胃癌螺旋CT征象与COX-2、uPA表达间关系的研究

[摘要] 目的：探讨胃癌螺旋CT征象与胃癌组织中COX-2及uPA表达之间的关系。方法：对46例经手术病理证实且行螺旋CT平扫、增强的胃癌患者,观察每个病灶的浆膜侵犯和淋巴结转移情况。应用免疫组化S-P法检测胃癌组织中COX-2及uPA表达情况,并分析其与螺旋CT征象之间的关系。结果：胃癌螺旋CT征象上肿瘤的浆膜侵犯、淋巴结转移与COX-2及uPA蛋白表达有关(P

[关键词] 胃癌；体层摄影术；X线计算机； COX-2； uPA；

[中图分类号]R445 [文献标识码]B [文章编号]1673-7210（2008）05（a）-080-02

胃癌是最常见的肿瘤之一。多数患者早期症状不明显，确诊时多为中晚期。胃癌发生浸润和转移是影响其疗效和预后的主要因素。螺旋CT扫描可准确反应胃癌浸润、转移等病理特征。近年来的研究表明诱导型环氧合酶(inducible cyclooxygenase, COX-2)及尿激酶型纤溶酶原激活因子（urokinase-type plasminogen activator, uPA）均与胃癌的浸润、转移密切相关。本研究将胃癌螺旋CT征象与组织中COX-2、uPA表达相对照，探讨胃癌螺旋CT表现与分子生物学之间的关系。

1资料与方法

1.1一般资料

收集2006 年3 月～2007 年8 月新乡医学院第一、三附属医院行胃癌手术患者46 例，其中，男31 例,女15 例,年龄42～78岁,平均60 岁。全部患者均于检查后1周内手术治疗。术后标本常规石蜡包埋及5 μm切片,以备常规HE染色及免疫组织化学实验用。

1.2检查方法

患者术前均采用GE Hispeed Advantage 双排螺旋CT机行螺旋CT三期增强扫描。患者空腹，检查前10min肌肉注射盐酸东莨菪碱20 mg，即刻口服温水800～1 200 ml,常规取仰卧位,先行平扫，扫描参数为120 kV,240 mAs,准直10 mm,螺距为1。然后经肘静脉以2.5～3 ml/s的速度注射欧乃派克(300 mgI/ml),用量按1.5 ml/kg体重计算，分别于注射开始后25 s(动脉期)、65～70 s(门脉期)、3～4 min(平衡期)进行扫描。扫描参数为120 kV,240 mAs,准直5～10 mm,螺距为1。

1.3胃癌组织中COX-2及uPA的检测

所有标本取材后常规石蜡包埋，4 μm连续切片,以S-P法分别行COX-2及uPA免疫组化染色。鼠抗人uPA单克隆抗体，鼠抗人COX-2单克隆抗体，SP试剂盒，DAB显色试剂均购自武汉博士德生物工程有限公司。染色步骤严格按说明书进行，用已知的阳性片作阳性对照，以PBS代替一抗作阴性对照。COX-2阳性判断标准：胞浆着色呈棕黄色颗粒为阳性细胞,强表达时核也可着色，高倍镜下随机取10个视野，COX-2平均阳性细胞数≥10%为阳性，平均阳性细胞数＜10%为阴性。uPA阳性判断标准：胞浆或胞膜着色呈棕黄色颗粒为阳性细胞，高倍镜下随机取10个视野，uPA平均阳性细胞数≥10%为阳性，平均阳性细胞数＜10%为阴性。

1.4统计学分析

计数资料用χ2检验,相关分析采用Spearman等级相关分析法,所有数据应用SPSS 10.0统计软件包进行统计分析，以 P

2结果

46例胃癌标本中,发现COX-2阳性的28例中，26例uPA阳性；COX-2阴性的18例中，仅有7例uPA阳性，COX-2与uPA表达密切相关，相关系数rs=0.635，P

胃癌螺旋CT征象与COX-2及uPA表达间的关系见表2。本组结果显示, COX-2的阳性表达与螺旋CT征象上浆膜侵犯和淋巴结转移呈正相关(P

3 讨论

胃癌的发生发展及浸润转移涉及多种促癌基因的激活和抑癌基因的失活。COX是花生四烯酸代谢的关键限速酶,目前已发现至少有两种亚型:COX-1和COX-2。COX-1属结构型酶,其催化产物参与维持机体正常的生理活动；COX-2属诱导型酶,在大多数正常组织中不表达,在细胞因子、生长因子、癌基因刺激下表达上调。COX-2不仅通过促进细胞增殖、抑制细胞凋亡等途径直接参与胃癌的发生发展,而且COX-2的高表达能上调肿瘤细胞血管生成因子的表达, 通过促进肿瘤血管生成，降解细胞外基质等途径来促进肿瘤的浸润和转移。

uPA属于丝氨酸蛋白酶类，能有效地降解细胞外基质，与恶性肿瘤发生和发展密切相关。uPA与特异性受体(uPAR)结合，启动了蛋白溶解过程，有利于MMP的激活，加强胶原、弹性蛋白等其他基质蛋白的降解[1]。uPA在乳腺癌、卵巢癌及肺癌中表达明显高于正常组织，uPA表达的增高在肿瘤的浸润转移中扮演了重要角色[2~4]。 Choong等[5]还观察到，uPA的表达水平与肿瘤病理学分级，局部复发和转移有关。McCawley 等[6]通过动物实验证明uPA促进了肿瘤的局部侵袭和远处转移。

本组螺旋CT资料显示,有浆膜侵犯及淋巴结转移者COX-2及uPA表达率与无浆膜侵犯及淋巴结转移者相比,差异有统计学意义,说明COX-2及uPA表达水平可协助螺旋CT诊断浆膜侵犯及淋巴结转移。当螺旋CT不能鉴别肿瘤是否有浆膜侵犯或淋巴结转移时，COX-2或COX-2阳性表达则高度提示浆膜侵犯或淋巴结转移，反之则提示非浆膜侵犯或淋巴结转移,有助于提高诊断准确性。

总之，螺旋CT扫描能较全面显示胃癌影像学特征，并能较确切反映其病理基础，是胃癌可靠的检查方法。螺旋CT扫描与分子生物学相结合可提高对胃癌的发生、侵袭、转移评估的准确性。

[参考文献]

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[2] Pappot H, Pedersen AN, Brunner N, et al. The complex between urokinase (uPA) anditstype-1inhibitor (PAI-1)inpulmonaryadenocarcinoma:relation toprognosis[J]. Lung Cancer, 2006, 51(2): 193-200.

[3]Schmitt M, Sturmheit AS, Welk A, et al. Procedures for the quantitative protein determination of urokinase and its inhibitor, PAI-1, in human breast cancer tissue extracts by ELISA[J].Methods Mol Med,2006, 120:245-265.

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[5] Choong PF, Ferno M, Akerman M, et al. Urokinase-plasminogen-activator levels and prognosis in 69 soft-tissue sarcomas[J].Int J Cancer. 1996, 69(4): 268-272.

[6]McCawleyLJ,MatrisianLM.Matrixmetalloproteinases: multifunctional contributors to tumor progression [J]. Mol Med Today, 2000, 6(4): 149-156.

（收稿日期：2008-01-15）

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