香芪生乳合剂质量标准研究

[摘要]目的 建立香芪生乳合剂的质量标准。方法 采用薄层色谱法（TLC）对香芪生乳合剂中主要药味进行薄层色谱定性鉴别，采用高效液相色谱法（HPLC）测定制剂中芍药苷的含量。结果 TLC可对制剂中当归、川芎、白芍、木香、黄芪等药材进行鉴别，斑点清晰，方法简单易行，专属性好。HPLC检测结果显示，芍药苷最佳检测波长为231 nm，21.1～421.5 μg/ml范围内线性关系良好，平均回收率为98.6%，RSD为1.7%。结论 该研究方法简单、准确、重复性好、专属性强，可用于香芪生乳合剂的质量控制。

[关键词]香芪生乳合剂；芍药苷；质量标准；薄层色谱法；高效液相色谱法

[中图分类号] R943 [文献标识码] A [文章编号] 1674-4721（2016）10（c）-0008-05

[Abstract]Objective To establish the quality standard of Xiangqi Shengru Mixture.Methods Identification of main herbal medicines in Xiangqi Shengru Mixture were performed by TLC.The main effective component of paeoniflorin was determined by HPLC.Results Identification of Angelicae Sinensis Radix，Chuanxiong Rhizoma， Radix Paeoniae Alba，Aucklandiae Radix and Astragali Radix and so on was established by TLC.The method was simple，the spots were clear with highly specific attribute.HPLC detection results showed that the best detection wavelength was 231 nm，the linear range of the paeoniflorin was 21.1～421.5 μg/ml，the range of the spotting recovery rate was 98.6%，and RSD was 1.7%.Conclusion The method can be used for the quality control of Xiangqi Shengru Mixture，and it is simple，accurate with good repeatability and specificity.

[Key words]Xiangqi Shengru Mixture；Paeoniflorin；Quality standard；TLC；HPLC

香芪生乳合剂是由白芍、当归、通草、川芎、木香、黄芪等12味药材制成的中药复方制剂，有益气养血、通经下乳的作用，用于产后气血亏损，乳汁不足。方中白芍、当归养血调经、补血和血；川芎、木香行气、止痛，黄芪益气、固脱，诸药合用起到益气养血、通经下乳的作用。该制剂为湖南省妇幼保健院医院制剂，年产值200余万元，临床疗效确切。为更好地控制该制剂质量，参照文献报道相关研究方法[1-7]，本研究采用薄层色谱法（TLC）建立当归、川芎、白芍、木香、黄芪等药材的定性鉴别方法；采用高效液相色谱法（HPLC）建立处方中主要有效成分芍药苷的含量测定方法。

1材料与方法

1.1仪器与试药

电子分析天平（德国，Mettler Toledo XS205型，精度为0.1 mg），超声清洗器（上海科导，HS-2060），高效液相色谱仪（日本岛津，LC-20A型），二极管阵列检测器（日本岛津，SPD-M20A），柱温箱（日本岛津，CTO-10AS）。

0.22 μm微孔滤膜（美国，密理博），薄层层析硅胶（中国青岛海洋化工集团公司），水（娃哈哈纯净水），乙腈（美国，Tedia，色谱纯），其他常用试剂均为分析纯。对照品及对照药材均由中国药品生物制品检定所提供，详细情况如下：当归对照药材（批号：120927～201014，供鉴别用），川芎对照药材（批号：120918～200809，供鉴别用），芍药苷对照品（批号：110736～200833，供含量测定用），木香对照药材（批号：120921～200607，供鉴别用），去氢木香内酯对照品（批号：111525～201008，供含量测定用），黄芪甲苷对照品（批号：110781～200613，供含量测定用）。香芪生乳合剂由湖南省妇幼保健院药学部制剂室提供样品（批号：150828， 151210）。

1.2当归、川芎的鉴别

取香芪生乳合剂（批号：150828，151210）20 ml，每次用乙酸乙酯20 ml振摇提取2次，过滤，取滤液蒸干，加乙酸乙酯1.0 ml溶解，即得供试品溶液。另分取当归对照药材0.5 g和川芎对照药材0.5 g，分别加20 ml乙酸乙酯，超声20 min，过滤，取滤液蒸干，加乙酸乙酯1.0 ml溶解，即得对照药材溶液。阴性对照溶液的制备：按处方称取除当归和川芎的其他药材，制成阴性对照样品。按《中国药典》2015年版TLC试验[8]，取上述四种溶液各10 μl，点于薄层板上，展开剂：环己烷∶乙酸乙酯（9∶1），展开10 cm，取出，晾干，置365 nm紫外光灯下检视，拍照记录。

1.3白芍的鉴别

取香芪生乳合剂（批号：150828，151210）50 ml，用30 ml水饱和的正丁醇振摇提取2次，过滤，取滤液，用15 ml氨试液洗涤2次，弃去洗液，再用以20 ml正丁醇饱和的水洗涤2次，弃去洗液，取正丁醇液蒸干，残渣加甲醇1.0 ml溶解，即得供试品溶液。另取称取芍药苷对照品0.5 mg，加甲醇1.0 ml溶解，即得对照品溶液。阴性对照溶液的制备：按处方取除白芍的其他药材，制成缺白芍的阴性。按《中国药典》2015年版TLC试验[8]，吸取上述三种溶液各10 μl，点于薄层板上，展开剂：三氯甲烷∶乙酸乙酯∶甲醇∶甲酸（40∶5∶10∶0.2），展开10 cm，取出晾干，喷5%香草醛硫酸溶液显色，105℃加热至斑点清晰，拍照记录。

2.5.7样品的测定 计算得到150828、151210、160130三批次香芪生乳合剂中芍药苷的含量分别为0.546、0.591、0.564 mg/ml。

3讨论

TLC利用不同成分对吸附剂吸附能力得不同，在展开剂流吸附剂的过程中，连续的产生吸附、解吸附的循环，达到不同成分分离的目的，是现阶段中药复方制剂中药味鉴别最常用的方法。HPLC是以经典的液相色谱为基础，在高压下的液体为流动相的色谱过程，一般配备高灵敏度的检测器，具有高效的特征，通过与标准物质对照能对复方制剂中的有效成分进行含量测定。香芪生乳合剂中当归、川芎、白芍、黄芪、木香诸药合用起到益气养血、通经下乳的作用[9-13]，基于此，本研究采用TLC法对制剂中的这些药材进行鉴别。当归和川芎有效成分相近，都含稿本内酯、阿魏酸等成分，《中国药典》2015年版中红药贴膏、妇科调经片等多种制剂中当归和川芎都采用TLC同时鉴别，故本研究采用TLC法对当归和川芎同时鉴别。白芍在处方中为君药，且芍药苷为白芍的主要有效成分，含量较高，故选择其作为含量测定的指标。

根据《中国药典》2010年版一部及相关文献报道芍药苷在230 nm 波长处有最大吸收[14-18]，通过在200～400 nm 波长范围内扫描芍药苷对照品溶液和供试品溶液，结果在231 nm波长处有最大吸收，故选择231 nm为检测波长。

从三批次检测结果看，该制剂生产工艺稳定，质量可靠。该研究方法简单易行、可操作性强、准确、稳定、可靠，可作为香芪生乳合剂的质量控制方法，为该制剂的进一步开发提供科学依据。

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