VEGF在再生障碍性贫血中的表达及其意义

[摘要] 目的 通过检测再生障碍性贫血（AA）患者血清中血管内皮细胞生长因子（VEGF）的浓度，探讨VEGF在AA临床诊断中的意义。方法 采用酶联免疫技术分别对26例AA患者及26例健康志愿者血清中VEGF的含量进行测定，考察VEGF与AA的相关性。结果 AA患者血清中VEGF的浓度为（48.6±22.8）pg/mL，健康志愿者血清中VEGF的浓度为（112.8±42.1）pg/mL，AA患者血清中VEGF的浓度明显低于健康志愿者血清中VEGF的浓度，两者差异有统计学意义（P

[关键词] 再生障碍性贫血；血管内皮细胞生长因子；临床诊断

[中图分类号] R556 [文献标识码] A [文章编号] 1674-0742（2014）05（c）-0063-02

[Abstract] Objective To investigate the significance of vascular endothelial growth factor （VEGF） in the clinical diagnosis of aplastic anemia （AA） by detecting the concentration of VEGF in serum of patients with aplastic anemia. Methods ELISA was used to detect the serum VEGF levels of 26 cases of patients with AA and 26 cases of healthy volunteers to investigate the correlation between VEGF and AA. Results The serum VEGF concentration of the patients with AA was （48.6 ± 22.8） pg/ml， and that of the healthy volunteers was （112.8 ± 42.1） pg/ml， the serum VEGF concentration of AA patients was significantly lower than that of the healthy volunteers， the difference was statistically significant （P

[Key words] Aplastic Anemia； Vascular endothelial growth factor； Clinical diagnosis

再生障碍性贫血（Aplastic Anemia，AA）是临床一种非常严重的血液病，临床主要表现为全血细胞明显减少、发热、出血等症状，骨髓增生能力明显下降，导致造血细胞锐减甚至缺失，非造血细胞持续增加，目前AA的治疗比较困难，如能尽早发现并给予良好的临床治疗，可提高治疗效果。据文献报道，血管内皮细胞生长因子（VEGF）与AA有一定的相关性，AA患者血清中VEGF的表达较健康志愿者存在一定的差异[1-3]。该研究2010年6月―2012年6月采用合适的检查方法，对AA患者及健康志愿者血清中VEGF的浓度进行检测，以期探明VEGF与AA的关系，为临床诊断AA提供一定的参考，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

入选病例为该院血液科收治的26例AA患者，其中男14例，女12例，年龄12～56岁，平均年龄（45.6±12.2）岁，所有病例均符合《血液病诊断及疗效标准》中关于AA的临床诊断标准[4]。另26例健康志愿者中，男15例，女11例，年龄21～54岁，平均年龄（46.1±11.9）岁，经检查，各项生理功能均正常。AA患者及健康志愿者均同意参加临床研究并签署知情同意书。

1.2 血样采集

AA患者及健康志愿者在提供血样前，须禁食12 h。使用真空取样管抽取AA患者及健康志愿者的静脉血液5 mL，离心（2 500 r/min），分离得到血清标样品，分装于无菌管中，置于-20 ℃的冰箱中保存待测。

1.3 检测方法

临床检测血清中VEGF的浓度，采用酶联免疫吸附法（ELISA）进行检测，检测严格按照VEGF试剂盒的说明书及标准操作规程进行。具体步骤如下：将VEGF单克隆抗体包被于ELISA板上，加入AA患者或健康志愿者的血清，阴性对照品及标准品，置于恒温培育箱中培育，洗涤后加入酶标抗体，再置于恒温培育箱中培育、洗涤、显色、终止反应，即用酶标检测仪测定。用标准品稀释液浓度为横坐标，以标准品的OD值为纵坐标绘制VEGF的标准曲线。根据样品的OD值计算AA患者或健康志愿者的血清中VEGF的含量。

1.5 统计方法

采用SPSS13.5统计软件对数据进行分析，计量资料以均数±标准差（x±s）表示，采用t检验。

2 结果

AA患者血清中VEGF的浓度为（48.6±22.8）pg/mL，健康志愿者血清中VEGF的浓度为（112.8±42.1）pg/mL，AA患者血清中VEGF的浓度明显低于健康志愿者血清中VEGF的浓度，两者差异有统计学意义（t=6.837，P

