AngⅡ、TNF―α在肾妊娠合并肾衰竭患者的变化

【摘 要】目的：探讨AngⅡ、TNF-α在肾妊娠合并急性肾衰竭患者合并心血管并发症体内的变化及药物干预作用；方法：（1）研究项目的目的意义及主要研究技术内容的国内外发展现状与趋势；（2）正常对照组；妊娠合并肾衰竭透析病人组；透析病人伴有心血管系统并发症组各18人；（3）透析病人为透前采血，正常对照组为清晨采血，采用健康组与妊娠合并急性肾衰竭对比，每周透析4次进行血清TNF-a、AngⅡ表达研究。结果：为妊娠合并急性肾衰竭患者合并心血管并发症患者的药物治疗提供实验数据及理论依据。结论： AngⅡ、TNF-α在肾妊娠合并肾衰竭患者的变化研究完成后将会有广泛的推广应用价值。

【关键词】妊娠合并肾衰竭；TNF-a AngⅡ

血管紧张素Ⅱ主要在内皮细胞及肺巨噬细胞产生，脂肪组织也可以产生，而外周血单个核白细胞表达和产生血管紧张素Ⅱ的相关文献较少。Joachim jankowski等取正常人外周血单个核白细胞，用10mg/lLPS刺激2小时后用色谱法和质谱法鉴定了上清液中血管紧张素Ⅱ存在，同时用放免法检测，两者具有良好的相关性，他们得到的数据是活化后每106个白细胞每分钟可以在上清液中产生9.9±6.6fmol血管紧张素Ⅱ。同时，他们也证明了，外周血单个核细胞中有所有的血管紧张素Ⅱ前体物质，并且具有生物学功能。Christof ulrich通过临床研究也表明，透析肾功能正常组、透析妊娠合并肾衰竭组、透析肾衰伴有心血管并发症组病人单核细胞ACE表达逐渐增加。Zhao等通过转染血管内皮生长因子（vascular endothe―lial growth factor，VEGF）可溶性受体1基因来阻滞VEGF的作用，观察到血管壁炎症反应及重塑减轻，又将AngⅡ注入野生型大鼠体内，利用免疫组化和组织病理的方法检测到局部VEGF表达增多，从而证明了Ang II介导的VEGF产生在动脉粥样硬化的发生发展中发挥了重要作用。

1 主要研究内容

1.1样本量计算 根据文献12查到的数据，由完全随机设计两整体均数假设检验的样本量估算公式：n=2×（S/D）2×（μα+μβ） 2计算得每组需最少病例数18人。

1.2病例选择 选取正常对照组、妊娠合并肾衰竭组、透析病人伴有心血管系统并发症组各18人，各组间年龄、性别、ACEI和ARB类药应用情况相匹配。透析病人组选择BMI（body mass index）、LBM（lean body mass）偏小，血白蛋白偏低，CRP偏高的病人。有急性感染的病人排除。

2 研究方法

2.1分组：正常对照组；妊娠合并肾衰竭透析病人组；透析病人伴有心血管系统并发症组各18人；

2.2采血：透析病人为透前采血，正常对照组为清晨采血。每人约10～20ml。分离后可得单核细胞数约3.5×104～7.0×104；

2.3单核细胞分离：采用梯度离心法；

2.4分离出的单核细胞种于24孔培养板上。设干预组与非干预组，各组间保证活细胞浓度与干预的LPS浓度相同。10ng/ml LPS干预单个核细胞10～12小时；

2.5干预后取培养的上清液用放免法检测AngⅡ、TNF-α浓度。购买TNF-α放免检测试剂盒。AngⅡ在医院检测；干预后的细胞用流式细胞术检测ACE表达。

3 可行性分析

3.1本课题需要的临床观察病例均可从长春市妇产科医院、长春市中心医院肾病科和透析室中选取。本单位妇产科实验室、模拟医院实验室和长春市中心医院检验科能够承担本研究的所有检验项目；

3.2实验所需药品及试剂盒均可购买到；

3.3本课题组具有相关工作基础，既本单位妇产科、模拟医院实验室、长春市妇产科医院、吉林大学二院和长春市中心医院肾病内科和透析室的教授、副教授，又有从事基础研究的博士、硕士队伍组成部分，并且均有临床、基础的科研研究经历，研究经验丰富。

4 讨论

妊娠合并肾衰竭透析病人处于一种慢性炎症状态，炎症加重了营养不良，而两者又是促心血管并发症的因素。血管紧张素Ⅱ在炎症和动脉硬化中的作用已得到确认，因此血管紧张素Ⅱ也可能在肾衰透析病人的炎症，及炎症-营养不良-动脉硬化中起到重要作用。LPS可以使正常人外周血单个核白细胞血管紧张素Ⅱ表达增加，透析病人易接触到细菌内毒素，同时单个核白细胞又处于预激活状态，所以，LPS激活透析病人外周血单个核细胞后也会有ACE、血管紧张素Ⅱ表达增加，并且伴有心血管并发症的病人可能会表达更多。

妊娠合并急性肾衰竭患者合并心血管并发症的比较多见，在血液透析患者中尤其发病率高。其机制尚不完全清楚，本研究主要探讨AngⅡ、TNF-α在肾妊娠合并急性肾衰竭患者合并心血管并发症体内的变化及药物干预作用，为妊娠合并急性肾衰竭患者合并心血管并发症患者的药物治疗提供实验数据及理论依据，同时可为广大患者减少经济负担。因此本项研究完成后将会有广泛的推广应用价值。

参考文献：

[1] 王宏丽.杨鑫。规律血液透析患者血清单个核白细胞TNF表达，《中国伤残医学》 2012，12：76-78

[2] 孙惠力，甘华。单核细胞对血液透析患者免疫功能影响的分子机制。中华实用医学，2003，05（10）：76-78