时间：2022-10-17 01:20:35
[摘要] 目的 考察血通胶囊与阿托伐他汀联合用药对ApoE-/-小鼠的调血脂作用。 方法 将125只6周龄雄性ApoE-/-小鼠依据随机数字表法分为空白对照组、ApoE-/-模型组、阿托伐他汀组、血滞通组、血滞通+阿托伐他汀组，每组25只。ApoE-/-模型组和药物处理组小鼠均给予高脂饲料喂养，空白对照组小鼠给予普通饲料喂养。药物处理组小鼠每日灌胃给药，空白对照组和ApoE-/-模型组小鼠则灌胃等体积的生理盐水。给药2、4、6、8、10周时分别测定血清三酰甘油（TG）、总胆固醇（TC）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）水平。 结果 给药2、4、6、8、10周后，与空白对照组比较，ApoE-/-模型组小鼠血清中TG、TC、LDL-C均显著升高（P < 0.05或P < 0.01），HDL-C显著下降（P < 0.05或P < 0.01）；与模型组比较，血滞通组小鼠血清HDL-C水平显著升高（P < 0.05或P < 0.01），TG、TC、LDL-C水平降低（P < 0.05或P < 0.01）；与阿托伐他汀组比较，血滞通+阿托伐他汀组HDL-C水平显著升高（P < 0.05或P < 0.01），TG、TC和LDL-C水平显著降低（P < 0.05或P < 0.01）。 结论 血滞通胶囊具有调血脂作用，且血滞通与阿托伐他汀联合应用效果优于阿托伐他汀单用。
[关键词] 血滞通；阿托伐他汀；高脂血症；ApoE-/-小鼠
[中图分类号] R589.2 [文献标识码] A [文章编号] 1673-7210（2017）03（a）-0012-05
Blood lipid regulation effects of Xuezhitong Capsules combined with Atorvastatin in ApoE-/- mice
LI Xinyue1 WU Yongmei1 LIANG Wei2 ZHOU Yuting3 TANG Shimin1 SUN Guibo4 SUN Xiaobo4
1.College of Pharmacy， Changchun University of Chinese Medicine， Jilin Province， Changchun 130117， China； 2.Dongfang Pharmaceutical Co. Ltd.， Jilin Province， Changchun 130103， China； 3.College of Biological Science and Engineering， Beifang University of Nationalities， Ningxia Hui Autonomous Region， Yinchuan 750021， China； 4.Institute of Medicinal Plant Development， Chinese Academy of Medical Sciences and Peking Union Medical College， Beijing 100193， China
[Abstract] Objective To study the blood lipid regulation effects of Xuezhitong Capsules combined with Atorvastatin in ApoE-/- mice. Methods One hundred and twenty-five male ApoE-/- mice aged six weeks old were divided into control group， ApoE-/- model group， Atorvastatin group， Xuezhitong group and Xuezhitong+Atorvastatin group by random number table method， with 25 mice in each group. The mice of ApoE-/- model group and drug treatment groups were fed with high fat diet， while the mice of control group were fed with normal diet. The mice of drug treatment groups were given the corresponding drugs， the control group and ApoE-/- model group were given equivalent volume of normal saline. After drug administration for 2， 4， 6， 8， 10 weeks， the levels of serum total cholesterol （TC）， triglyceride （TG）， high density lipoprotein cholesterol （HDL-C） and low density lipoprotein cholesterol （LDL-C） were detected. Results After drug administration for 2， 4， 6， 8， 10 weeks， compared with those of control group， the levels of TG， TC and LDL-C in ApoE-/- model group were increased significantly （P < 0.05 or P < 0.01）， the level of HDL-C was decreased significantly （P < 0.05 or P < 0.01）. Compared with those of model group， the level of HDL-C in Xuezhitong group was increased （P < 0.05 or P < 0.01）， and the levels of TG， TC and LDL-C were decreased significantly （P < 0.05 or P < 0.01）. Compared with those of Atorvastatin group， the level of HDL-C in Xuezhitong+Atorvastatin group was increased significantly （P < 0.05 or P < 0.01）， and the levels of TG， TC and LDL-C were decreased significantly （P < 0.05 or P < 0.01）. Conclusion Xuezhitong can regulate the blood lipid effectively， and the combined effect of Xuezhitong and Atorvastatin is better than that of Atorvastatin alone.
