时间：2023-03-12 14:36:40
方法：将我院此次收治的101例老年桡骨骨折患者按照数字随机表法分组为试验组（56例）和对照组（55例）；对照组：给患者口服碳酸钙片；试验组：在对照组治疗的基础上，对患者静脉滴注注射用维生素D2。
结果：对这些患者进行为期3～6个月的随访，平均随访时间为（4.0±1.0）个月；试验组患者的平均愈合时间和治疗有效率明显高于对照组，差异显著，具有统计学意义（P
结论：在临床上，对老年桡骨骨折患者采用注射用维生素D2，能够有效地促进患者的骨折愈合，提高治疗效果，促进患者的康复。
关键词：注射用维生素D2 老年桡骨骨折 碳酸钙片
Doi：10.3969/j.issn.1671-8801.2013.08.271
【中图分类号】R4 【文献标识码】B 【文章编号】1671-8801（2013）08-0243-02
临床骨科中桡骨远端骨折是指距离桡骨远端骨关节面
1 资料与方法
1.1 临床资料。此次研究和治疗的101例老年桡骨骨折患者，都为我院2010年1月～2013年2月期间收治。对患者进行诊断，符合原发性骨质疏松症的诊断标准[2]。其中A2型骨折患者51例、A3型骨折患者50例；都为闭合性骨折。男性为25例，女性为76例；年龄在48～80岁之间，平均为（65.0±2.0）岁；按照数字随机表法将这些患者分组为试验组（56例）和对照组（55例）；比较两组患者的性别和年龄等资料，差异没有统计学意义（P>0.05），具有一定的可比性。
1.2 方法。对两组患者进行骨折复位之后，使用石膏或者外固定支架进行固定，将患者的患肢抬高，对手指进行适当的活动，有利于肿胀的消退。
对照组：给患者口服碳酸钙片（广州白云山光华制药股份有限公司，批准文号：国药准字H44024262，25.0mg/片）治疗，2片/次，3次/d。
试验组：在对照组治疗的基础上，给患者采用注射用维生素D2（张家口市泰康制药厂，批准文号：国药准字H13022468）进行静脉滴注，1次/d。两组均7d为一个疗程，根据患者的病情，用药1～3个疗程。
1.3 疗效评价标准。治愈：经过治疗之后，患者比同类骨折的临床愈合时间要提前1/3以上。显效：经过治疗之后，患者比同类骨折的临床愈合时间要提前1/5～1/3。有效：经过治疗之后，患者比同类骨折的临床愈合时间要提前1/5。无效：患者骨折愈合时间长于同类骨折患者或者相同。骨折愈合的标准为：对局部进行按压，不会产生疼痛，进行X线片检查，骨折处有连续性的骨痂形成，骨折线比较模糊，平举1kg的时间>1min。
1.4 统计学方法。数据采用SPSS18.0软件进行统计和分析，计量资料采用均数±标准差（X±S）表示。采用X2检验，差异显著，具有统计学意义（P
2 结果
对这些患者进行为期3～6个月的随访，平均为（4.0±1.0）个月；试验组（56例）：治愈28例，占50.0%；显效10例，占17.9%；有效14例，占25.0%；无效4例，占7.1%；治疗有效率为92.9%。对照组（55例）：治愈25例，占45.5%；显效10例，占18.2%；有效11例，占20.0%；无效9例，占16.3%；治疗有效率为83.7%。
试验组患者的平均愈合时间和治疗有效率明显高于对照组，差异显著，具有统计学意义（P
3 讨论
社会进步使得人口老龄化问题日益突出，发生骨质疏松的人数也在逐渐上升[3]。在临床上，骨质疏松主要是一类骨量减少和骨强度降低以及骨脆性增加的疾病，患者的骨组织显微结构出现异常[4]。骨质疏松性骨折是一种常见的骨质疏松症，同时也是最为严重的并发症，一般好发于桡骨等处[5]。对老年人群的生活质量和身体健康造成极大的影响。
骨折愈合是一个十分复杂的骨组织生物学修复过程，受到多种骨诱导生长因子的调节，比如成纤维细胞生长因子和骨形态发生蛋白等。骨诱导生长因子能够有效地促进人体的骨髓细胞转化为骨细胞和软骨细胞，对成骨细胞的基质合成具有一定的调节作用，其在骨折愈合的过程中会相互作用，共同诱导骨细胞的形成。而骨诱导生长因子的缺乏或者其的活性不足是导致患者发生骨折延迟愈合和骨不连的主要原因。注射用维生素D2可促进小肠粘膜刷状缘对钙的吸收，同时也能促进肾小管对磷的重吸收，进而提高血钙和血鳞的浓度，促进旧骨释放磷酸钙，维持和调节血浆钙和磷的正常浓度。对患者采用注射用维生素D2能够有效地促进钙沉着于新骨形成部位，使得枸橼酸盐在骨中沉积，促进骨样组织成熟和骨钙化。此外，其还能有效地促进患者骨和软骨细胞的分化增殖，促进钙磷代谢，增加患者骨骼的骨量，加速骨细胞的增加。总之，临床上对老年桡骨骨折患者采用注射用维生素D2，能够有效地促进患者的骨折愈合，提高治疗效果，促进患者的康复。
参考文献
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[关键词] 钙佳锌口服液;维生素D2;含量测定;反相高效液相色谱法
[中图分类号] R927.2[文献标识码] B[文章编号] 1673-7210(2010)05(a)-059-03
Content determination of vitamin D2 in Gaijiaxin Oral Liquid by RP-HPLC
FAN Shide, LIAO Xiaojun, QIU Zhengxia, ZHANG Yan, LI Ping, JIANG Qiaomei
(Sichuan Sunnyhope Pharmaceutical Co., Ltd., Chengdu 611130, China)
[Abstract] Objective: To establish a method for the content determination of vitamin D2 in Gaijiaxin Oral Liquid by RP-HPLC. Methods: The Agilent-C18 (4.6 mm×150 mm, 5 μm) column was used. The mobile phases consisted of methanol and 0.02 mol/L-ammonium acetate (95∶5), the flow rate was 1.0 ml/min and the detection wavelength was at 265 nm, the column temperature at 30℃. Results: The linear ranges of vitamin D2 was at 0.010 1-0.404 0 μg (r=1.000 0), the average recovery was 99.70% with a RSD of 3.11% (n=9). Conclusion: The method is simple, accurate, low-cost and can be for determination of the contents of vitamin D2 in Gaijiaxin Oral Liquid.
