ELISA法和TRUST法检测梅毒结果比较

【摘要】 目的 比较酶联免疫吸附试验（ELISA）和梅毒甲苯胺红不加热血清试验（TRUST）检测方法的敏感性和特异性， 评价其在临床诊断中的应用价值。方法 应用ELISA和TRUST联合检测1913例血清标本， 包括手术前和输血前筛查的1715例以及门诊内镜检查前的198例血清标本， 可疑阳性结果采用梅毒螺旋体明胶凝集试验（TPPA）确诊。结果 共检测1913例， 用TPPA法确诊32例为阳性。用TRUST法检出29例阳性， 其中26例确诊阳性， 3例为假阳性， 敏感性为81.3%（26/32）， 特异性为89.7%（26/29）。用ELISA法检出33例阳性， 其中32例确诊阳性， 1例为假阳性， 敏感性为100.0%（32/32）， 特异性为97.0%（32/33）。结论 ELISA法操作相对简单， 结果判定可标准化， 特异性和敏感性好， 可作为梅毒抗体检测较理想的方法， 适合大批量标本检测。TRUST法可作为梅毒筛查方法之一， 配合ELISA法使用， 特别适合作为临床观察效果的治疗指标。

【关键词】 梅毒螺旋体； 梅毒螺旋体特异性抗体明胶凝集试验；酶联免疫吸附试验；梅毒甲苯胺红不加热血清试验

DOI：10.14163/ki.11-5547/r.2015.18.053

梅毒是一种慢性性传播疾病， 具有高度危险性。该病可累及全身各组织、器官的损害， 甚至死亡， 也可以呈多年潜伏状态而无症状。梅毒螺旋体是引起人类梅毒的病原体， 梅毒患者是唯一传染源， 传染方式有母婴垂直传播、经血传播和性传播。目前检测梅毒的方法主要有病原学、血清学检测， 其中血清学检测又有多种不同的方法， 一类是非梅毒螺旋体抗原血清试验， 如TRUST；另一类是采用梅毒螺旋体抗原血清试验， 如TPPA、ELISA等[1]。本文就两种方法在梅毒检测中的比较进行探讨， 现报告如下。

1 材料与方法

1. 1 标本来源 本院2006年6月～2014年6月手术前和输血前筛查的1715例以及门诊内镜检查前的198例血清标本， 无性别年龄限制。

1. 2 标本采集 采集以上所有标本， 用普通试管， 清晨空腹采集， 1 h内分离血清， 严格避免溶血。

1. 3 仪器和试剂 使用仪器为上海科华酶标仪和洗板机。TPPA试剂盒为日本富士瑞必欧株式会社提供；ELISA试剂盒由上海科华生物工程股份有限公司提供；TRUST试剂盒由上海荣盛生物工程有限公司提供。

1. 4 方法 所有标本均使用TRUST和ELISA联合检测， 阳性结果采用TPPA法进行确认检测， 具体操作及结果判定均按试剂说明书严格执行。

1. 5 统计学方法 采用SPSS12.0统计学软件进行统计分析。计量资料以均数±标准差（ x-±s）表示， 采用t检验；计数资料以率（%）表示， 采用χ2检验。P

2 结果

2. 1 两种方法检测 1913例标本中， ELISA法阳性者33例， 阳性率为1.73%；TRUST法阳性者29例， 阳性率为1.52%。经χ2检验， 差异无统计学意义（P>0.05）。见表1。

表1 ELISA法和TRUST法检测结果比较（n， %）

方法 例数 阳性 阴性 阳性率

E LISA 1913 33 1880 1.73

TRUST 1913 29 1884 1.52

注：两种方法比较， P>0.05

2. 2 可疑阳性标本检测结果 可疑阳性结果共36例， 其中26例两种方法均为阳性， 7例为ELISA法检出阳性， 3例为TRUST法检出阳性。36例阳性结果经TPPA法检测证实， ELISA法单独检出的7例阳性有1例为假阳性， TRUST法单独检出的3例阳性均为假阳性， 经χ2检验， 三种检测方法比较差异无统计学意义（P>0.05）， 但ELISA法灵敏度和特异性均明显优于TRUST法。见表2。

表2 36例可疑标本的三种方法比较（n， %）

ELISA法 TRUST法 TPPA法

阳性（+） 33 29 32

阴性（-） 0 0 4

合计 33 29 36

敏感性 100.0 81.3 100.0

特异性 97.0 89.7 100.0

注：三种方法比较， P>0.05

3 讨论

机体感染梅毒螺旋体后可产生特异性抗螺旋体抗体（TP-Ab）和非特异性抗体。TP-Ab是诊断梅毒螺旋体感染的依据， TPPA法是将梅毒螺旋体Nichols株的精致菌体成分包被于明胶颗粒上， 此种致敏颗粒与被测标本中的抗TP抗体结合时可产生凝集反应， 此实验为梅毒螺旋体抗体的确诊试验。由表1和表2结果可知， 共检测1913例， 用TPPA法确诊32例为阳性。用TRUST法检出29例阳性， 其中26例确诊阳性， 3例为假阳性， 敏感性为81.3%（26/32）， 特异性为89.7%（26/29）。用ELISA法检出33例阳性， 其中32例确诊阳性， 1例为假阳性， 敏感性为100.0%（32/32）， 特异性为97.0%（32/33）。

可疑标本经确诊后， ELISA准确率为97.0%， 与TPPA法高度吻合， 而TRUST则检出假阳性率高。由于患者感染梅毒后非特异性的磷脂抗体出现晚于特异性螺旋体抗体， 而晚期梅毒及治疗后梅毒非特异性抗体可能转阴， 因此， TRUST可导致假阴性[2]。ELISA法则是利用基因重组过程合成抗原， 检测血清中梅毒特异性抗体， 在梅毒各期均有较高敏感性， 能够准确不漏检及较高避免假阴性的出现。另据报道， TRUST在Ⅰ期、Ⅱ期梅毒的检出率高达95%以上[3]， 而且TRUST法试剂价廉、操作方便快捷， 因此， ELISA法目前尚不能完全取代TRUST法， 而且TRUST法价廉快捷， 对Ⅰ期、Ⅱ期梅毒灵敏度也较好。因此实验室可同时采用两种方法进行梅毒的筛选， 可以相互补充且经济有效。

参考文献

[1] 中华人民共和国卫生部医政司.全国临床检验操作规程.第3版. 南京：东南大学出版社， 2006：647-650.

[2] 尚桂芳， 聂冬梅， 杨立新.两种梅毒检测试剂敏感性及特异性比较中国输血杂志， 2003， 16（6）：333-334.

[3] West B， walraven G， morison L， et al. Preformance of the rapid， plasma regain and rapid syphilis screening tests in the dragnosis of syphilis in the field conditions in rural Africa. Sex Transm Infect， 2002， 78（4）：282-285.

[收稿日期：2014-12-29]