[Key words] Xuezhitong； Atorvastatin； Hyperlipemia； ApoE-/- mice
相关流行病学研究显示，中国成人血脂异常发生率约为18.6%[1]，且逐年增高，并呈年轻化趋势[2]。高脂血症是指脂代谢异常，导致血清三酰甘油（TG）和/或总胆固醇（TC）和/或低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）水平过高和/或高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）水平过低的代谢紊乱性疾病[3]。高脂血症为常见的多发性疾病，与糖尿病、肥胖、脂肪肝、高血压病、动脉粥样硬化等疾病的形成密切相关[4]，因此高脂血症的预防对控制心脑血管疾病的发生有重大意义[5]。西药治疗高脂血症个体针对性较差，药理作用靶点较为单一，治疗主要以缓解症状为主，需长期维持治疗[6-7]。目前常用的降脂药物为贝特类与他汀类药物，但两者均具有一定的肝肾毒性[8-9]。调脂药物的开发和新靶点的发现已成为全球关注的热点，我国调脂药物的市场也以每年10%～30%的速度持续增长，特别是中药市场[10]。血滞通胶囊是以薤白为原料的单方制剂，薤白榘俸峡拼惺糁参镄「蒜Allium macrostemon Bge.或薤Allium chinense G. Don的干燥鳞茎[11]，可通阳散结，行气导滞。现代药理学研究表明，薤白可用于预防及治疗心绞痛、心肌梗死、动脉粥样硬化等心血管疾病[12]。ApoE-/-小鼠给予高脂饲料喂养，在数周内可形成高脂血症的典型病变，可用于防治高脂血症药物的筛选。本研究以高脂饲料喂养ApoE-/-小鼠高脂血症模型血脂水平变化为考察指标，考察血滞通胶囊和阿托伐他汀合用和单用分别对其的影响。
1 材料与方法
1.1 实验动物
6周龄雄性ApoE-/-小鼠125只，体重18～20 g，SPF级，由北京维通利华实验动物公司提供，动物合格证编号为SCXK（京）2012-0001。分笼饲养，自由饮水，普通饲料喂养，温度（24±2）℃，湿度（50±5）%。
1.2 仪器与试剂
AL104-IC电子天平，Mettler Toledo公司；M1000酶标仪，Tecan公司。血滞通胶囊（内容物为淡棕黄色颗粒或粉末，有蒜臭，味微辣，由吉林省东方制药有限公司，产品批号：20160402）；阿托伐他汀钙片（购于辉瑞制药有限公司，生产批号：M90502）；小鼠HDL-C酶联免疫吸附法（ELISA）试剂盒（货号：EXP210621，批号：201605）、小鼠LDL-C ELISA试剂盒（货号：EXP 210622，批号：201605）、小鼠TC ELISA试剂盒（货号：EXP210602，批号：201605）、小鼠TG ELISA试剂盒（货号：EXP210617，批号：201605）购自北京易科拜德科技有限公司。
1.3 动物分组及给药
125只ApoE-/-小鼠，适应性饲养1周后采用随机数字表法将其分为5组，每组25只。空白对照组：普通饲料喂养；ApoE-/-模型组：高脂饲料喂养；阿托伐他汀组：阿托伐他汀钙（6 mg/kg）灌胃给药，给予高脂饲料喂养；血滞通组：血滞通（800 mg/kg）灌胃给药，给予高脂饲料喂养；血滞通+阿托伐他汀组：阿托伐他汀钙（6 mg/kg）灌胃给药，血滞通（800 mg/kg）灌胃给药，给予高脂饲料喂养。药物处理组小鼠每日灌胃给药，空白对照组和模型组小鼠则灌胃等体积的生理盐水。
1.4 血脂测定
于给药2、4、6、8、10周时取小鼠（n = 5），禁食12 h，腹主动脉取血，分离血清，ELISA试剂盒测定血清TG、TC、LDL-C和HDL-C。
1.5 统计学方法
利用SPSS 13.0统计软件进行统计分析。计量资料以均数±标准差（x±s）表示，采用非配对的t检验和One-way ANOVA进行统计分析，以P < 0.05为差异有统计学意义。
2 结果
2.1 血滞通胶囊给药2周后各组血脂水平比较
血滞通胶囊给药2周后，与空白对照组比较，模型组小鼠血清中TG、TC、LDL-C均显著升高（P < 0.05），HDL-C显著下降（P < 0.05）。见图1。
2.2 血滞通胶囊给药4周后各组血脂水平比较