[Key words] Gaijiaxin Oral Liquid; Vitamin D2; Determination; RP-HPLC
钙佳锌口服液是以葡萄糖酸钙、乳酸钙、乳酸锌、维生素D2为主要原料,加入乳酸、安赛蜜、甜橙油、苯甲酸钠辅料制成的保健食品,具有补钙的保健功能。其中的维生素D2具有促进人体对钙的吸收功能,其含量少,遇光或空气容易变质,热稳定性差。钙佳锌口服液现有质量标准中维生素D2的含量测定方法按GB/T 5413.9-1997《婴幼儿配方食品和乳粉 维生素A、D、E的测定》规定的检测方法,采用正相HPLC法测定[1],该方法具有分析成本高、供试品溶液制备过程繁琐的不利因素,并可能在配制供试品溶液过程中因温度过高导致维生素D2的损失,使其测定值较实际含量值低。此外,使用该方法所得HPLC色谱图中维生素D2的保留时间差异较大,或无法检测出维生素D2。采用《中国药典》2005年版二部中维生素D2原料的含量测定方法检测本制剂中维生素D2含量亦同样存在上述问题[2]。近年来文献报道的有关维生素D2含量测定方法[3-8],用于本品中维生素D2的测定时分离效果仍不理想,无法满足本品制剂质量控制的需要。本文对钙佳锌口服液中维生素D2的含量测定方法进行了研究,提出对本品原质量标准中维生素D2的含量测定方法(GB/T 5413.9-1997《婴幼儿配方食品和乳粉 维生素A、D、E的测定》)进行改进,使用RP-HPLC法测定本品溶液中维生素D2的含量。
1 仪器与试药
1200高效液相色谱仪和色谱工作站(美国Agilent);pHS-3C精密pH计(上海精密科学仪器有限公司)。维生素D2对照品(中国药品生物制品检定所,批号:100155-200505);钙佳锌口服液(四川升和制药有限公司,批号:090603、090604、090605、090701、090702、090703);甲醇为色谱纯;水为超纯水;其余试剂为分析纯。
2 方法与结果
2.1 色谱条件
色谱柱:Agilent-C18(4.6 mm×150 mm,5 μm)色谱柱;流动相:甲醇-0.02 mol/L乙酸铵溶液(95∶5);检测波长:265 nm;柱温:30℃;流速:1.0 ml/min;进样量:20 μl;理论板数以维生素D2峰计算应不低于1 500,维生素D2峰与其他杂质峰均能得到良好分离,分离度符合要求(R>2.0)。
2.2 溶液的制备
2.2.1对照品溶液的制备精密称取维生素D2对照品适量,置棕色量瓶中,加乙醇溶解制成20 μg/ml的溶液,并充氮气保护,作为对照品贮备液。精密量取对照品贮备液适量,置棕色量瓶中,加乙醇稀释制成1 μg/ml的溶液,并充氮气保护,作为对照品溶液。
2.2.2 供试品溶液的制备精密量取钙佳锌口服液25 ml,置分液漏斗中,加入饱和NaCl溶液25 ml,分别以50 ml乙醚萃取3次,合并乙醚层,以5 g无水硫酸钠干燥除尽乙醚层中的水,过滤,以10 ml乙醚洗涤无水硫酸钠2次,合并乙醚至棕色圆底烧瓶中,置旋转蒸发仪在30℃水浴中蒸干除尽乙醚,残渣用少量乙醇溶解,转移至5 ml棕色量瓶中,用乙醇洗涤滤器,定容,并充氮气保护,即得供试品溶液。
2.2.3 空白辅料溶液的制备取不含维生素D2的全处方其他成分的辅料制备溶液,按“2.2.2”项下方法制备空白辅料溶液,即得维生素D2的空白辅料溶液。
2.3 干扰试验
分别吸取维生素D2对照品、供试品、空白辅料溶液、溶剂乙醇各20 μl,进样。结果表明空白辅料溶液和溶剂乙醇不干扰维生素D2的含量测定,见图1。
图 1 HPLC色谱图
(A.空白辅料溶液;B.对照品;C.供试品;D.乙醇)
Fig.1 HPLC chromatography
(A.Blank excipient solution; B.Reference substance; C.Sample; D.Ethanol solution)
2.4线性范围考察
分别精密吸取维生素D2对照品贮备液适量,置棕色量瓶中,以乙醇稀释并定容制得0.505、1.01、2.02、3.03、6.06、10.10、20.20 μg/ml的系列维生素D2对照品溶液。分别精密吸取上述溶液各20 μl,进样,记录峰面积积分值。以维生素D2含量为横坐标,峰面积为纵坐标进行线性回归,回归方程:A=65.369C-0.410 3(r=1.000 0)。维生素D2在0.010 1～0.404 0 μg范围内与峰面积呈良好的线性关系。
2.5精密度试验
精密吸取20 μl的维生素D2对照品溶液(浓度:1 μg/ml),连续进样6次。峰面积的RSD=0.18%(n=6),结果表明仪器精密度良好。
2.6 稳定性试验
因本品中维生素D2对光、热、氧均不稳定,故考察样品溶液的稳定性情况。将“2.2.2”项下供试品溶液室温放置0、0.5、1.0、2.0、3.0、4.0、8.0 h后,分别进样20 μl,峰面积的RSD=0.42%(n=7),结果表明室温放置8 h内样品基本稳定。
2.7 重复性试验
取同一批样品,按“2.2.2”项下方法制备6份供试品,分别测定色谱峰面积,平均含量占标示量的百分率为100.3%,RSD=1.60%(n=6)。结果表明本法重复性良好。
2.8 回收率试验
按口服液处方量称取空白辅料,并按标示量的80%、100%及120%加入维生素D2对照品贮备液,混匀后,按“2.2.2”项下方法制备溶液,按上述色谱方法测定维生素D2含量,其平均回收率为99.7%,RSD=3.11%,测定值接近真实值,方法准确可靠,见表1。
表 1 回收率试验
Tab.1 Recovery test
2.9 样品含量测定
取6批钙佳锌口服液样品,分别按“2.2.2”项下方法制成样品溶液,分别精密吸取对照品溶液、样品溶液,各20 μl,进样,记录色谱峰面积,外标法计算维生素D2含量,见表2。
表 2 样品含量测定(%,n=6)
Tab.2 Content determination of samples (%,n=6)
3 讨论
维生素D(vitamin D)为固醇类衍生物,是一种脂溶性维生素,主要包括维生素D2和维生素D3。主要功能是调节体内钙、磷代谢,维持血钙和血磷的水平,从而维持牙齿和骨骼的正常生长就发育。儿童缺乏维生素D易发生佝偻病。因此,在婴幼儿配方食品中大多添加维生素D。近年来国内外学者对维生素D的作用进行了广泛的研究,周文娣等[9]综述了近年来维生素D受体及维生素D作用进展,表明维生素D可预防骨质疏松症、心脏病、1型糖尿病、自身免疫性疾病和一些肿瘤等。因此,维生素D在临床中的应用将更加广泛。但过多服用维生素D将引起急性中毒,长期摄入过多的维生素D(5 000 IU),将引起高血钙和高尿钙。特征为食欲减退,过度口渴、恶心、呕吐、烦躁、体弱、便泌、腹泻交替出现,严重者将因肾钙化、心脏和大动脉钙化而死亡。因此准确控制婴幼儿配方食品中维生素D的含量尤为重要,以便为临床提供可靠的用量参考。
