RP—HPLC在烟用香精香料绿原酸、异构体测定中的应用

摘 要 文章通过建立RP-HPLC反相高效液相色谱法，对烟用香精香料中的绿原酸及其异构体的分析测定原理过程进行分析，并结合该方法进行烟用香精香料绿原酸及其异构体测定中的应用情况，对于RP-HPLC在烟用香精香料绿原酸及其异构体测定中的应用进行分析论述。

关键词 RP-HPLC；烟用香精香料；绿原酸；异构体

中图分类号：TS4 文献标识码：A 文章编号：1671-7597（2013）16-0087-01

绿原酸是一种主要存在于忍冬科忍冬属的菊科嵩属植物中的化学聚酯物，它主要是由咖啡酸和奎尼酸形成的酸酯，分子结构包含有酯键以及不饱和双键、多元酚等不稳定分子结构部分，此外，绿原酸分子结构中还包含有两个位置异构体，也就是新绿原酸以及隐绿原酸。在烟草植物中，由于植物中所含的绿原酸本身具有能够使人感到愉快的香气，而且能够使得烟草植物在燃烧过程中产生酸性物质，与烟草中的一部分碱性进行中和，使得烟草的味道比较醇和；同时，从另一方面来看，烟草植物中所含绿原酸在经过氧化偶合后形成一种聚合多醌，致使烟草的叶子颜色逐渐发生加深变化，烟草中酚羟基数量减少，烟草的相对涩性出现减弱变化，而绿原酸氧化偶合后形成的聚合多醌在与氨基酸能进行非酶棕色化反应后，最终形成吡嗪、吡咯以及吡啶等性质类型的物质，这种性质类型的物质能够使烟草具有坚果香、面包香或者是焙烤香等。根据烟草植物中所含绿原酸的这一性能特征，在进行卷烟生产过程中，通过进行含有绿原酸的香精、香料添加，就成为卷烟生产中，提高卷烟品质的一种有效生产方法，而进行烟用香精、香料绿原酸及其异构体的测定，则是针对上述情况，保证卷烟生产质量的关键。

1 RP-HPLC测定烟用香精香料绿原酸及其异构体

对RP-HPLC进行烟用香精香料绿原酸及其异构体测定方法与具体过程的分析，主要通过建立RP-HPLC反相高效液相色谱法，通过实验对于多个烟用香精香料样品中的绿原酸以及新绿原酸、隐绿原酸两种异构体进行检测，对于检测结果进行分析讨论，以实现应用RP-HPLC进行烟用香精香料中绿原酸及其异构体的检测分析。

1.1 检测实验所需的材料与仪器设备

RP-HPLC进行烟用香精香料绿原酸及其异构体测定实验材料主要包括甲醇以及甲酸，实验中需要进行测定的9种烟用香精香料样品，其中，进行实验测定的9种烟用香精香料样品是由某大型烟草企业提供。实验中进行测定的绿原酸以及新绿原酸、隐绿原酸标准样品的纯度均在95%以上。

进行烟用香精香料绿原酸及其异构体测定实验中，应用的反相高效液相色谱检测仪器中使用的主要是Waters液相色谱系统，并且系统中专门配备有紫外检测器以及温度控制单元与功能。此外，测定实验中还用到了振荡器以及电子天平、超纯水处理仪、有机滤膜过滤器等仪器设备，这些实验应用仪器设备均是由相应生产厂家提供的合格仪器设备。

1.2 对于检测样品的处理和分析

对于检测实验中应用的样品材料处理方法如下，首先，在称取一定量的试样后，放置在特定容量的容量瓶内，并加入一定的甲醇进行定容；然后，对于粉状、浸膏类或者是其他具有沉淀成分的香精以及香原料，在室温环境下井振荡作用后静置一定时间，并取适量的萃取液，应用上述的有机滤膜过滤器进行过滤后，装入到样品瓶中，进行HPLC分析；最后，对于上述定容后的香精香料溶液直接取与上相同量的萃取液，使用有机滤膜过滤器进行过滤后，将过滤溶液放入到样品瓶中，进行HPLC分析。

此外，在应用RP-HPLC方法进行烟用香精香料中绿原酸及其异构体的测定实验中，测定应用色谱仪器需要满足以下条件，首先，色谱柱的柱温为30度，测定实验过程中，流动相A是0.1%的甲酸水溶液，而流动相B是乙腈，实验过程中流动相的具体洗脱梯度要按照相关要求和标准进行，实验测定过程中，进样量应控制在10 ?L，而色谱仪器的检测波长为325 nm，检测过程中应用比较标样保留时间的方法对于检测样品进行定性，同时应用外标法进行检测样品定量。

1.3 实验样品绿原酸及其异构体的测定结果分析

根据上述实验条件以及方法，在对于9种实验样品中的绿原酸及其异构体进行实验测定后，如表1所示，为具体测定结果。

上表中，N.D.表示的是实验样品的所需结果未检测出。

2 烟用香精香料绿原酸及其异构体RP-HPLC测定应用

根据上述通过应用RP-HPLC方法建立香精香料溶液中绿原酸及其异构体的测定方法与实验过程，可以看出，应用RP-HPLC方法进行香精香料中绿原酸及其异构体的测定应用，不仅测定操作比较简便，并且检测过程中灵敏度比较高、适应性比较广，具有较大的应用优势和价值。

3 结束语

总之，RP-HPLC进行烟用香精香料中绿原酸及其异构体的测定，具有较为突出的测定作用优势，对其在烟用香精香料绿原酸及其异构体测定中的应用进行分析，有利于该方法的推广应用。

参考文献

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