特发性血小板减少性紫癜患者外周血Treg细胞及相关细胞因子检测的临床意义

【摘要】 目的：检测特发性血小板减少性紫癜（ITP）患者外周血中CD4+ 、CD25+调节性T （ Treg ） 细胞的比例及相关细胞因子水平的变化，探讨其在ITP发病中的作用。方法：依据临床诊断标准，检测22 例健康人、35 例初诊ITP 患者的外周血标本，流式细胞学方法检测各组CD4+ CD25highTreg 细胞和CD4+ CD25+CD127dimTreg 细胞的表达水平，酶联免疫吸附试验（ ELISA） 检测Treg 细胞分泌的细胞因子IL-10、IL-2、TNF-a、IFN-γ的表达水平。结果：初诊ITP 患者CD4+ CD25highTreg 细胞、CD4+ CD25+ CD127dimTreg细胞比例明显低于正常对照组（ P< 0. 01）， ITP 患者血清IL-2、TNF-α 及IFN-γ 水平明显高于正常对照组（P < 0.01） ； 血清IL-10 水平明显低于正常对照组（P< 0.01） 。 结论：调节性T （ Treg ） 细胞表达异常是特发性血小板减少性紫癜发病机制的重要环节，对ITP 患者应定期观察其血液中IL、TNF-α 和IFN-γ 水平变化，以判断其病情变化、疗效观察。

【关键词】 特发性血小板减少性紫癜； 调节性T 细胞； 白细胞介素； 肿瘤坏死因子-α

特发性血小板减少性紫癜（idiopathic thrombocy topenicpurura，ITP） 是一种儿童及青年女性常见的免疫性血小板破坏过多造成的一组疾病。引发ITP 的原因 涉及免疫、遗传、环境等多方面因素。近年来发现，调节性T 细胞（ Treg ） 能够维持外周免疫耐受， 其数量减少和免疫抑制功能减弱可能导致ITP 患者的免疫调节功能紊乱 [1] 。CD4、CD25 和CD127 联合标记可以准确鉴定Treg 细胞，同时检测ITP 患者外周血中白细胞介素（IL） 、肿瘤坏死因子-α（ tumor necrosis factor-α，TNF-α） 与γ-干扰素（ interferonγ，TFN-γ） 水平的变化，为研究ITP的病因及临床治疗提供依据。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取2009 年7 月-2011 年8 月郑州大学附属郑州市中心医院与郑州大学第一附属医院门诊和住院治疗诊断明确的ITP 患者35 例（ 按照《血液病诊断及疗效标准》确诊[2]）。其中男11 例， 女24 例， 年龄18～63岁，平均36.5岁；对照组为健康体检者22 例， 各项指标正常，无感染性疾病、肿瘤、自身免疫性疾病等疾患， 男10例， 女12例， 年龄17～62岁，平均35.2岁。

1.4 统计学处理 应用SPSS 13.0软件， 检验两组数据符合正态分布且方差齐后采用t 检验， 不符合则采用非参数检验，多组间均值比较采用单因素方差分析。P< 0.05表示差异有统计学意义。

2 结果

3 讨伦

ITP是一种自身免疫性疾病，因血小板免疫性破坏而引起外周血中血小板水平下降的出血性疾病。过去对ITP的发病机制的研究主要认为是与感染，免疫因素，遗传及肝脾的作用等因素相关，尤以免疫因素关系最为密切[3-4]。

目前研究表明，调节性T淋巴细胞（Treg 细胞）与ITP密切相关， 其数量减少、免疫抑制功能的减弱可能是导致ITP 患者免疫调节机制紊乱的一个重要机制。Treg 细胞是一个成熟的CD4+ T 细胞亚群， CD4 + CD25 + Treg 细胞对细胞免疫和体液免疫反应均能抑制，主要是对致敏过程产生的效应性T 细胞有较强的免疫抑制作用，这种抑制作用随着CD4 + CD25+ Treg 细胞数量增加而增强，为维持体内效应性T 细胞和外周免疫耐受发挥重要作用。本实验检测结果显示，初诊ITP 患者CD4+ CD25highT 细胞和CD4+ CD25+ CD127dim T 细胞占CD4+ T 细胞比例明显低于正常对照人群，说明Treg 细胞在维持外周免疫耐受中发挥重要作用， 其数量减少可能是ITP 发病的一个重要机制，差异具有统计学意义。近年研究认为，炎性介质和细胞因子参与了ITP 的发病过程。本研究结果表明，ITP 患者血清IL-2、TNF-α、IFN-γ 水平明显增高（P< 0.01） ，而血清IL-10 水平明显降低（P< 0.01） 引起Th1 型细胞反应，进一步诱导巨噬细胞激活，补体形成和细胞毒细胞活性增加，最终导致巨核细胞及血小板的破坏。ITP 患者血清TNF-α 明显升高（P

由此可见， ITP作为一种自身免疫性疾病，存在多种细胞相关细胞因子的异常[5]，临床上对ITP 患者定期观察其血液中IL-2、IL-4、IL-6、IL-10、TNF-α 及IFN-γ 等细胞因子水平的变化，对于判断其病情的变化，治疗效果及其预后具有重要意义。

参考文献

[1] Liu B， Zhao H， Poo n MC， et al. Abnormality of CD4+CD25+ r egulator y T cells in idio pat hic thr ombo cy to penic idio pa thic thrombocyt openic pur pur a[J] . Eur J Haematol， 2007， 78（2） ： 139-143.

[2] 张之南，沈悌. 血液病诊断及疗效标准[M]. 第2版. 北京：科学出版社，1999：245-250.

[3] 陆再英，钟南山.内科学[M].第7版.北京：人民卫生出版社，2008：648-651.

[4] 陈灏珠.实用内科学[M].第12版.北京：人民卫生出版社，2005：2436-2444.

[5] Guo C，Chu X，Shi Y， et al. Correction of Th1-dominant cytokine profiles by high-dose dexamethasone inpatients with chronic idiopathic thrombocytopenicpurpura[J]. J Clin Immunol， 2007， 27（6） ： 557-562.

（收稿日期：2012-11-29） （本文编辑：车艳）