维生素D2原料为无色针状结晶或白色结晶性粉末,无臭、无味,不溶于水,易溶于乙醇、乙醚、氯仿、丙酮,遇光或空气容易变质,热稳定性差。在各种制剂中维生素D的含量均比较低,建立制剂中维生素D含量测定方法时其提取与分离是关键技术,应充分考虑维生素D2的理化性质,防止维生素D2在提取过程中因氧气、光、热的影响而降解,尽量避免测定结果低于实际值。该方法中供试品溶液与对照品溶液的制备充分考虑了维生素D2的理化性质,采用乙醚萃取样品中的维生素D2,3次后萃取完全,而后用无水硫酸钠除去乙醚层中少量的水,置旋转蒸发仪在低于30℃水浴中快速除去乙醚。该制备方法避免了氧气、光、热的影响,并缩短了样品溶液制备过程中的受热时间,有利于样品稳定。该含量测定方法快速、简便、准确、检验成本低,明显优于本品原质量标准中维生素D2含量测定方法(GB/T 5413.9-1997《婴幼儿配方食品和乳粉 维生素A、D、E的测定》),可用于钙佳锌口服液中维生素D2的质量控制。
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关键词维生素D2 维生素D3 25-羟基维生素D2 25-羟基维生素D3
中图分类号：R151.41；R977.24 文献标识码：A 文章编号：1006-1533(2011)10-0472-03
Vitamin D supplementation and its supplements selection
ZHOU Jian-lie1*，Christopher YANG2
（1. “Vitamin D Today” Website，Shanghai，200234；
2. Department of Chemistry，University of Southern California，Los Angeles，Ca90007）
ABSTRACTLC-MS has been able to accurately distinguish and quantify serum levels of 25(OH)D2 and 25(OH)D3 over the last decade. It is found that the nutritional effects of vitamin D3 are better than those of vitamin D2. This article describes the reasons for using 25(OH)D as assessment for nutritional status of vitamin D and an evolution of quantitative determination of 25(OH)D2 and 25(OH)D3 levels，and reviews clinical research data on improvement of 25(OH)D2 and 25(OH)D3 levels in serum by supplementation of vitamin D2 and vitamin D3. Therefore，clinicians should prefer vitamin D3 supplements in order to prevent and treat vitamin D insufficiency and deficiency.
KEY WORDSvitamin D2；vitamin D3；25(OH)D2；25(OH)D3
世界各地有近10亿人维生素D不足，需要补充维生素D[1]。维生素D补充剂有两种：维生素D2和维生素D3。维生素D2（麦角钙化醇）来自植物性膳食，而维生素D3（胆钙化醇）来自动物性膳食或紫外线照射人体自身合成。随着1997年公布维生素D的参考摄入量[2]，血清25-羟基维生素（25(OH)D）水平被定义为维生素D营养状态的功能指标。近10多年来，因高效液相色谱法（HPLC法）和液相色谱-质谱法（LC-MS法）已能精确区分且定量测定维生素D2和维生素D3，故已有一些研究通过测定补充维生素D2和维生素D3后提高或维持血清25(OH)D2和25(OH)D3浓度的能力发现，维生素D3的作用优于维生素D2[3～6]。
1用25(OH)D评估维生素D营养状况的理由
近年越来越多的临床证据显示，维生素D缺乏、血清25(OH)D水平低与心脏病、高血压、糖尿病、各种癌症和自身免疫性疾病等相关[7～9]。1997年美国医学科学院膳食推荐摄入量（DRIs）制定委员会认为，以前用甲状旁腺激素（PTH）等很难肯定维生素D和健康的定量关系，且不再用抗佝偻病活性作为指标，而测量血清25(OH)D水平可以作为维生素D营养状况的客观指标[2]，理由为：1）维生素D的循环半衰期（T1/2）较短，为24 h[10]，而25(OH)D的T1/2为3周，能直接反映可利用的维生素D量；2）1,25(OH)2D的T1/2仅4 h，不能用来常规评价维生素D的营养状态[11～13]。
2定量测定25(OH)D2和25(OH)D3方法的演变
从发现维生素D到1997年美国公布维生素D参考摄入量经过了70年，量化维生素D效力的主要方法是用生物学方法笼统评估总维生素D的国际单位相当于多少摩尔当量，且至多只能做到半定量测定。首次检测25(OH)D使用的是维生素D结合蛋白法（DBP法），1985年开始采用放射免疫法（RIA法），后又改进为自动化学发光免疫分析法或酶联免疫吸附法。但DBP法和RIA法都只能评估25(OH)D的总量而笼统评估总维生素D，不能区分25(OH)D2和25(OH)D3。20世纪70年代中期起，HPLC法用于测定25(OH)D水平，能区分25(OH)D2和25(OH)D3，但因血清脂质萃取制备等步骤非常繁琐，故还不能常规临床应用[14]。近10年发展起来的LC-MS法、特别是液相色谱串联质谱法（LC-MS/MS法）可以同时检测25(OH)D2和25(OH)D3，且灵敏度高、特异性强、高通量，已成为医院规范化测量25(OH)D的金标准方法，能用来评估维生素D2和维生素D3在体内的效应。
3维生素D3是维生素D缺乏的首选补充剂