3 讨论

再生障碍性贫血主要是因物理、化学、生物等因素或其它原因引起的人体骨髓造血干细胞损伤，进而影响造血功能，使造血功能减弱或出现衰竭，最终导致骨髓中正常的造血组织面积急剧缩小，全血细胞出现减少的一种临床综合征。已有文献报道[5-6]，人体的造血干细胞如要发挥其正常的造血功能，需在适宜的造血微环境中进行，当人体分泌的各种细胞因子，持续的刺激造血干细胞，才能出现正常的增生、分化、成熟。

人体的造血微环境是指除造血细胞以外的所有参加调控造血的成分，主要包括微血管系统、神经成分、网状细胞、基质细胞（成纤维细胞、内皮细胞、吞噬细胞、脂肪细胞）、细胞外基质及其它结缔组织等，统称为造血微环境，是造血干细胞赖以生成的场所，造血细胞在微环境各种因素的调控下增殖、分化、发育及成熟。如造血微环境的出现异常，主要是指骨髓微血管、基质细胞、神经体液调节因子、细胞因子、细胞外基质和粘附因子等的缺陷，影响了造血干细胞的增殖分化，当因外界因素的影响，造成造血微环境出现紊乱，是导致AA的主要原因之一[7]。

VEGF与血管的生成有极为密切的关系，近年来关于VEGF作用的研究比较多，据文献报道[8]，VEGF的家庭成员非常多，迄今已发现五种血管内皮生长因子受体，分别为VEGFR-1、VEGFR-2 （KDR/flk-1）、VEGFR-3（Flt-4）、neuropilin-1、neuropilin-1，且VEGF的生理作用也非常广泛，如在心血管系统、造血细胞及淋巴管的发育等方面具有非常重要的作用，但其作用的机制尚不十分清楚，尽管近年对这方面的研究非常多，但还没有一种具有说服力的理论或假说被广大学者所接受，目前的研究主要围绕在VEGF作为共同的途径促进肿瘤血管形成及演进，但是可以确定的是VEGF与AA有一定的相关性，AA患者血清中VEGF的表达较健康志愿者存在一定的差异，VEGF表达减少可能使其维持造血干细胞的生存、分化和发育的功能受到直接影响，因而可推测AA患者中VEGF的低表达可能与其发病有一定的相关性[8-9]。

临床研究结果表明，AA患者血清中VEGF的浓度显著低于健康志愿者，由此可见，AA患者的骨髓血管的生成和造血细胞的减少存在一定的关系，该研究通过采用酶联免疫吸附法，快速、准确、方便的测定AA患者血清中VEGF的浓度，得出AA越严重，VEGF的浓度越低，在一定的范围内呈正相关，为临床诊断AA提供了一定的依据，拓展了VEGF在AA诊断与治疗方面的应用。

[参考文献]

[1] 赵琳，肖燕，金润铭.再生障碍性贫血发病机制研究进展[J].中国实用儿科杂志，2011，26（7）：545-548.

[2] 胡明秋，徐燕丽.再生障碍性贫血患者治疗前后血清TNF -A 、VEGF和TSGF检测的临床意义[J].放射免疫学杂志，2009，22（6）：567-568.

[3] 刘瑞玉，巫远忠，范火亮，等.再生障碍性贫血患者血清sVCAM-1、IL-18和VEGF水平及其临床意义[J].放射免疫学杂志，2009，17（1）：117-120.

[4] 刘雁飞，李永萍，赵瑞斌，等.再生障碍性贫血中VEGF和MVD的相关性研究[J].大理学院学报，2008，7（8）：33-35.

[5] 王海霞，王安全，田丛丛，等.愈障颗粒对非重型再生障碍性贫血患者骨髓小粒中VEGF表达的影响[J].陕西中医学院学报，2013，36（3）：92-94.

[6] 陈秀芳，刘红，黄石兵，等.VEGF、EGF在再生障碍性贫血患者血清中的表达及意义[J].基础医学，2007，12（32）：41-43.

[7] 陈早立，徐凤兰，刘自刚.骨髓小粒对非典型再生障碍性贫血 骨髓增生异常综合征增生性贫血的诊断及鉴别诊断[J].检验医学与临床，2009，6（7）：505-507.

[8] 韩秀华，李秀梅，庄万传.血浆VEGF在再生障碍性贫血中的表达及其意义[J].放射免疫学杂志，2007，20（5）：476-477.

[9] 韩秀华，李秀梅，庄万传.血浆VEGF在再生障碍性贫血中的表达及其意义[J].放射免疫学杂志，2007，20（5）：476-477.

（收稿日期：2014-02-28）