学生油镜使用中常出现的问题及解决办法

【摘要】 作者根据多年实验教学中积累和总结的经验，针对学生在显微镜油镜使用中常出现的问题进行原因分析，为学生找到其解决办法，有效提高了学生使用油镜观察染色标本的效果和形态学教学质量，教育学生养成爱护仪器设备和一丝不苟的工作作风，并且减少了因操作不当对显微镜造成的损害，每年为学校节约维修开支约1万元。

【关键词】 实验教学；显微镜；油镜使用

我们在实验教学中发现学生常出现油镜使用方法上的错误，以致不能顺利找到物象，不仅影响了实验质量，而且使学生产生了畏难情绪，害怕使用油镜观察标本；不正确的操作方法会损坏显微镜的部件，造成显微镜维修成本提高。针对这些情况，我们根据多年教学积累和总结的实践经验，有的放矢指导学生，使他们学会正确熟练地使用油镜观察，提高了教学质量，同时也维护了显微镜，为学校节约了开支。现归纳常见的学生油镜使用问题，分析其原因，提出相应解决办法如下：

1 物镜各镜头识别错误，使用条件模糊

教师在实验前应加强学生显微镜操作使用的培训[1]，使学生掌握显微镜的基本结构、原理、各部件名称和作用，通过教师示范操作使他们先有一个感性认识；实验过程中通过督导和检查，严格要求来提高学生正确使用和维护显微镜的思想认识，通过反复操练来提高学生动手能力。

(1) 给学生讲明物镜三镜头的标识及使用条件：①低倍镜，其放大倍数是4或10（镜头上有标识“10/0.25”，其中10为放大倍数，0.25为数值孔径），镜头相对较短；其作用主要是用来对光，快速扫描标本以了解全貌，观察体积较大的有形物如虫卵。②高倍镜，放大倍数为20或40（镜头上有标识“40/0.65”），镜头较长；用来观察虫卵内部结构及细胞形态结构。③油镜，放大倍数为90或100（镜头上有标识“100/1.25”），有时标以“油”或“oil”，镜头最长；用来观察细胞内部结构及细菌等微生物（病毒除外）的形态结构。油镜使用时必须使用香柏油（因其折光率为1.515与玻璃折光率1.52近似，用油后增强视野亮度）或石蜡油（注意：除油镜头外，其他镜头不可用油）。坚决防止学生在使用低倍镜和高倍镜时用油。

(2) 强调显微镜使用技能对以后工作的重要性，同时将显微镜使用情况与实验考核成绩挂钩，使学生从思想上重视显微镜的使用。

(3) 重点讲解油镜使用的基本步骤并给学生示范操作一遍，接着学生操作，老师指导和评价。油镜使用步骤是：采光低倍镜对光低倍镜观察标本片全貌（确定油镜观察区域）标本片（正面）滴香柏油油镜头浸入油中（注意载物台运动方向与幅度，使用粗调节螺旋）调焦（使物像清晰，使用细调节螺旋，须仔细，注意技巧）观察二甲苯脱油（注意方法）收镜。将油镜使用的关键反复强调，要求学生牢记，接着在教师的指导下让学生自己进行操作，直到人人学会为止，下次实验又得检查学生是否真正掌握使用技能，经过反复训练才能正确掌握油镜使用的技能。油镜的正确熟练使用是以后顺利进行形态学检查的关键，也就是说“磨刀不误砍柴功”。