血滞通胶囊给药4周后，与空白对照组比较，ApoE-/-模型组小鼠血清中TG、TC、LDL-C均显著升高（P < 0.05），HDL-C水平显著下降（P < 0.05）。与血滞通组比较，血滞通+阿托伐他汀组给药4周TG、TC和LDL-C水平有降低趋势，HDL-C水平有升高趋势，但差异无统计学意义（P > 0.05）。见图2。
2.3 血滞通胶囊给药6周后各组血脂水平比较
血滞通胶囊给药6周后，与空白对照组比较，ApoE-/-模型组小鼠血清中TG、TC、LDL-C均显著升高（P < 0.05），HDL-C水平显著下降（P < 0.05）。与ApoE-/-模型组比较，血滞通组可以显著降低血清中TC、TG、LDL-C的水平（P < 0.01或P < 0.05），显著升高HDL-C的水平（P < 0.05）；与血滞通组比较，血滞通+阿托伐他汀组能够显著降低TG、TC和LDL-C的水平（P < 0.01或P < 0.05），显著升高HDL-C的水平（P < 0.05）。见图3。
2.4 血滞通胶囊给药8周后各组血脂水平比较
血滞通胶囊给药8周后，与空白对照组比较，ApoE-/-模型组小鼠血清中TG、TC、LDL-C均显著升高（P < 0.01），HDL-C水平显著下降（P < 0.01）。与ApoE-/-模型组比较，血滞通组可以显著降低血清中TC、TG、LDL-C的水平（P < 0.01），升高HDL-C的水平（P < 0.05）；与血滞通比较，血滞通+阿托伐他汀组给药8周能够显著降低TG、TC和LDL-C的水平（P < 0.01），升高HDL-C的水平（P < 0.05）。见图4。
2.5 血滞通胶囊给药10周后各组血脂水平比较
血滞通胶囊给药10周后，与空白对照组比较，ApoE-/-模型组小鼠血清中TG、TC、LDL-C均显著升高（P < 0.01），HDL-C水平显著下降（P < 0.01）。与ApoE-/-模型组比较，血滞通组可以显著降低血清中TG、TC、LDL-C的水平（P < 0.01），升高HDL-C的水平（P < 0.05）；与血滞通组比较，血滞通+阿托伐他汀组给药10周能够显著降低TG、TC和LDL-C的水平（P < 0.01），显著升高HDL-C的水平（P < 0.01）。见图5。
3 讨论
高血脂会加大血液的黏度，危害冠状动脉，形成粥样硬化，导致冠心病、心肌梗死、高血压病、脂肪肝等疾病，TC每增高1 mmol/L，缺血性脑卒中发病率会增加20%[13-14]。目前，临床前高脂血症动物模型的制备方法有先天性、基因缺陷和化学物质诱导三种方式[15]。ApoE-/-小鼠目前是国内外公认的研究高脂血症较好的动物模型[16]。本研究采用L期给予ApoE-/-小鼠高脂饲料建立的高脂血症模型，形成率高，死亡率低，抵抗力强，与人患病机制较相似[17-18]。
血滞通胶囊为药食两用药材薤白提取加工而得，采用现代化生产工艺，除药用辅料外无任何外源性添加物质，是天然的纯植物降脂产品。薤白自古作为治疗冠心病、心绞痛的经典药物备受推崇。汉代医圣张仲景的《伤寒杂病论》中治疗冠心病心绞痛的经典方剂薤白瓜蒌白酒汤、薤白瓜蒌半夏汤也是现代中医都有在使用的方剂，而血滞通胶囊保留其中白酒的作用，采取醇提方式，加大薤白有效成分溶出率，保障临床效果。临床除适用于高脂血症治疗外，亦可广泛用于治疗高血脂症引起的心脑血管疾病。
大量文献表明，高脂饮食能引起血脂水平及机体氧化应激水平升高，特别是血清TC水平[19-22]。TC和TG是人类血脂的主要成分[23]，其血清浓度可作为脂代谢的指标。LDL-C是血浆中主要携带胆固醇的脂蛋白，易透入动脉内膜，促进动脉粥样硬化形成。HDL-C为有效的抗动脉粥样硬化因子，可将外周组织的游离胆固醇转移到肝脏代谢，有利于减少胆固醇在外周组织细胞中的积聚和对血管内皮细胞的广泛性损害[24-25]。本研究结果提示，血滞通胶囊能在显著降低ApoE-/-小鼠高脂模型血清中TC、TG、LDL-C水平的同时升高HDL-C水平，且具有量效关系。随着给药时间的延长，血滞通的治疗效果更稳定，血滞通与阿托伐他汀联合效果优于阿托伐他汀单用。
[参考文献]
[1] 仰艳冰.冠心病合并高脂血症应用阿托伐他汀治疗的效果评估报道[J].中国医药指南，2015，13（29）：81.
