盐胁迫对白三叶种子萌发及幼苗生理特性的影响

摘要：采用0.00%、0.20%、0.40%、0.60%、0.80% 4个浓度的NaCl胁迫白三叶种子，通过种子萌发特性和生理特性的变化，研究其种子萌发、幼苗生长和生理特性。试验结果表明：盐胁迫对白三叶种子的发芽率、发芽势产生显著的影响；当NaCl浓度

关键词：白三叶；盐胁迫；萌发特性；生理特性

中图分类号：S 541文献标识码：A文章编号：1009-5500（2015）02-0073-04

我国是盐渍土地面积大，危害较严重的国家之一[1]，1亿hm2耕地中约有700万hm2盐碱地[2]。近年来，随着化肥用量的增加，土壤发生次生盐渍化，加之对土壤的不科学管理，常年积累，次生盐渍化越来越重，对农业生产造成很大的影响[3-5]。在农业结构调整中，牧草生产越来越受到人们的重视，利用盐渍土资源进行牧草生产，将盐渍良和利用与畜牧业生产结合起来，可以发挥巨大的生态效益和经济效益。对于大多数作物，种子萌发和早期幼苗阶段对环境胁迫最为敏感，都是以胚的生长为基础，而胚的生长则是种子内部所有生理生化系统协调作用的结果。因此，对作物的耐盐性研究大都在种子发芽期[6]。

白三叶（Trifolium repens）又名白花三叶草、白车轴草、荷兰翅摇，为豆科、多年生草本植物，是一种分布最广的优质牧草，也是优良的地被（草坪）植物。三叶草属植物约有360种，其中，农业上利用价值较高的约有25种[7]。试验探讨白三叶在4个浓度盐胁迫下的种子萌发、幼苗生长和生理特性，明确白三叶对不同浓度盐的耐受能力，了解萌发期白三叶的耐盐特性，为盐碱地建植白三叶提供基础。

1材料和方法

1.1试验材料

白三叶种子由山西农业大学果树所种子站提供。

2013年5～6月将白三叶种子用NaCl处理，分设4个浓度梯度：0.20%、0.40%、0.60%、0.80%，另设蒸馏水为对照处理0.0%，每个处理3次重复。每个重复在铺有2层灭菌滤纸的培养皿中放置100粒种子，同时加入15 mL不同浓度的盐溶液，将培养皿置于25 ℃的培养箱中进行培养[8]，每天更换处理液。

1.2测定方法

第7 d统计发芽势，取10株幼芽用游标卡尺测定幼苗和根的长度。再取幼苗进行生理指标的测定。茚三酮比色法测定游离脯氨酸（Pro）的含量[9]。取幼芽样品并加入5 mL磺基水杨酸试剂，煮沸20 min。冷却后过滤，取滤液2 mL，加入冰醋酸和酸性茚三酮各2 mL，沸水浴中显色30 min，冷却后加入甲苯5 mL，摇动萃取1 h，取甲苯层D520 nm测定吸光度，重复3次。

可溶性糖（WSC）的测定采用苯酚法测定[12]。 称取样品（0.100±0.005）g，剪碎混匀置入20 mL的试管中，并加入10 mL蒸馏水，沸水浴中提取。冷却过滤，去滤液2 mL，加入1 mL苯酚溶液，在5～20 s内再加入5 mL的浓硫酸溶液，冷却后在485 nm波长下测定光密度，重复3次；

硫代巴比妥酸发测定丙二醛（MDA）含量[10]，称取样品2 g，取2 mL 0.05 mol/L pH 7.8磷酸缓冲液为介质，研磨成匀浆。取提取液2 mL并加入2 mL 0.5%硫代巴比妥酸溶液煮沸10 min，冷却后3 000 rpm下离心15 min，取上清液测定532 nm下吸光度，重复3次。

1.3数据分析

用Excel 2007和SAS 9.2软件对试验数据进行处理。

2结果与分析

2.1不同NaCl浓度对白三叶种子发芽势、发芽率的影响

盐胁迫浓度达到0.40%时，白三叶草种子的发芽势和发芽率都呈现下降的趋势（表1）。

表1不同NaCl浓度对白三叶种子发芽势、发芽率

Table 1Effect of different NaCl concentration onseed

germination potential，germination rate

of Trifolium repens

NaCl/%发芽势/%发芽率/%

0.0061.33±4.78Aa77.67±5.02Aa

0.2045.00±4.39Bb75.00±4.67Aa

0.4011.33±3.21BCc34.67±3.04Bbc

0.606.67±1.47Cd17.67±1.13BCc

0.802.67±2.01Dd6.33±2.03Cd

注：同列不同大写字母表示差异极显著（P

NaCl浓度处理在0.2%时，白三叶种子的发芽势和发芽率均最大，分别为45%和75%，发芽率和对照组没有显著的差异；NaCl浓度≥0.40%时，白三叶种子的发芽率显著低于对照（P

2.2不同NaCl浓度对幼苗和根生长速度的影响

当NaCl浓度为0.20%时，不影响白三叶根和幼苗的生长；浓度为0.40%时幼苗生长受到影响、根的生长受到显著影响；浓度>0.60%时，幼苗和根的生长收到抑制，和对照组差异极显著（P

2.3不同NaCl浓度对幼苗体内Pro、WSC、MDA的影响

NaCl浓度在0.20%和0.40%时Pro的含量上升梯度最大。在整个处理组的浓度梯度内，Pro的含量处于上升状态，Pro含量在浓度为0.80%时候达到最大值（表3）；