时间：2022-10-29 02:19:44
摘 要 本文建立了FD显色分光光度法测定新疆海棠果中单宁的测定方法。在弱碱性条件下，海棠果中单宁与钨酸钠―磷钼酸形成稳定的蓝色配合物，在760 nm处测定显色液的吸光度确定单宁的含量。以单宁酸为标样，测得单宁在0.05 mg /ml～0.35 mg /ml浓度范围内，服从比尔定律，回归方程为：A= 1.286×10-3 + 1. 7936ρ，相关系数为R=0. 999 6，方法回收率为96.0%～101.4%，相对标准偏差为0.05%。
关键词 新疆海棠果 单宁 分光光度法
海棠果（ plumleaf crab） 别名楸子、圆叶海棠、海红等。属蔷薇科，落叶小乔木。原产我国，分布于西北、华北、东北及长江以南各地。栽培历史很久，类型很多，各地名称都不相同，我们新疆的黄海棠就属于此种。海棠果营养丰富，具有解毒生津、止渴降火、利尿、健胃、助消化，对小儿尿道炎有特效。
植物单宁是一类重要的天然活性物质，在植物界分布十分广泛，在石油、矿业、建材、化工、纺织、食品、医药、农林等方面已得到广泛应用。天然植物中单宁的测定方法主要有高锰酸钾滴定法 、Folin-酚法[ Fo lin-Denis 法（ FD ） 和Folin-Cio calteu法（ FC） ] 、香草醛法。单宁广泛存在于植物的叶、果实、树皮、树木和根等植物器官中，它与果实成熟前后的涩味、苦味和霉褐变密切相关，因此，测定果实中单宁的舍量具有重要意义。本试验采用Folin-Denis（ FD） 显色分光光度法测定新疆海棠果中单宁的含量， 为进一步开发利用该植物资源提供依据。
一、实验仪器、试剂与材料
1.实验仪器。紫外分光光度计（上海光学仪器厂），电子天平（常州市天之平仪器设备有限公司），电热加热炉（上海电加热器制造厂） 。
2.实验试剂。钨酸钠、磷钼酸、磷酸、硫酸锂、无水碳酸钠均为分析纯，水为自制新鲜蒸馏水。Folin-Denis 显色剂：称取钨酸钠50 g，磷钼酸10 g，加入蒸馏水375 ml溶解，加入85% 磷酸25 mL，水浴回流2 h，冷却后定容至500 mL棕色瓶中。
3.实验样品材料：市售海棠果，无霉烂、黑斑、碰伤。
二、方法与结果
1.样品处理。样品打浆，称浆状适量样品于三角瓶中，加水50 mL，沸水提取30 min，转入100 ml容量瓶中，定容，过滤。
2.发色方法（FD法）。
取滤液3 mL于100 mL容量瓶中，加2%硫酸锂溶液3 ml，加入FD试剂5 mL，摇匀后静置几分钟，加入20%无水碳酸钠溶液10 ml，定容后摇匀，静置30 min，在波长760 nm处比色。
3.标准曲线的绘制。
（1）配制单宁标准溶液：称取0.025 0 g单宁标准品，水溶后定容于250 mL容量瓶中，即为0.1 mg/mL单宁标准品溶液，此溶液1 ml相当于0.1 mg单宁。
（2）标准曲线绘制：按试验发色方法依次分别吸取单宁标准品溶液0.0 mL、0.5 mL、1.0 mL、1.5 mL、2.0 mL、2.5 mL、3.0 mL、3.5 mL配制成系列单宁标准溶液进行测定，以单宁质量浓度ρ（mg/ml）为横坐标，吸光度A 为纵坐标绘制标准曲线，线性范围为0.05～ 0.35 mg /mL，得线性回归方程A= 1.286×10-3 + 1. 7936ρ，相关系数为0. 999 6。
4.回收试验。
于已知含量的海棠果样品提取液中，加入一定量的单宁标准溶液，计算单宁含量进行回收试验。（见表1）。
表1 回收试验结果
5.精密度试验。对海棠果样品提取液进行多次平行测定，5次平行测定的相对标准偏差为0.05%，（见表2），说明该方法法测定结果重复性较好。
表2 精密度试验结果
6.样品含量的测定。称取样品9.260g 按照样品处理及发色方法比色，由标准曲线查出样品浓度，计算出样品单宁含量，测定结果表明样品海棠果中单宁平均含量为0.056%，结果见表3。计算方法如下：
X（%）=ρ1V1/ m V2×f×100/1000
公式中：ρ1-从标准曲线中查得的单宁含量（mg）
m-称样量（g） V1-定容体积（ml）；
V2-取液体积（ml） f-稀释倍数
表3 海棠果单宁测定结果
三、讨论
本实验通过FD显色分光光度法测定新疆海棠果中单宁含量，结果表明，此方法可以作为测定新疆海棠果中单宁含量的一种测定方法，方法简便快速，灵敏度、准确度和精密度较高。
参考文献
[1]刘军，等.海棠果系列产品的研究与开发[J]新疆大学学报：理工版，2001，18（4）：76-78.
[2]张纵圆，等.分光光度法测定新疆紫花苜蓿中单宁[J].理化检验-化学分册，2010，46（1）：99-100.
[3]杨伟.分光光度法测定果实中的单宁[J].华北农学报，1993，8（2）：116-119.