2004年，Armas等[4]给予20例健康男性单次口服维生素D2或维生素D3 50 000 IU，结果发现：1）口服后第3天两组25(OH)D水平均上升，但第14天后维生素D3组的25(OH)D水平持续上升到峰值，而维生素D2组的25(OH)D水平却迅速下降到基线；2）第28天时，维生素D3组的药时曲线下面积（AUC）为204.7 ng・d/ml，远远大于维生素D2组的60.2 ng・d/ml（P＜0.002）；3）维生素D2的效力不及维生素D3的1/3。作者提醒道：医师应当知道,与维生素D3比较，维生素D2的效力明显较低、作用持续时间明显较短。
2006年，Houghton和Vieth[15]指出，维生素D2不应再被视为与维生素D3等效，因为它们提高血清25(OH)D水平的能力不同且血浆中维生素D2代谢产物与维生素D结合蛋白（DBP）所结合的量比维生素D3少、维生素D2有一个非生理代谢和半衰期较短的特性。因此，在讨论维生素D的营养作用时，重要的是要区分维生素D2和维生素D3，了解这两个不同维生素D分子的功能和它们之间的关系。即：维生素D2不应再被视为一种适用于补充剂或强化食品的营养素。
2008年Romagnoli等[6]的研究表明，不管是口服还是肌注，补充维生素D3提高的血清25(OH)D水平几乎等于补充2倍量的维生素D2所提高的25(OH)D水平。
2008年Mistretta等[1]的研究表明，维生素D2增加血清25(OH)D水平的能力低于维生素D3，且维生素D2的血浆半衰期较短，维生素D2与DBP、肝维生素D羟化酶和维生素D受体的亲和力也低于维生素D3。因此，虽然维生素D2目前仍为葡萄牙和澳大利亚等一些国家采用，但其不应再被用于补充剂或强化食品。
2011年Binkley等[16]给予64例65岁以上社区居民每日口服维生素D2或维生素D3 1 600 IU或者每月1次50 000 IU共1年，结果显示维生素D3能比维生素D2明显更有效地提高血清25(OH)D水平。
2011年Heaney等[17]对33例健康成人随机、单盲每周给予维生素D2或维生素D3 50 000 IU共12周，结果发现：1）平均25(OH)D增量面积，维生素D2组为（1 366±516）ng・d/ml，而维生素D3组为（2 136±606）ng・d/ml（P＜0.001）；2）平均25(OH)D稳态增加水平，维生素D2组为（24±10.3）ng/ml，而维生素D3组为（45±16.2）ng/ml（P＜0.001）;3）维生素D2组皮下脂肪维生素D2含量增加50 μg/kg，而维生素D3组的维生素D3含量增加104 μg/kg。即：维生素D3提高和维持血清25(OH)D浓度的能力比维生素D2强约87％，维生素D3存储维生素D的能力比维生素D2强2～3倍。这些结果与其它几项采用不同的剂量和给药方案的研究结果一致[3～6]。鉴于维生素D3的效力更大、成本更低，笔者认为，这些结果不仅可以安全地推广到日常临床实践中，而且也能指导临床医师的实际处方，即维生素D3应该是治疗维生素D缺乏首选的补充剂。
4结语
维生素D不足或缺乏十分普遍，需补充维生素D制剂来预防和治疗，但具体究竟是选用维生素D2、还是维生素D3补充剂呢？根据以上文献综述可以知道，应首选维生素D3补充剂治疗维生素D不足或缺乏。
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【摘要】本文建立了反相色谱法同时测定细胞培养基M199中维生素A、维生素E醋酸酯、维生素D2的含量的方法。采用Lichrospher C18，5μm，225×4mmid柱，可变波长UV检测器，甲醇为流动相，样品在10分钟内达到了基线分离。该方法简便、快速，结果可靠，可用于细胞培养基的质量控制。
【关键词】细胞培养基 维生素 高效液相色谱法
细胞培养基作为细胞工程重要的原材料，其品质的优劣直接影响到生物制品的质量，是生物制品企业非常重视的基础原料。而细胞培养基中含有氨基酸、维生素等必需的营养物质，它们是维持和促进细胞生长、增殖的主要因素。这些物质含量的多少、是否符合规定已成为衡量细胞培养基质量的重要指标。其中的某些维生素成分如维生素A、维生素E、维生素D2等对空气、光照和热极不稳定，且在培养基中的含量极少，是细胞培养基质量稳定性的重要影响因素。在细胞培养基M199中这三种维生素组分的含量在0.01μg/ml～0.14μg/ml之间，参考已报道的文献，脂溶性维生素的测定大都是含量较高的复合制品，而从含有61种成分的M199细胞培养基中提取这三种维生素并进行测定还未见报道［1～4］。由于这三种维生素的含量极低，在同一波长下难以同时测定三种组分，因此，我们采用可变波长UV检测器，利用多波长切换来分别测定VA、VD2和VE，以提高检测灵敏度，获得了良好的结果。
1实验部分
1.1 仪器和试剂：HP1050型高效液相色谱仪包括：HP 四元梯度泵、HP自动进样器、HP 可变波长紫外检测器、HP Pheonix Dos化学工作站；分析天平BS210S，赛多利斯；旋转蒸发器RE-52AA，上海亚荣生化仪器厂；维生素A醋酸酯、维生素D2、维生素E醋酸酯均为sigma试剂；甲醇为色谱纯；氯仿、异丙醇为分析纯。细胞培养基M199，无锡市美迪生物制品有限公司。
1.2 色谱条件：色谱柱：Lichrospher C18，5μm，225×4mmid；流动相：甲醇；流速： 1.0ml/min，柱温控制：40℃；进样量：30μl；波长切换程序：时间0.0～6.0min 检测波长320nm，时间6.0～8.5min 检测波长265nm，时间8.5～10.0min 检测波长295nm。
1.3 标准品溶液：精密称取维生素A醋酸酯、维生素D2、维生素E醋酸酯适量，用异丙醇溶解并稀释至下列浓度：维生素A醋酸酯1.4μg/ml、维生素D2 1.0μg/ml、维生素E醋酸酯0.1μg/ml，作为标准品溶液。
1.4 样品制备：取M199细胞培养基5g，精密称定，置250ml分液漏斗中，加入50ml纯化水完全溶解；加入氯仿振摇萃取，萃取5次，每次加入氯仿20ml；合并氯仿层放入250ml旋转烧瓶中，置旋转蒸发器上旋转蒸发至干（35℃），精密量取5.00ml异丙醇至烧瓶中溶解残渣，溶液即为供试品溶液。
2结果与讨论
2.1 色谱分离：根据1.2色谱条件进行色谱分离试验。结果表明，该条件下10分钟内可以有效的使维生素A醋酸酯、维生素D2、维生素E醋酸酯三种组分达到基线分离，色谱图见图1。
图1维生素色谱分离图
