系统性硬皮病患者Th17水平与疾病活动相关性

[摘 要] 目的：分析系统性硬皮病（Systemic sclerosis，SSc）患者辅助型T细胞17（T-helper 17，Th17）水平与疾病活动相关性，探讨Th17在SSc发生发展中的作用。方法：选取我院2012年2月―2016年2月收治的107例SSc患者，按照其Valentini疾病活动评分，将>3分患者纳入活动组，将≤3分患者纳入非活动组，并选取同期50名健康体检者，纳入对照组。检测各组受试者Th17、Treg细胞、IL-17水平，计算上述指标与患者疾病活动的相关性。结果：活动组Th17水平高于非活动组，其Treg细胞水平低于后者；非活动组Th17水平高于对照组，其Treg细胞水平低于后者，差异有统计学意义（P

[关键词] 系统性硬皮病；辅助型T细胞17；疾病活动度；细胞因子

中图分类号：R593 文献标识码：B 文章编号：2095-5200（2016）05-087-03

DOI：10.11876/mimt201605032

系统性硬皮病（Systemic sclerosis，SSc）是以皮肤硬化、内脏器官纤维化为主要特征的系统性自身免疫性结缔组织疾病，致残率、致死率均较高[1]。目前医学界对SSc的发病机制尚不明确，多数学者认为，免疫异常、炎症反应、血管病及胶原合成异常均在 SSc发生发展中均发挥了重要作用[2]。最新研究发现，辅助型T细胞17（T-helper 17，Th17）可分泌大量白细胞介素-17（IL-17），在介导炎症反应、参与自身免疫性疾病发病过程中扮演重要角色[3]。本研究分析SSc患者Th17水平与疾病活动相关性，观察Th17对SSc发展的影响。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取我院2012年2月―2016年2月收治的107例SSc患者，按照其Valentini疾病活动评分，将>3分患者纳入活动组（n=32），将≤3分患者纳入非活动组（n=75），并选取同期50名健康体检者，纳入对照组。活动组男11例，女21例，年龄21～56岁，平均年龄（40.71±4.53）岁；非活动组男29例，女46例，年龄20～58岁，平均年龄（39.84±4.33）岁；对照组男16名，女34名，年龄23～55岁，平均年龄（41.32±4.27）岁。三组受试者性别、年龄比较，差异无统计学意义（P>0.05），具有可比性。本临床研究经我院医学伦理委员会批准，受试者均知情同意并签署知情同意书。

1.2 选取标准及排除标准

SSc患者选取标准：1）参照美国风湿病学会制定的SSc分类标准确诊[4]；2）入组前3个月内无糖皮质激素、抗类风湿类药物使用史。

排除标准：1）合并接触性皮炎、银屑病等其他皮肤疾病；2）合并可能对Th17、IL-17造成影响的其他自身免疫性疾病或心血管系统疾病。

1.3 检测方法

抽取各组受试者入组次日空腹肘静脉血5mL，置入肝素抗凝管内，以PBS等比稀释后，将细胞悬液加入淋巴细胞分离液内，室温，2000 r/min离心20 min，将血浆层、淋巴细胞分离液交界面单个核细胞吸出，PBS洗涤2次。使用BD FACSCalibur 流式细胞仪（BD Bioscience公司），对外周血Th17、Treg细胞进行检测，其水平均以占外周血CD4+T细胞百分比表示；使用酶联免疫吸附（ELISA）法，对血清IL-17进行检测[5]。

1.4 统计学分析

对本临床研究的所有数据采用SPSS18.0进行分析，性别以（n/%）表示，并采用χ2检验，年龄、Valentini疾病活动评分等计量资料以（x±s）表示，满足方差齐性则采用独立样本t检验，若方差不齐，则采用校正t检验，Pearson法分析Th17、Treg细胞及IL-17与SSc患者Valentini疾病活动评分的相关性。

2 结果

2.1 各组受试者外周血Th17、Treg细胞水平

活动组Th17水平高于非活动组，其Treg细胞水平低于后者；非活动组Th17水平高于对照组，其Treg细胞水平低于后者，差异有统计学意义（P

2.2 各组受试者血清IL-17水平

活动组、非活动组、对照组血清IL-17水平分别为（57.26±4.95）pg/mL、（15.53±2.13）pg/mL、（15.24± 1.99）pg/mL，活动组血清IL-17水平高于非活动组、对照组，差异有统计学意义（P