2 多人正确操作都观察不到物像

原因是油镜头坏了或里面少了滤光片（不能消除色差，视野呈蓝色），解决办法是更换油镜头或进行维修。

3 压坏玻片标本甚至镜头

有些同学在实验过程中将油镜头尖端部分压得缩了进去或将玻片压破，镜头被压坏。原因有二：①学生没有按照先低倍镜观察的习惯，而是一看显微镜即使用油镜，一般来讲，只要先从低倍镜看到物象，转到油镜下观察时，只要调节细调节螺旋即可；②学生因不了解镜头的工作距离及载物台的升降特点而盲目大幅度调螺旋所致。通常低倍镜工作距离较长，离玻片约1cm，油镜距离玻片最近，但不要压着玻片。教师在教学中应告诫同学要密切观察载物台升降，不能压着玻片（压着玻片时，哪一个镜头都观察不到物象），严格要求同学爱惜标本片及镜头，损坏要赔偿。油镜使用中浸油与调焦是关键步骤，也是难点，部分学生害怕压坏镜头而不敢使用，教育学生不要怕困难，其实只要掌握要领，耐心仔细就能解决问题。防止压坏玻片及镜头的办法是：眼睛从侧面观察，将油镜浸入油中适当深度，然后反方向粗调使镜头与玻片稍稍拉开（但不要离开油滴），一有模糊物象即改为细调调至物象清晰，一次不行，反复几次就能调好焦距，切不可急躁。

4 油镜视野模糊

原因可能是镜头没正对载物台，聚光器没有升至最高，光圈没有完全打开，反光镜所采光线角度不对（由低倍镜换为油镜时，原来对光的角度要适当调节），或者前次实验没有脱油。解决办法是观察学生的操作，指导他们一一检查排除故障。注意不要一有问题就直接给学生答案，而是先让学生自己找毛病，想办法，学生确实有困难，老师再提示或者帮助调试显微镜。否则，下次学生遇到类似问题又束手无策。

5 使用油镜时不滴油，或滴了香柏油但油镜头悬空

学生常常抱怨视野很暗，或者物象模糊，原因是没有理解和发挥油的作用（即油镜工作原理）。油镜利用香柏油来增强光亮及清晰度，必须使油镜头浸入油中，使进入油镜的光线增多，视野光亮度增强，才能使物象清晰。解决办法是正确将镜头浸入油层中。

6 滴油太多

有些同学认为油滴得越多越好，将标本片涂得到处是油，这样反而对观察不利，同时增加脱油难度，污染载物台，浪费资源。解决办法是只在要观察的部位中央滴一滴香柏油即可（不需要用棍棒摊开，因油镜头接触油时油自然会散开）。

7 弄错标本片正反面

别人的标本能观察得到，自己的标本观察不了，或者在低倍镜下能看到，一转油镜找不到物象，原因多是标本正反面弄错了或玻片太厚而调不到焦距。解决办法是仔细观察标本片的两面，识别出正面，在正面上滴油；太厚的玻片则应更换薄一点的重新制作标本片。

8 忘记脱油或脱油方法错误

油镜观察完毕，应先通过粗调节螺旋将镜头从标本片表面移开，然后取下标本片，再分别对镜头和标本片脱油。部分学生忘记给镜头和标本片脱油，或者脱油方法错误，或者敷衍了事。脱油对保护油镜很重要，学生常常抱怨油镜模糊或者发现镜头上油渍斑斑，往往就是前面的使用者没有尽责脱好油的缘故。脱油方法很重要，镜头正确的脱油方法为用擦镜纸蘸少许二甲苯沿镜头直径方向轻轻擦拭镜头（不能来回擦，也不能绕圆周擦，注意不能用已擦过镜头的脏面再擦镜头），再用干净的擦镜纸擦去镜头上残存的二甲苯（防止二甲苯损伤油镜头）。标本片的正确脱油方法是往油滴部位滴一滴二甲苯，然后用两片擦镜纸轻压标本片再掀掉弃去擦镜纸，或者用两片擦镜纸覆盖在油滴上，再滴二甲苯，轻压标本片再掀掉弃去擦镜纸，必要时再脱一次油直到标本片表面光洁无油为止（脱油要点为动作轻并达到去油效果）。注意，标本片若没有脱油干净，容易粘灰尘使以后观察模糊，同时不利于标本保存。学生常常用大量二甲苯去洗标本片上的油污，甚至用擦镜纸使劲去擦，结果前者既浪费二甲苯又造成环境污染，对人体造成危害，后者常常将标本片损坏。解决脱油问题的办法是多提醒，多检查，老师作好示范。

点滴经验，但愿能对广大学子有很好的帮助。

参考文献

[1] 吴庚利，解颖馨，周伊等.如何保持学生显微镜的良好性能 [J].医学信息学,2007,20（7）:1146－1147

[2] 桂重阳，男，湖南祁阳人，讲师，大学本科，免疫学硕士，主要从事免疫学及血液学检验的临床应用研究

收稿日期：2008-03-01