2.2 线性关系：分别取维生素A醋酸酯、维生素E醋酸酯和维生素D2标准品溶液0、1、2、2.5、3ml，置10ml容量瓶中，用异丙醇稀释至刻度，摇匀。按上述色谱条件，分别进样30μl，计算浓度C（μg/ml）与峰面积（A）之间的线性回归方程：维生素A醋酸酯 A=96.95C-1.76，R=0.9998；维生素D2 A=62.83C-0.45，R=0.9998；维生素E醋酸酯 A= 13.09C+0.20，R=0.999；结果表明，维生素A醋酸酯在0.14～0.42μg/ml、维生素E醋酸酯在0.01～0.03μg/ml、维生素D2 0.1～0.3μg/ml内，与峰面积有良好的线性关系。
2.3 精密度试验：分别取标准品溶液的1ml稀释液，重复进样6次，计算峰面积的相对标准偏差，RSD（n=6）分别为：维生素A醋酸酯1.45%、维生素D2 1.31%、维生素E醋酸酯3.17%，精密度良好。
2.4 回收率试验：在样品中加入三种组分，按上述色谱条件测定维生素A醋酸酯、维生素D2、维生素E醋酸酯的回收率，平均回收率为95.9%～100.8%，见表1
2.5 样品测定：取三批样品适量，精密称定，按1.4样品溶液制备方法制备供试品溶液，进样量30μl测定峰面积，按外标法计算样品含量，结果见表2
2.6 讨论
维生素A醋酸酯、维生素D2、维生素E醋酸酯的紫外最大吸收波长分别为320nm、265nm和295nm；由于三种组分在细胞培养基中含量都极小，浓度分别为0.14μg/ml、0.10μg/ml和0.01μg/ml，故本法采用多波长切换来进行测定，以提高检测灵敏度；另外细胞培养基成分非常复杂，给脂溶性维生素分离带来相当大的困难，我们在样品前处理时采用了溶媒萃取法；上述两个原因给分析测定带来一定的偏差。由于这三种脂溶性维生素对光、热、空气极不稳定，故我们可以通过测定这三个组分的含量来反映细胞培养基的质量稳定性。本法较好的测定了细胞培养基M199中脂溶性维生素的含量，为细胞培养基的质量控制提供了检测手段。
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作者单位： 214000 无锡市美迪生物制品有限公司(江苏 无锡)
全世界有10亿人缺乏维生素D。维生素D缺乏症又叫hypovitaminosis D，缺乏维生素D会导致骨质中出现有害的矿物质，让骨质变软，造成骨软化、佝偻病和骨质疏松症等疾病。佝偻病多发生在儿童时期，软骨病则多发于成人时期。
维生素D缺乏症可能由于阳光照射不足。阳光中的紫外线不能通过普通玻璃、室外活动少的人、维生素D生成不足；高层建筑物阻挡阳光照射，大气污染（如烟雾、尘埃）吸收了部分紫外线；冬季阳光照射减少，影响皮肤合成维生素D。
饮食中维生素D含量较低也会造成维生素D缺乏。天然食物中维生素D含量少，如乳类（包括人奶及牛、羊奶等）、肉类等含量较少，谷物类、蔬菜、水果几乎不含维生素D。
另外，一些疾病也会损害维生素D的吸收或转换，这些疾病包括肾病、肝病或其他一些遗传病。
你缺乏维生素D吗？
轻微的维生素D缺乏症状并不明显，不易诊断。成人如果很少接触阳光，或者出现以下症状，尤其是60岁以上老人或20岁以下年轻人，可以去医院确诊一下是否缺乏维生素D：
骨折
骨痛
慢性疲劳
乏力
抽筋
肌肉酸软
骨软化
骨质疏松
肥胖
儿童缺乏维生素D的症状
维生素D缺乏是小孩患佝偻病的主要原因。表现为骨质松软，骨质中矿物质含量不正常，不能正常吸收钙和磷等，从而造成骨骼畸形之后很难进行治疗。如果你看到孩子有这些症状中的任何一个，应尽快告诉医生，包括：
血液中钙含量少
肌肉痉挛
呼吸困难
骨质脆弱
蛀牙
易怒
胖妈妈的孩子易缺维生素D？
近期，一项发表在《西北医药》的研究表明，怀孕初期肥胖的女性会把自身的维生素D不足传给孩子。研究发现，苗条妈妈生的婴儿维生素D水平要比肥胖妈妈生的婴儿高1/3。
由于维生素D是脂溶性的，所以肥胖人血液中的维生素D水平较低。新的研究发现，即使肥胖妈妈和苗条妈妈在怀孕结束后维生素D水平相似，但与苗条妈妈相比，肥胖妈妈给孩子的维生素D量较少。可能因为在胖妈妈过量的脂肪中，维生素D会被隔离出去，因此导致肥胖母亲传输给婴儿的维生素D不足。
维生素D不足的婴儿会面临什么样的健康问题，目前还不了解。但是，最新研究发现，成人维生素D不足与自体免疫性疾病、发炎、肥胖的增加有关。所以，准妈妈需要控制体重，以免影响到孩子。
维生素D缺乏的专业诊断方法
维生素D在人体内经由肝脏和肾脏的进一步转化，生成具有生物活性的骨化三醇（1，25-二羟维生素D3）。通常，临床检测人体是否存在患佝偻病的风险，参考的既不是微量元素的值，也不是骨密度的值，而是血清中25羟维生素D的值，通过血液测试可以了解维生素D缺乏与否。如果人体内25羟维生素D数值小于20纳摩尔/毫升（50纳摩尔/升）认为是维生素D是否缺乏。美国有研究发现，在波士顿地区（北纬42°）的冬天，18～29岁的健康人血清中，25羟维生素D值小于20纳摩尔/毫升者达到了32%，维生素D缺乏的人口比例在中国应该更高。
我们究竟需要多少维生素D？
一些专家担心如果人们摄取太多的维生素D，那么维生素D就是一种毒药。同样，皮肤病专家也提醒人们，要小心进行日光浴。
那么，一个健康的人到底需要多少维生素D呢？根据美国医学研究所2010年公布的数据，不同年龄人群每天生理需求的维生素D的量分别是：1岁前的婴幼儿需要400国际单位，1～70岁的人需要600国际单位，70岁以上的老人需要800国际单位。每日生理需求的维生素D的量是指食物摄取、阳光照射、维生素D强化食品中的维生素D含量的总和。不足的部分需要维生素D补充剂加以补充。无论何种情形，除非你是个一年到头爱晒太阳的人，每天服用钙和维生素D的营养制剂，甚至每天补充1000国际单位额外的维生素D制剂，你所摄入的量都不会超过医学研究所建议的安全上限。有记载，显示，成人维生素D中毒的量是每天服用60000国际单位，由此可见，维生素D是相对安全的营养补充剂，不用担心会摄入过量而中毒。
如何补充维生素D？
晒太阳。人体获取的多数维生素D并非来自饮食，而是来源于皮肤在阳光下所受到的紫外线照射。未采取任何保护措施的皮肤在春、夏和秋季，每天大约需要15分钟的阳光暴晒来获取足够的维生素D。据研究，15分钟的阳光暴晒可让你增加2万个国际单位的维生素D。但矛盾的是，这样会导致皮肤受到损伤，并增加患皮肤癌的风险。
调整饮食可以获得更多维生素D。通过饮食提升体内维生素D水平，可以选择富含油脂的鱼类，如鲑鱼、鲭鱼、金枪鱼。蛋黄也富含维生素D，或者可以选择维生素D强化麦片和牛奶等食物。
