血糖、促进新陈代谢、治疗胃酸过多等作用[5]。

甜茶素还是一种高甜度低热值的非糖甜味剂,甜度是蔗糖的300倍,热值仅为蔗糖的1 % [6],可作为糖精和蔗糖的替代品,用于食品、医药等行业。

1甜茶素的理化性质

甜茶素(rubusoside)是由斯替维醇和葡萄糖结合而成的四环二萜苷,分子式为C32H50O13[7-9],化学结构与甜叶菊苷(stevioside,斯替维苷)相似,由相同苷元组成,其区别是在C13位上少接1分子葡萄糖[10]。甜茶素为白色柱状结晶, mp 176~179 ℃,-33°,(c2,95%乙醇)[11]。杜晋伟等[12]研究了甜茶素的化学组成,发现甜茶素 -36.4°,(c0.55,MeOH),无紫外吸收。刘铸晋等[13]的实验表明,甜茶素易溶于水、甲醇、乙醇等极性溶剂,酶、酸、碱水解后得到不同苷元。

2甜茶叶中甜茶素的含量变化

采收季节、产地等因素影响甜茶叶中甜茶素的含量,其中采收季节对甜茶素含量的影响较大。张健等[14]研究发现,甜茶素含量在6月份的成熟叶中最高,6至9月随着月份增加呈下降趋势。吴祖祥等[7]研究发现,嫩叶、成熟叶和老叶中甜茶素的含量不同,嫩叶含量最高,成熟叶次之,老叶最低。但因嫩叶片小、产量低,故多用成熟叶;经测定,野生甜茶叶中甜茶素含量高于栽培品种。产地对甜茶素含量也有较大影响,桂南的岑溪(北纬22° 47′)和贵中的金秀(北纬22° 08′)所产甜茶叶甜茶素含量相似,桂林雁山(北纬22°08′)所产甜茶叶甜茶素含量稍低[15]。

3甜茶素的提取分离

甜茶素提取常用水作为溶剂,分离纯化主要用树脂吸附法。王立波等[16]等报道提取分离过程为:甜茶干叶―热水浸提(叶、水比例为l:10) ―絮凝沉淀(硫酸亚铁和石灰或碱式氯化铝等)―过滤―树脂吸附―溶剂洗脱―浓缩―干燥―甜茶素。水用量,沉淀剂种类和用量是影响甜茶素提取分离的主要因素。陈全斌等[17]将甜茶干叶碾碎后置入圆底烧瓶,加10倍量水,煮沸60 min,冷却、滤过,第2、3次煮沸30 min,合并滤液后提取甜茶苷。何伟平[18]用10倍干叶重的热水直接提取甜茶素,提取率达95%以上。

甜茶素分离纯化的吸附树脂主要是Amberlife XAD-2、Diaion Hp-20、国产AB-8、R-A和ADS-7等,树脂类型、洗脱剂及用量影响分离效果。吴应熊等[19]用国产大孔吸附树脂,在pH 4~8的条件下提取甜茶素,平均得率为4.9 %。何伟平[18]在工业化生产试验中,用热水浸烫甜茶,沉淀剂絮凝沉淀后滤过,提取液依次经吸附分离柱A、B和C,流出液浓缩干燥,得甜茶素。此法不需多次树脂洗脱与浓缩,不用多种溶剂,所得甜茶素含量≥70 %,回收率>80 %。

4甜茶素含量测定

测定甜茶素含量常用高效液相色谱法和比色法。张健等[14]用高效液相色谱法测定甜茶中的甜茶素,测定条件:Cl8柱;甲醇-三氟乙酸溶液(体积比为75:25)为流动相;流速1.0 mL/min;检测波长208 nm;柱温30 ℃;外标法定量。研究表明,6月份的成熟叶中甜茶素含量占叶片干重的5.21 %。卢昕等[20]用反相高效液相色谱法测定广西甜茶原叶甜茶素含量,测定条件:反相Cl8柱;甲醇-水(体积比为85:15)溶液为流动相,流速1.0 mL/min;紫外检测波长210 nm;柱温20 ℃;外标法定量,测得甜茶原叶甜茶素含量为5.29 %,且甜茶素含量是甜茶苷-A含量的1 000倍。吴祖祥等[7] 用比色法测定甜茶素含量,先将甜茶提取液酸化为异苷元(isosteriol),再与2, 4-二硝基苯肼作用生成腙,经薄层色谱分离后洗脱色带,在波长362 nm 处测定吸收值,测得甜茶中甜茶素含量为4 %~6 %。

