诺氟沙星胶囊检验方法确认

摘 要：诺氟沙星胶囊现为上市品种，收载于《中国药典》2010年版第一增补本，本公司生产的规格为0.1g，装量为0.3g，现据中国药典其检测内容主要有鉴别、有关物质、溶出度、含量测定。本文对诺氟沙星胶囊质量标准中HPLC测定含量进行方法学确认，以确保质量标准能够有效的控制成品质量。

关键词：诺氟沙星胶囊；质量标准；含量测定

诺氟沙星胶囊主要活性成分为诺氟沙星，辅料由淀粉、羧甲淀粉钠组成，适用于敏感菌所致得尿路感染、淋病、前列腺炎、肠道感染和伤寒及其他沙门菌感染。为了控制产品质量，本文对HPLC法对测定诺氟沙星含量进行方法确认，结果准确，保证控制产品质量。

1 仪器与试药

1.1 仪器

AB265-S型电子天平（梅特勒）；AB104N型电子天平（梅特勒）；LC-20AT高效液相色谱仪（日本岛津）；DELEA320型PH酸度计（梅特勒）； KQ-250TDV型超声波清洗器（昆山超声波仪器有限公司）；AP-01溶剂过滤器（天津泰斯特）。

1.2 试药

样品来自哈尔滨国康药业有限公司生产的诺氟沙星胶囊，批号140601、140602、140603；所用试剂乙腈为色谱纯（美国迪马），水为重蒸馏水，其他试剂均为优级纯；诺氟沙星对照品批号1304150-201206，依诺沙星对照品批号0453-9901，环丙沙星对照品批号130451-201203，对照品均来自中国生物制品研究所。

2 方法与结果

2.1 色谱条件及系统适应性试验

2.1.1 色谱条件：Agilent Eclipse XDS-C18（5μm，150mm×4.6mm）色谱柱，外标法定量，0.025mol/L磷酸溶液（用三乙胺调节pH值至3.0±0.1）-乙腈（87：13）为流动相，检测波长为278nm，流速：1.0ml/min，进样量：20μl，理论塔板数不得低于2000。

2.1.2 系统适应性实验：称取诺氟沙星对照品、环丙沙星对照品和依诺沙星对照品各适量，加0.1mol/L盐酸溶液适量使溶解，用流动相稀释制成每1ml中含诺氟沙星25μg、环丙沙星和依诺沙星各5μg的混合溶液，取20μl注入液相色谱仪，记录色谱图，诺氟沙星峰的保留时间约为9分钟。诺氟沙星峰与环丙沙星峰和诺氟沙星峰与依诺沙星峰的分离度均应大于2.0。结果为诺氟沙星保留时间为8.583min，理论塔板数7502，分离度3.3（ 图1）

2.2 溶液的制备

2.2.1 对照品液的制备

取诺氟沙星对照品约25mg，精密称定，置100ml量瓶中，加0.1mol/L盐酸溶液2ml使溶解后，加水稀释至刻度，摇匀，精密量取5ml，置50ml量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，即的。

2.2.2 供试品溶液的制备

精密称取诺氟沙星胶囊细粉适量（约相当于诺氟沙星125mg），置500ml量瓶中，加0.1mol/L盐酸溶液10ml使溶解后，用水稀释至刻度，摇匀，滤过，精密量取续滤液5ml，置50ml量瓶中，用流动相稀释至刻度，摇匀，即的。

2.2.3 阴性对照溶液的制备

按处方比例依据诺氟沙星胶囊工艺制备不含诺氟沙星的阴性对照样品，依2.2.1项下方法操作，得缺诺氟沙星阴性对照溶液，备用。

2.3 专属性实验

精密量取对照品溶液、供试品溶液和阴性对照溶液各20μl，分别注入液相色谱仪，记录色谱图，结果阴性对照溶液无干扰。

2.4 标准曲线的制备

分别精密量取对照品溶液1、5、10、15、20μl注入液相色谱图，以峰面积为纵坐标，进样器为横坐标，进行回归，的回归方程为Y=213882.8866X-138509.9638（n=0.9975）。结果表明诺氟沙星25μg-500μg范围内线性关系良好。

2.5 精密度实验

精密吸取同一对照液各20μl，按上述色谱条件测定，重复进样5次，分别记录诺氟沙星的峰面积，测定诺氟沙星的RSD为0.23%，表明仪器的精密度很好。

2.6 稳定性实验

精密吸取同一供试液20μl，按含量测定方法，在0、2、4、6、8h测定峰面积。从实验结果可知供试品制备后8h内测定，色谱峰面积无明显变化，在此时间内，待测组分化学性质稳定。

2.7 重现性实验

取装量差异项下的内容物，混合均匀，精密称取细粉适量（约相当于诺氟沙星125mg），平行5份，按供试品溶液制备方法独立测定，分别吸取20μl注入液相色谱仪中，测定峰面积，结果rsd=0.25%，表现方法重现性良好。

2.8 回收率试验

取装量差异项下的内容物，混合均匀，精密称取细粉适量（约相当于诺氟沙星50.35mg），{批号为140601的诺氟沙星胶囊，含量已知99.5%，装量0.2987g}，每份5ml，分别精密加入对照品溶液1ml（含诺氟沙星50.15mg），照含量测定方法进行测定，根据峰面积计算，测的诺氟沙星加样的回收率，结果平均加样回收率为99.35%，RSD=1.17%。由此可知测得方法回收率良好。

2.9 样品的含量测定

根据供试品溶液的配制法配制样品溶液，按上述色谱条件进行测定，其中，进样量20μl，保留时间约为9分钟左右，按外标法计算含量。

3 结论

综合以上数据，按照药品GMP指南相关指导原则及中国药品检验操作规范测定，可以得出在选定的色谱条件下，诺氟沙星与相邻组分的峰分离度良好，空白溶液无干扰，方法学研究表明，质量标准中含量测定方法的专属性、线性、精密度、重现性、稳定性、回收率均良好，含量测定能够有效控制成品的质量，同时证明本方法适应于本实验室的所有检验设备。