蝴蝶兰的组织培养

蝴蝶兰于1750年发现，已有70多个原生种。在中国台湾和泰国、菲律宾、马来西亚、印度尼西亚等地都有分布，尤以台湾出产最多。蝴蝶兰是单茎性附生兰，茎短，叶大，花茎一至数枚，拱形，花大，因花形似蝶得名。其花姿优美，颜色华丽，花期长，为热带兰中珍品，有“兰花皇后”之美誉。随着人民生活水平不断提高、销售价格日趋合理，蝴蝶兰花的需求量（尤其国内需求量）大幅提升。

为标准化蝴蝶兰组培生产，保证蝴蝶兰瓶苗质量，现将蝴蝶兰组织培养的过程分解如下：

外植体的选取、消毒和培养

一般情况下，选取蝴蝶兰的花梗作为外植体，因为花梗不损伤植株而且成活率高。

外植体的选择标准：

选择优良的种质，品种的选择要有前瞻性；

选择健壮的植株，要求母株无病虫害、无畸形变异、无病毒；

选择最适的时期，最好选择在春秋湿度低的季节，花朵开放2～3朵时采切。

花梗的消毒

选取剪下适合标准的花梗，放在自来水下冲洗；

将花梗剪成一芽一段，用75%的酒精浸泡，放在超声波清洗器上清洗2 min；

将每段花梗芽剥去苞皮，再放到5%的次氯酸钠溶液中，在超声波清洗器中清洗2 min；

拿到超净工作台上用无菌水冲洗3次。

花梗的接种、培养

在超净工作台上，将消毒冲洗好的花梗接种到试管培养基上。培养基为MS+6-BA3～5 mg/L+蛋白胨2 g+椰汁100mL+糖30 g+琼脂6 g，pH=5.6～5.8。培养温度25～28 ℃，光照1500～2000 Lx，每天光照10～12 h，接种7 天后，侧芽膨大并向外伸长，30 天左右长出小叶，50 天左右长成具3～5 片小叶的单株小苗。

蝴蝶兰组培苗的增殖阶段

为保证蝴蝶兰种苗的品质，在实际生产中蝴蝶兰组培苗的增殖方式主要是芽长芽，而少用诱导原球茎的方式。一般将诱导的芽切去叶片和基部接种到MS+6-BA3～7mg/L+蛋白胨2g+椰汁100mL+糖20g+琼脂6 g，pH=5.6～5.8。75 天左右转接继代一次，增殖倍数为2～6。培养温度23～27 ℃，光照1500～2000 Lx，每天光照10～12 h。

蝴蝶兰组培苗的壮苗阶段

为保证组培生根苗达到一定标准要求，蝴蝶兰组培苗在生根前要经过壮苗阶段。将增殖的芽切分开转接到培养基MS+6-BA1～3 mg/L+蛋白胨2g+椰汁100mL+糖20g+琼脂6 g，pH=5.6～5.8。培养温度23～27℃，光照1500～2000 Lx，每天光照10～12 h。

蝴蝶兰组培苗的生根、驯化

蝴蝶兰的根属气生根，根系粗壮、发达。将壮苗的瓶苗转接到生根培养基MS+IBA0.3～0.5 mg/L

蛋白胨2g+香蕉汁100 g+糖30 g+琼脂6 g，30～45 天，将定植子瓶苗转至驯化温室驯化炼苗30～45 天。

蝴蝶兰出瓶后小苗的初期管理

瓶苗在出瓶后，需先做分级，分为大苗及小苗，大苗两叶距在4 cm以上，可直接种在1.5"软盆中，但除看叶子长度外也要视其根的生长情况两者相配合，若叶长够，但根系不好，一样要种在穴盘中，两叶距小于4 cm者种于穴盘中。瓶苗种完后当天必须立即喷施多菌灵1500倍以预防病害传染。刚出瓶的小苗光度应保持在2000～3000 Lx低光度范围内；日温保持在25～29 ℃，夜温保持在22～24 ℃；相对湿度在60%～80%较佳，过低的湿度不利于蝴蝶兰的生长，过高的湿度容易造成病害流行。北方地区气候干燥，需在温室内喷水加湿。