母乳中的维生素D含量不多，所以哺乳的妈妈喂食婴儿配方食品以及及时补充维生素D非常必要，可以按照孩子的月龄进行相应的补充。
服用维生素D补充剂。使用防晒系数为8或更高的防晒霜在完全阻挡紫外线辐射的同时，也阻止了维生素D的合成。另外，那些肤色深的、足不出户的和那些生活在高纬度地区的人可能难以获取足量的维生素D。而且，上了年龄以后，人体更难将维生素转化为激素这种生物活性物质。所以，维生素D补充剂更有效果。
TIPS：大多数钙的营养制剂现在也含维生素D（通常是胆钙化醇，或称维生素D3），两片可提供250到300国际单位的量。液体维生素D补充剂更好。液体补充剂吸收率更高，因此相比于片状维生素D更为推荐。
吃蘑菇可以补充维生素D？
波士顿大学医学院的研究者发现，吃蘑菇（含有维生素D2）可以补充维生素D。此研究包括30名健康的成年人，研究人员对这些受试者进行随机分配，让他们分别服用2000国际单位的维生素D2胶囊、2000国际单位的维生素D3胶囊或2000国际单位的含有维生素D2的蘑菇粉注射剂，在冬季每天服用一次，连续服用12周。结果证明，蘑菇粉注射剂是维生素D的良好来源，可以有效提高健康成年人的维生素D水平。而且蘑菇粉的效果和维生素D2或D3补充剂的效果完全一样。
研究者解释了蘑菇如何产生维生素D2，他们发现此过程与皮肤接受阳光照射后所发生的反应类似。研究者认为，蘑菇不仅能产生维生素D2，还能产生维生素D3和维生素D4，所以，蘑菇是维生素D的良好的天然食物来源，而且我们可以在商店里很容易买到。
口服益生菌也能补充维生素D？
益生菌对人体有利，可增强人体免疫力、促进肠道消化等。美国一项新的研究发现，它还可以增加血液中维生素D的水平。据统计，在美国，有超过4000万成年人患有或将患骨质疏松症，此疾病常与钙和维生素D摄入不足有关。
此研究对随机对照实验进行原因分析，观察罗伊氏乳酸杆菌ncimb 30242对脂溶性维生素的作用。结果显示，在超过9周的干预期中，罗伊氏乳酸杆菌ncimb 30242使患高胆固醇血症的成年人血液中25-羟基维生素D的浓度增加了25.5%。
维生素D是一大类固醇类衍生物的统称,其家族中最重要的成员是D2和D3。它们主要具有抗佝偻病作用,又称抗佝偻病维生素。植物中不含有维生素D,但维生素D原在动、植物体内都存在。植物中的麦角醇为维生素D2原,经紫外线照射后可转变为维生素D2,又名麦角钙化醇;人和动物皮下含的7-脱氢胆固醇为维生素D3原,在紫外线照射后转变成维生素D3,又名胆钙化醇。维生素D的主要功能是调节体内钙、磷代谢,维持血钙和血磷的水平,从而维持牙齿和骨骼的正常生长和发育。儿童如果缺乏维生素D则易发生佝偻病。
太阳中包含有紫外线,因此接受日光照射是获取维生素D的一种既简便又有效的方式。但是晒太阳是一柄双刃剑。出于对皮肤变黑、日晒伤、皮肤癌等情况的考虑,大多数人都不愿意长时间暴露在太阳底下;不过,太阳晒得不够就会导致维生素D不足,从而引起骨骼系统的一些病变,如佝偻病、骨质疏松症等。除此之外,维生素D还可能减少其他某些疾病的发生率。
曾几何时,维生素D缺乏的状况仅仅存在于纬度较高区域,因为在那些地方,往往接连几个月之中每天只能见到短短几小时的微弱阳光。而在其他地区,只需要经常性地进行正常户外活动即可避免维生素D的缺乏,因为在足够光照的前提下,维生素D的获取是如此简单――平均接受不到半小时光照,即可满足一个礼拜人体对于维生素D的需求。
然而时至今日,情况却发生了很大的改变。久坐于办公室;沉溺于欣赏电视或上网;防晒霜的普遍应用,都使得接受日晒成为一种奢侈。工业化文明使我们从日晒中获取维生素D的机会大大减少,因此人们常通过强化食物产品来对维生素D加以补充,比如添加强化维生素D的牛奶。某些富含维生素D的天然食物也受到人们青睐,比如深海鱼类等。应该承认,这些食物能在一定程度上补充人体需要的维生素D,但保证充足的日晒却是最为简便易行的办法。
维生素D有助于抗击糖尿病?
人体产生维生素D的能力因人而异,主要原因在于每个人皮肤中色素含量的不同。皮肤色素的作用就好比天然的遮光帘,它能够保护皮肤,然而从另一个角度来说它又使维生素D的产生减少。一般来说,人体肤色越深,其产生维生素D的能力就越弱。在2004年发表于美国《糖尿病护理杂志》的一篇研究报告中,奥克兰大学的学者罗伯特・斯克拉格发现黑种人体内维生素D水平比白种人要低得多。斯克拉格还发现体内高水平的维生素D与较低的糖尿病发病率有一定关联性。
在很早之前,人们就已经知道维生素D可以对骨骼系统产生影响。现如今,越来越多学者正致力于研究维生素D对于人体的其他生理效应。人们也渐渐认识到,缺乏维生素D不仅仅会导致佝偻病等骨骼系统疾病,就好像缺乏维生素C不仅仅会导致坏血病一样。
除了调节体内钙、磷代谢和平衡,维持骨骼健康等功能外,近几年国外研究发现,不仅骨组织,许多其他组织或细胞如胰岛细胞、血管内皮细胞以及脂肪组织等都能表达维生素D受体及其活化酶(1α-羟化酶),对于糖尿病或糖尿病前期患者而言,维生素D似乎能刺激其机体产生更多的胰岛素。同时,维生素D还有可能增加胰岛素敏感性。因而探讨维生素D的新功能已成为近几年的国际研究热点。
有证据表明,维生素D对防止胰岛细胞死亡非常重要,而且也可能对胰岛细胞移植物的生存起到重要作用。维生素D可以改善胰岛素的分泌,而且还可以改善胰岛素敏感度。有研究证明,当维生素D浓度由25nmol/L增加到75nmol/L时,胰岛素敏感度可以增加60%,这比使用曲格列酮(54%)和二甲双胍(13%)的效果都好(但此项研究中患者的随访时间都不足1年,所以并不清楚HbA1c水平的降低是否可以持续或者可以得到更进一步的改善)。几项近期的研究显示,在空腹血糖受损的患者中与使用安慰剂相比,服用500毫克钙和700国际单位的维生素D可以预防空腹血糖的升高,而且可以在3年内减缓胰岛素抵抗的发展进程。
有研究报告在3位亚洲患者中增加使用维生素D后,导致血糖控制情况恶化。但是值得一提的是,这些患者服用的是维生素D2,而不是维生素D3。维生素D2会产生几个作用未知的不明代谢产物。还有证据表明,在亚洲人中24-羟化酶活性较强,而这可以灭活维生素D2。某些维生素D受体亚型是不同种族人群中胰岛素分泌能力的重要决定因素,所有这些还有很多未知因素,需要进一步研究。
为揭秘谜底而不懈努力
作为一名受到美国糖尿病协会资助的科研学者,美国的哈瑞斯博士可能比一般人更有机会揭秘补充维生素D是否真能降低糖尿病的发病几率。她为此设立了一项研究,初步计划考察100名40岁以上的糖尿病患者以及一些超重或肥胖、但并无糖尿病的人群。其中一半人服用安慰剂,另一半补充维生素D,为期12周,期间持续性地检测他们的胰岛素分泌量、血糖值、胰岛素抵抗等关键性指标,用以观测补充维生素D对他们究竟有什么影响。