[2] 谢小英.瑞舒伐他汀与阿托伐他汀治疗高脂血症合并高血压的临床对比研究[J].现代医药卫生，2015，31（18）：2814-2816.
[3] 肖学凤，刘昌孝.关于代谢组学的降脂中药的作用物质基础及作用机制研究探索[J].天津中医药大学学报，2009， 28（1）：54-55.
[4] 卢锟刚，乐智勇，陈桂林，等.决明子、丹参、苦丁茶、绞股蓝不同组分配伍的降血脂作用[J].中国实验方剂学杂志，2012，18（9）：191-195.
[5] 陈东方，王海玉，张聪恪，等.虾青素胶囊对高脂血症人群降血脂功能研究[J].实用预防医学，2015，22（12）：1435-1436.
[6] 汪海娅，焦青萍，陈书燕，等.多廿烷醇治疗老年高脂血症的临床研究[J].中国新药与临床杂志，2015，34（9）：679-682.
[7] 罗海东.辛伐他汀联合非诺贝特对比单用辛伐他汀治疗高脂血症疗效与安全性的系统评价[J].中国药房，2015， 26（12）：1658-1661.
[8] 彭长维，刘秋，冯定奇.非诺贝特治疗急性高脂血症性胰腺炎临床研究[J].检验医学与临床，2015，12（7）：963-964.
[9] 杨玲，王陶丽.阿托伐他汀治疗伴高脂血症的非酒精性脂肪肝临床观察[J].中国药师，2012，15（6）：865-866.
[10] Bitzur R，Rozenman Y，Vinker S，et al. Israeli guidelines for thetreatment of hyperlipidemia [J]. Harefuah，2015，154（5）：330-338.
[11] 国家药典委员会.中国药典[S].一部.北京：中国医药科技出版社，2010：353.
[12] 《中药辞海》编审组.中药辞海（第三卷）[M].北京：中国医药科技出版社，1997：1546-1549.
[13] 刘永兰，赵喜荣，李燕.高脂血症的危害及其预防对策[J].中国医学创新，2012，9（26）：150-151.
[14] 陈名杰，李向平.代谢综合征血脂异常的特点及治疗研究进展[J].心血管病学进展，2011，32（1）：104-107.
[15] Mokale SN，Shete MT，Shaikh SI，et al. Synthesis and hypolipidemic activity of novel2-（4-（2-amino-6-（4-substituted.phenyl）pyrimidin-4-yl）-2-substituted.phenoxy）acetic acid derivatives [J]. Chem Biol& Drug Design，2012， 79（4）：548-552.
[16] 徐道峰，谢东明.动脉粥样硬化动物模型研究现状[J].赣南医学院学报，2012，32（4）：637-638.
[17] 李淑珍，李进.黑果枸杞总黄酮降血脂作用[J].时珍国医国药，2012，32（5）：1072-1074.
[18] 杨莲芳，石敏娟，高锦诚，等.苦丁茶对酒精性脂肪肝模型大鼠脂质代谢的影响[J].中国药业，2014，23（19）：30-32.
[19] Lin CP，Huang PH，Lai CF，et al. Simvastatin attenuates oxidative stress，NF-κB activation，and arterycalcification in LDL-CR-/- mice fed with high fat diet viadown-regulation of tumor necrosis factor-α and TNF receptor1 [J]. PLoS One，2015，10（12）：e0143686.
[20] Ali MI，Chen X，Didion SP. Heterozygouse NOS deficiency is associated with oxidative stress and endothelial dysfunction in diet-induced obesity [J]. Physiol Rep，2015，3（12）. pii：e12630. doi：10.14814/phy2.12630.
[21] ⒋罅粒彭锦德，符洪明.不同剂量辛伐他汀治疗老年高血压病合并高脂血症的对照研究[J].现代诊断与治疗，2015，26（12）：2669-2670.
[22] Yida Z，Imam MU，Ismail M，et al. High fat diet-induced inflammation and oxidative stress are attenuated byN-acetylneuraminic acid in rats [J]. J Biomed Sci，2015，22：96.
[23] 孙若东.临床血脂测定的主要种类及意义[J].中国实用医药，2010，5（18）：100-101.
[24] 徐佳杨，蔡辉.氧化低密度脂蛋白与动脉粥样硬化的研究[J].安徽医药，2011，15（2）：98-102.
[25] 赵德强，王大英，吴秀芬，等.益气活血化痰方对高脂血症兔血脂及动脉粥样硬化的影响[J].时珍国医国药，2011， 22（12）：2959-2960.