2.3 相关性分析

Pearson相关性分析示，外周血Th17、血清IL-17水平与Valentini疾病活动评分呈正相关，相关系数分别为0.681、0.677，外周血Treg细胞水平与Valentini疾病活动评分呈负相关，相关系数为-0.526（P

3 讨论

目前SSc的病因尚不明确，多数学者认为，由于SSc患者以皮肤内脏进行性纤维化、微血管系统改变及细胞、体液免疫异常为主要特征，T细胞和B细胞可能在疾病的发生发展过程中扮演了重要角色[6]。T细胞主要通过分泌成纤维细胞及细胞因子，发挥促纤维化、促炎作用，其中Th17和Treg细胞分别具有正向、负向调控炎症反应作用[7]。

作为CD4+效应T细胞的新亚型，Th17可特异性分泌促炎症性细胞因子IL-17、IL-21、IL-22等，其在细胞外病原体感染、类风湿性关节炎、系统性红斑狼疮等慢性炎症疾病中发挥的促进作用已得到相关研究证实[8-9]。

本研究结果示，活动期SSc患者外周血Th17水平高于非活动期患者，而非活动期患者外周血Th17水平高于对照组健康体检者，说明Th17在SSc发生发展中亦占据着重要地位，Brembilla等[10]发现，经环磷酰胺治疗1个月后，SSc患者外周血Th17水平明显下降，其机制可能为SSc发病早期，患者体内往往已大量富集IL-6、转化生长因子-β（TGF-β）及IL-17，IL-6、TGF-β可刺激成纤维细胞合成细胞外基质，诱导天然T细胞分化为Th17，IL-17则可促进成纤维细胞增殖，上调IL-6水平，形成恶性循环[11]。而Th17可直接分泌IL-6、IL-17，并增强成纤维细胞粘附分子表达，导致局部胶原合成增加、纤维化加剧[12]。此外，Santiago等[13]发现，随着SSc患者病程的延长，其外周血Th17水平逐渐上升，进一步说明Th17的持续扩增与积累伴随着SSc疾病全过程，而非仅于炎症反应阶段发挥作用。本研究结果示外周血Th17水平与SSc疾病活动评分呈正相关，印证了上述结论。

Treg细胞具有负调控免疫反应作用，是介导免疫耐受、降低自体免疫的关键细胞。本研究结果示，活动期SSc患者外周血Treg细胞百分比低于非活动期患者，而非活动期患者外周血Treg细胞百分比低于对照组健康体检者，说明SSc患者处于自身免疫抑制状态[14-15]。与此同时，Treg细胞的缺失可导致效应T细胞增殖能力上升，进一步导致Th17/Treg体系失衡，体内胶原合成、促炎因子释放不断加剧[16]，故随着Treg细胞百分比的下降，患者疾病活动评分逐渐升高。

IL-17是一种强大的促炎因子，主要由Th17分泌，在介导中性粒细胞招募、活化及迁移等过程中发挥一定作用。本研究结果示，活动期SSc患者血清IL-17水平明显升高，但非活动期SSc患者血清IL-17水平与健康体检者比较，差异无统计学意义，与Gao等[17]研究结果一致，说明自身免疫紊乱、炎症反应是导致SSc活动的主要原因，且上述过程是相辅相成、相互促进的，随着IL-17水平的上升，血管内皮损伤逐渐加剧，而血管内皮的损伤可引发血管内皮细胞炎症反应，导致Th17水平上升，病情不断进展。此外，Truchetet等[18]发现，IL-17不仅可促进成纤维细胞克隆增殖，还可上调胶原合成相关细胞因子、粘附分子表达，从而促进胶原合成、诱发病情恶化。本研究结果可见，IL-17与SSc患者疾病活动评分亦呈正相关，与上述假设一致。

综上所述，SSc患者体内Th17/Treg细胞体系平衡处于明显失调状态且往往伴随着IL-17的大量分泌，上述变化均与患者疾病活动具有密切关联。针对这一机制，寻求一种调节Th17/Treg平衡、抑制IL-17分泌的治疗方案，有望为患者预后质量的改善提供新的思路。

参 考 文 献

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