5甜茶素的药理作用

5.1降血糖

田翠平等[21]经腹腔注射STZ制备糖尿病大鼠模型,灌胃3周后测血糖、果糖胺、胰岛素和SOD等指标。结果表明,甜茶素提取物能显著增强其抗氧化能力,降低佐菌素(STZ)致高血糖大鼠血糖的有效剂量为300 mg/(kg・d),同时能刺激胰岛素分泌。邓绍林[22]的研究表明,甜茶素可降低糖尿病家兔血糖水平,与模型组相比,高、中剂量均有不同程度的降糖作用。

甜茶素对小鼠血糖代谢的影响与控制糖异生途径有关。田翠平等[23] 的研究表明,甜茶素能降低正常小鼠血糖水平,降糖率为l8.47 %;对小鼠糖异生有明显的抑制作用,抑制率为17.32 %。

5.2降血脂

甜茶素能明显降低血清甘油三酯水平,降低幅度为30.08 %;并能降低胆固醇含量。孙斌等[24]饲喂成年雄性SD大鼠高脂饲料以250,500,1 000 mg/(kg・d)3种剂量的甜茶素给予大鼠4周。结果表明,250 mg/(kg・d)剂量组大鼠血清总胆固醇(TC)和甘油三酯(TG)显著低于高脂组,血清高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)和HDL-C/TC显著高于高脂组;中、高剂量组则无降血脂作用。邓绍林[22]的研究表明,甜茶素可明显降低高血脂家兔血清蛋白质水平和高脂血症动物血清TC、TG、β-脂蛋白水平,与模型组比较有显著差异( P<0.05, P<0.01),而且小剂量即可起作用。

5.3其他药理作用

甜茶素可明显降低动物肾性高血压,与模型组相比有显著差异(P<0.05)[22]。甜茶素还有促进唾液分泌的作用。田翠平等[23]让小鼠自由饮水、进食,每天记录小鼠的饮水量和进食量。结果表明,甜茶素不影响正常小鼠的体重变化和摄食量,给药组饮水量明显少于对照组。近年研究显示,甜茶素还有抑菌作用。楚金普[25]考察甜茶素、木糖醇、蔗糖和葡萄糖对变形链球菌的作用,结果表明,甜茶素组和其他各组相比能明显抑制变形链球菌生长、产酸和对玻棒的黏附,未发现致龋作用。

5.4毒性

廖曼云等[26]用大鼠进行毒性实验,以甜茶素LD50剂量2 413 mg/kg的1/10给大鼠灌胃60 d,病理检查结果表明,大白鼠心、肝、肺、脾、肾、脑等主要器官无实质性损害和形态学变化;血化验结果表明,大鼠血液红细胞、白细胞数量及分类无异常改变,波动在正常范围,提示对血液系统无不良影响[27];生殖能力实验表明,甜茶素不影响大鼠生育,受孕率、活产率与对照组无差异,无致畸作用,仔鼠生长发育正常,成活率高,无明显毒性作用。

6甜茶素的应用

从甜茶中提取的甜茶素在甜味植物中口感最佳,纯正程度接近白糖,1 kg干甜茶叶甜度相当于15 kg蔗糖甜度[28]。由于甜茶素热值低,不会增加胆固醇,不致龋齿,心血管、肥胖、糖尿病等患者均可饮用。甜茶素已广泛用于糕点、饮料、罐头、医药、烟草、牙膏、啤酒、酱制品等方面。如用甜茶素代替蔗糖生产鲜桔汁,每吨饮料可降低成本28.5元;用甜茶素生产桔子罐头,口感甚佳。林继元等[29]用嗜热链球菌和保加利亚乳杆菌作菌种,用甜茶素代替蔗糖制作发酵酸奶,对接种量、甜茶提取物用量和发酵温度等进行了试验,选出了甜茶酸奶生产的最佳工艺,既缩短了生产周期,降低了成本,又保留了传统酸奶丰富的营养成分。

广西桂林实力天然食品有限公司甜茶素生产已形成年产l0吨的能力,甜茶素销售年利税达177万元[19]。

7小结

甜茶具有“茶、糖、药”3种功效,已获得美国FDA认证,是发达国家正在大力开发的一种糖类替代品和保健品。甜茶易种植,对环境条件要求较低。目前,我国已开始大规模种植甜茶,广西瑶乡年产甜茶1 000多吨,产品已出口到美、日等国。

甜茶素不仅应用于食品业,而且可开发成药用辅料,用于降糖、降脂等药物,发挥协同作用。目前国内外对甜茶素的提取分离方法研究较多,但分离的多是淡黄色的甜茶素粗品,甜茶素含量一般为50 %~80 %,有味甜但有苦味。关于制备甜茶素单体的文献报道较少,对甜茶素降血糖的作用机制已有了初步研究,但其降脂、降压的作用机制尚未明确。加强对甜茶素单体制备工艺和药理作用的深入研究, 将为甜茶素广泛应用提供理论和实验依据。

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