子痫前期患者胎盘组织中HSP70和NF―κB的表达及意义

[摘要] 目的 探讨子痫前期患者胎盘组织中HSP70和NF-κB的表达差异及意义。 方法 选取2013年12月～2015年1月在福建医科大学附属福州市第一医院住院分娩的65例孕妇为研究对象，其中正常妊娠25例（正常妊娠组），轻度子痫前期17例（轻度子痫前期组），重度子痫前期23例（重度子痫前期组）。采用免疫组化法及实时荧光定量PCR检测孕妇胎盘HSP70和NF-κB的表达，并分析HSP70与NF-κB的相关性。 结果 免疫组化结果提示：HSP70及NF-κB在正常妊娠组、轻度子痫前期组及重度子痫前期组患者胎盘组织中的染色程度依次增高，轻度及重度子痫前期组HSP70及NF-κB阳性表达率与正常妊娠组比较差异有高度统计学意义（P < 0.01），但轻度及重度子痫前期组之间差异无统计学意义（P > 0.05）；实时荧光定量PCR结果提示：与正常妊娠组比较，HSP70及NF-κB在轻度子痫前期组及轻度子痫前期组中的表达水平增高，轻度子痫前期组及重度子痫前期组与正常妊娠组两两比较差异有高度统计学意义（P < 0.01）。相关性分析结果显示，HSP70与NF-κB呈正相关（r = 0.692，P < 0.01）。 结论 子痫前期患者胎盘组织中HSP70和NF-κB表达增加，可能与子痫前期的发生、发展有关。

[关键词] 子痫前期；胎盘组织；热休克蛋白70；核因子-κB

[中图分类号] R714.246 [文献标识码] A [文章编号] 1673-7210（2016）01（b）-0061-04

[Abstract] Objective To investigate the difference and significance between the expression of HSP70 and NF-κB in the placenta tissues of normal pregnancy and preeclampsia patients， in order to find out the relation between HSP70 and NF-κB. Methods From December 2013 to January 2015， 65 pregnant patients in the First Affiliated Hospital of Fujian Medical University were selected. There were 25 healthy pregnant women （normal pregnant group）， 17 mild preeclampsia patients （mild preeclampsia group） and 23 severe preeclampsia patients （severe preeclampsia group）. The expressions of HSP70 and NF-κB in the placental tissues were measured using immunohistochemistry methods and real-time fluorescence quantitative PCR technique. Results HSP70 and NF-κB immunohistochemical results suggested that the staining degree of the normal pregnant group， the mild and severe preeclampsia group increased gradually. The differences of the expressions of HSP70 and NF-κB between the mild， severe preeclampsia group and the normal pregnant group were significant （P < 0.01）， while there was no statistical difference between the mild preeclampsia group and the severe preeclampsia group （P > 0.05）； the results of HSP70 and NF-κB real-time fluorescence quantitative PCR suggested that， the level of the expression increased in mild preeclampsia group and severe preeclampsia group， as compared with the normal pregnant group， the difference between the mild preeclampsia group， severe preeclampsia group and the normal pregnant group was statistically significant （P < 0.01）. The results of correlation analysis showed that， the expression of HSP70 was positively correlated with NF-κB （r = 0.692， P < 0.01）. Conclusion The expression of HSP70 and NF-κB increases in placental tissues of patients with preeclampsia， and may be associated with the occurrence and development of preeclampsia.

2.2.2 HSP70 mRNA与NF-κB p65 mRNA相关性分析 HSP70 mRNA的表达与NF-κB p65 mRNA的表达呈正相关（r = 0.692，P < 0.01）。

3 讨论

HSP是指热休克反应中转录合成的一组蛋白，在各种不利于自身的因素刺激下，均可诱导细胞快速翻译合成，启动内源性保护机制，维持机体内环境的稳定，发挥抗损伤的应激保护效应[8-9]。根据其分子量大小的不同，HSP可分为：HSP27及泛素、HSP60家族、HSP70家族、HSP90家族和HSP110家族[10]，其中HSP70是最保守、含量最丰富的一类，可诱导性最强。人类发生应激时主要合成HSP70。子痫前期胎盘缺血缺氧，导致生成的活性氧增加，促进多种细胞因子的释放，导致各种蛋白质变性损伤，激活热休克反应[11]。此时，HSP70作为分子伴侣，可保护多肽的结构和功能。HSP70的内源性保护机制可能是：①稳定细胞膜：HSP70可与细胞质膜结合，稳定质膜，维持细胞结构、功能的正常。②抗氧化作用：通过抑制NADPH氧化酶的功能，减少氧自基的产生，同时促进内源性过氧化酶的表达，清除氧自由基，对抗氧化应激，保护细胞[12]。③增加正常蛋白的合成：HSP70与ATP高度亲和，水解ATP所释放的能量能帮助细胞合成正常的蛋白，促进蛋白损伤的修复，清除变性、无法修复的蛋白，恢复受损核仁的结构[13-14]。④分子伴侣：HSP70有助于蛋白质的正确折叠。⑤抑制凋亡：HSP70可直接抑制促细胞凋亡蛋白的功能，从而抑制细胞凋亡[15]，减轻子痫前期时器官损伤。但是HSP70的表达增加并不能完全阻止子痫前期病情的发生和进展，Shall等[16]研究发现妊娠期高血压疾病患者胎盘细胞HSP70的过度表达并不能提高其抗凋亡能力，反而造成细胞线粒体通透性增加，加速细胞凋亡。

NF-κB是一种转录因子，普遍存在于各种类型的组织和细胞，在细胞受到刺激时可被诱导激活，继而激活多种重要前炎症因子，使之转录活化。有活性的NF-κB以二聚体形式存在，最常见的是p50和p65的异二聚体。测定NF-κB p65的表达可代表NF-κB的活化程度。在炎症和氧化应激的刺激下NF-κB活化，活化的NF-κB可使表皮生长因子、血小板生长因子等生长因子高表达，传递引起平滑肌细胞增殖、血管重建的膜内信号，从而使细小动脉胶原纤维、管壁厚度、平均动脉压增加，导致高血压、蛋白尿等一系列子痫前期的症状[17-20]。有研究亦发现重度子痫前期患者胎盘组织中NF-κB表达增加[21-22]。

本研究结果显示，HSP70、NF-κB在子痫前期胎盘组织中具有相关性，呈正相关改变，提示两者均参与了子痫前期的发生、发展。HSP70作为子痫前期的内源性保护分子之一，NF-κB作为子痫前期级联反应的重要信号转导因子，可研究如何从基因角度上抑制NF-κB的激活及有效地诱导HSP70生成，作为子痫前期预防和治疗的新手段，这也将为临床提供不同的治疗思路及途径。

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（收稿日期：2015-10-18 本文编辑：任 念）