截至目前,“体内维生素D水平高者发生糖尿病的几率较低”这一结论已经成为学科内的共识,然而,尚且缺乏证据支持单纯补充维生素D能够降低糖尿病,“打个比方来说,我们知道经常户外活动的人体内维生素D水平较高,他们糖尿病的发病率也相对较低,但究竟是高水平的维生素D起了预防糖尿病的作用呢,还是经常户外运动这一健康生活方式才是根本原因呢?”哈瑞斯博士如此说道。
另外,目前的研究仅仅证明补充维生素D的确有助于美籍黑人预防2型糖尿病,但是否放之四海而皆准就不得而知了。哈瑞斯博士也为此继续努力着,她表示,将通过更多、更大型的研究来揭示维生素D是否有助于全人类预防糖尿病,这是她以及像她一样的研究者们现在面临的最大、也是最重要的课题。
人的一生中，骨骼系统不停地进行着新陈代谢：破骨细胞不断分解旧骨，成骨细胞不断形成新骨。随着年龄增加，骨骼也和其它器官一样，发生退变，分解速度大于形成速度，骨钙和其它矿物质以及骨基质总量以每年1％的速率递减。因而，骨骼质地渐渐疏松，强度和刚度下降，出现全身无力、腰酸背痛等症状。脊柱椎骨支持不住体重，慢慢塌陷变扁，导致弓腰驼背，身材变短，影响心肺功能。同时，也容易发生骨折。
专家指出，预防和治疗老年骨质疏松，关键在补钙，时下，壮骨粉、葡萄糖酸钙口服液等补钙保健品风靡全国，许多老年人在服用。显然他们已经认识到补钙的重要性。可是，有的效果并不好。原来，人体吸收钙需要维生素D的协助。如果缺少维生素D，尽管食物中钙质丰富，依然不能吸收。满足人体对维生素需要借助阳光。
天然维生素D有两种，即维生素D2和维生素D3。人体内维生素D主要是维生素D1。人体内每日可合成维生素D3约200～400国际单位。食物中现存的维生素D2和D3可由肠道吸收。另外，日光中的紫外线照射皮肤后，可使皮肤中的7一脱氢胆固醇转变为维生素D3。我们日常所需要的维生素D，除食物供给一小部分外，主要是通过日光照射而获得的。所以，只要充分接受阳光照射，即完全可以满足身体对维生素D的需要。
不论维生素D2或维生素D3，本身都没有生物活性，它们必须在肝、肾中进行一定的代谢活动，转变成具有生理活性的化合物，即活性维生素D。活性维生素D可促进肠粘膜吸收钙质。
因此为了防止老年性骨质疏松，就要补钙，为了钙的吸收，就要保证体内有充分的维生素D，就需进行适当的户外活动，接受阳光照射。
老年人接受阳光照射，并非意味着冒着高温，刻意在烈日下炙烤。只要经常注意在户外活动即可。冬天气候寒冷，老年人体质较差，往往足不出户，便可能发生维生素D缺乏。春天一到，风和日丽，是户外活动接受阳光普照，补充维生素D的好时机。有一点需要注意的是，紫外线不能透过玻璃，因而隔着玻璃晒太阳，对增高体内维生素D是没有用处的。
【关键词】维生素D；缺乏；营养指导
【中图分类号】R71 【文献标识码】A 【文章编号】1004-7484（2013）02-0461-02
营养是人类生命的源泉和物质基础，决定着国民健康状况，也制约着社会的发展。一个伴随社会经济发展而形成的合理营养制度将使人们终身受益，指导合理选择食物与饮食搭配尤其对孕产妇来说显得尤为重要，它关系着下一代人的生命健康。维生素D是身体的一种很重要的营养素，它能提高机体对钙磷的吸收，促进生长和骨骼钙化，促进牙齿健全。检测孕妇体内25―羟基维生素D，一方面是可以了解孕妇的营养状况；另一方面妇产科医师可以根据检测结果给予其营养指导，让孕妇合理营养； 同时为上级部门制定妇女保健相关政策提供依据；于是将这一年来266名孕妇的25―羟基维生素D检测结果统计分析如下。
1 统计对象：
在2012年一年中，在我单位参加孕期保健的接受检测25―羟基维生素D的266名孕妇。
2 统计方法：
将这一年来的25―羟基维生素D登记本上的所有数据录入电脑，统计平均值，不同维生素D含量的人群柱状分布图等等，这些数据真实可信，核对无误后进行资料的统计分析。
3 检测方法：高效液相色谱―串联质谱法。
4 检测结果参考值及其含义：
5、25-羟基维生素D2、25-羟基维生素D3以及25-羟基维生素D（D2+D3）的统计情况及平均值详见表一；不同25-羟基维生素D（D2+D3）的发生率及人群柱状分布图详见表二和表三：
5 分析
5.1 根据英国牛津大学等机构研究人员在《基因组研究》杂志上报告说，维生素D可以影响299个基因活性，这些基因已经被证实与一系列疾病有关，如多发性硬化症、风湿性关节炎、慢性淋巴细胞性白血病、I型糖尿病和肠癌等。1 根据266例孕妇的维生素D含量，算出其平均值为20.22 ng/ml， 说明我所孕检孕妇体内的维生素D含量整体不足。
5.2 25-羟基维生素D2含量
5.3 首先建议上级主管部门要重视孕妇的维生素D营养保健指导工作，要求各级妇幼保健机构从孕前、孕期宣教开始，制订孕妇补充维生素D宣传小册子、制作宣传版面，通过孕妇学校、面对面，电话咨询或者孕期宣传咨询活动等多种形式，强调合理营养的重要性，特别强调孕妇多晒太阳、额外补充维生素D的重要性，维生素D在孕妇体内的生理作用，介绍含维生素D较多的食物（如维生素D2来源于植物性食物，维生素D3来源于动物性食物、内源生成），介绍维生素D缺乏的症状等等。
5.4 其次妇产科医师根据每个孕妇的缺乏维生素D情况进行一对一的宣教，让孕妇本人了解补充维生素D的重要性，要从思想上重视补充维生素D等同于重视补钙补铁补充叶酸。
5.5 最后需要家庭的支持，特别需要老公的鼓励、支持，最好尽量陪同多晒晒太阳，让皮肤直接接受太阳的照射，这样有利于钙质的吸收，同时一日三餐就餐时气氛要和谐温馨，鼓励均衡营养，为迎接一个新生命的到来做好充分的准备。
参考文献：
维生素D营养状况的评价对于人体的整体健康是非常重要的。现在的研究表明，维生素D已不再仅仅用于预防儿童佝偻病的营养必需品。
充足的维生素D可以降低常见癌症的发生率,防治自身免疫性疾病、高血压和感染性疾病等；还可以预防流产、先兆子痫、和早产等。孕妇摄入足量的维生素D，可以使胎儿获得足够的维生素D，从而降低婴儿在将来发生糖尿病、哮喘与精神分裂症的几率。此外，给慢性不明原因的疼痛病人补充维生素D，可以有效缓解疼痛。
60%以上人群缺乏维生素D
维生素D的缺乏与摄入量、皮肤日照时间有关。由于紫外线照射带来的皮肤癌等问题，各国人群接受日照的时间都在减少，并且很多国家明确规定要限制接受日照的时间，因此全世界范围内，维生素D均呈现广泛缺乏的现象。美国健康成年人只有23%的人群维生素D水平充足（＞30ng/ml），65.3%的中国儿童和40%的青春期少女VD水平严重不足（＜12.5ng/ml）。
维生素D是脂溶性维生素,人体通过膳食摄取和通过皮肤合成,。人体皮肤在光照下合成维生素D3，动物来源的维生素D也是维生素D3,植物来源的是维生素D2,无论是D2还是D3，均在肝脏代谢,形成稳定的25(OH)维生素D。检测25(OH)维生素D的水平，能科学评估人体维生素D的营养状况。
对中国部分居民血液中的25-（OH）D3水平检测发现，约60%以上的居民为缺乏，只有约6%的人群达到优秀水平。其中，最易缺乏，并因为缺乏容易出现疾病的人群包括：孕妇、婴幼儿、老年人。
由于人类生活方式的改变，中青年人群更热衷于室内活动，接受日照时间很少，出现了疼痛等亚健康症状，所以办公室人群关注维生素D的状况已经迫在眉睫。
维生素D检测有了新技术
近年来，国际研究发现，25-（OH）VD的循环水平是良好的维生素D营养状况的测试指标，在美国、澳大利亚、新西兰等国家已经常规进行25-（OH）VD的检测，并用于药物治疗的疗效监测。
在中国，维生素D 的补充主要是与维生素A或者钙片一起进行的，剂量较少，完全采用的是盲补形式，一直没有评估手段。现在，这些新技术已经开始在中国推广。武警总医院检验科引进了国际公认的25（OH）维生素D检测系统，可以准确地检测人体内25(OH)维生素D，让您明明白白地补充维生素D。
大剂量药物补充有发生维生素D过量和中毒的可能。对服用维生素D的人群监测维生素D的水平十分必要。维生素D代谢较慢，推荐检测时间间隔为1～3个月。
如何补充维生素D
在补充维生素D的时候，不推荐复合制剂，宜尽量采用纯制剂。因为复合制剂不能足量补充维生素D，还会造成其他成分过量而引起中毒。
目前，中国没有单纯的维生素D胶囊,只有一种儿童补充的滴剂,为400 IU。
美国有医院使用的是，需要医生处方的维生素D2，是大剂量4000IU,药店使用的OTC药物是维生素D3,剂量为1000IU。
维生素D的补充标准
1．中华医学会儿科学分会（2008年3月）建议：
早产儿、低体重儿、双胞胎：2周后800IU/d，三个月后400IU/d。
纯母乳喂养的婴幼儿：2周～2岁，400 IU/d
配方奶喂养儿：如果奶量少于500ml，补充200 IU/d
妊娠后期为秋冬季的孕妇： 400～1000 IU/d，同时监测25-(OH) D3浓度。
2．美国儿科学会临床指南：
与中国相比，提前和延长了补充维生素D 的年龄段：
孕妇（妊娠后期）、乳母，不管什么季节都需要补充维生素D 400～1000 IU/d
3．中华医学会骨质疏松和骨矿盐疾病分会（2011年3月）建议：
有条件的医院检测患者25（OH）维生素D，了解维生素D的水平，合理补充。国际骨质疏松会建议，老人体内25（OH）维生素D水平要等于或高于30ng/ml（75mmol/ml）。
专家简介：
维生素是机体维持正常代谢和功能所必须的一类低分子化合物，它是人体六大营养素之一，大多数可从食物中获得，仅少数可在体内合成或肠道细菌产生。复方维生素注射液（4）为脂溶性维生素复方制剂，每2 ml含维生素a2500iu、维生素d2200iu、维生素e15 mg、维生素k12 mg。主要适用于不能经消化道正常进食患者维生素a、d2、e、k1的肠外补充，近几年来，广泛应于用临床。由于小儿生长快，营养需要多，加之疾病代谢消耗大，该药已在儿科临床应用。我科于2007 年10 月至2010 年7 月在使用过程中出现2 例过敏性休克，现报道如下：
例1，男，15个月，因口腔粘膜疱疹5天，于2009年3月23日入院，查体：体温39℃，脉搏130次/分，呼吸40次/分，医嘱予以阿莫西林舒巴坦0.75+生理盐水20 ml静滴2次/日，第一天使用小儿氨基酸20ml+10%葡萄糖50ml静滴无不良反应。第二天，在小儿氨基酸液体中加复方维生素注射液（4）2ml在输注该液体数分钟后，病人突然出现呼吸急促，大汗淋漓，颜面苍白，口唇发绀、脉搏细弱、喉头水肿等症状，立即停用加有复方维生素注射液（4）的液体，更换液体，吸氧，静推地塞米松5mg，肌注非那根10 mg，多巴胺4 mg+10%葡萄糖20 ml静脉泵入10 ml/小时，抢救半小时以后上述症状缓解。
例2，女，9 个月，因发热咳嗽7 天，于2010年7 月8 日入院，查体：体温38 ℃，脉搏140 次/分，呼吸40 次/分，医嘱哌哪西林0.5+生理盐水20 ml静滴2 次/天，复方维生素注射液（4）2 ml+10%葡萄糖50 ml静滴1 次/天，在输注复方维生素注射液（4）该组液体10 分钟后出现呕吐、哭吵、面色苍白、四肢凉、呼吸困难、喉头水肿等症状。
立即停用复方维生素注射液（4），输氧，静推地塞米松5 mg，肌注非那根8 mg，多巴胺3.5 mg+10%葡萄糖20 mg静脉泵入10 ml/小时，抢救10 分钟以后上述症状缓解。
讨论：复方维生素注射液（4）主要成分：维生素a、d2、e、k1，维生素k是促进生长的必要成分，能维持细胞膜稳定，并保持视网膜视觉功能，缺乏后身体停止生长，可致夜盲，眼球干燥，角膜软化症。维生素d是调解机体钙磷代谢，促进钙磷吸收、利用，促进骨骼生长。维生素e有维持正常的生殖功能和肌肉正常代谢功能，维生素k1是促进肝脏形成凝血酶原必需的因子，它调解凝血因子ⅶ、ⅸ、ⅹ，是凝血过程中维持纤维蛋白原转变成纤维蛋白的促进因子，单独静滴维生素a、d2、e、k1均有可能引起过敏反应，如过敏性休克、心血管反应、呼吸系统反应等。
2 例病人均为初次运用出现严重的变态反应过敏性休克，患儿以前无药物过敏史，其它药物继续使用无此反应，过敏的机制目前还未清楚，有待进一步探讨。但是2 例病人其使用浓度都超过说明书中的规定，均未避光下静滴，考虑过敏反应与静滴的浓度、条件、时间有关，也可能与患者个体体质差异有关。医务人员应用过程中要严密观察过敏反应，引起高度的重视，严格按说明书使用，严防不良反应发生。笔者认为应注意以下几点：①严格掌握用药指征，仅对不能经消化道正常进食患儿补充复方维生素注射液（4）；②该药维生素k、e对光敏感，易被酶和氧化剂破坏，发生过敏性反应，应避光使用；③过敏体质慎用；④注意药物浓度，尽量口服，如需静脉给药不能与其它药物混合，并单独应用。可用5%葡萄糖、生理盐水、复方氨基酸稀释；⑤用药时严密观察病情，特别是脸色、脉搏、呼吸、意识，一旦出现不良反应，立即停用，并给地塞米松、非那根、肾上腺素、多巴胺等治疗。
参考文献
[1] 陈新谦,主编.新编药物学[m].6版.北京:北京人民卫生出版社.2007:683.
[2] 复方维生素注射液（4）说明书.