HPLC测定注射用更昔洛韦的含量

[关键词]注射用更昔洛韦；HPLC；含量测量

[中图分类号]R91

[文献标识码]A

[文章编号]1673-7210（2007）02（c）-119-01

注射用更昔洛韦是更昔洛韦加适量氢氧化钠溶液经冷冻干燥制成的无菌制品。卫生部药品标准[ws-349(X-273)-98]收载的注射用更昔洛韦含量测定方法是采用紫外分光光度法。因更昔洛韦的结构与阿昔洛韦相似，市场上已出现用阿昔洛韦冒充更昔洛韦的情况。紫外分光光度法专属性不强，不能准确辨别真伪。本实验室用HPLC法测定注射用更昔洛韦含量，具有快速准确、灵敏度高、专属性强的特点，可作为其可靠的检测方法。

1 仪器与试剂

1.1 仪器

Beckman338 HPLC系统（美国贝克曼公司）；N2000色谱工作站（浙江大学智能信息研究所）；AE-100S电子天平（瑞士梅特勒公司）。

1.2 试剂与药品

甲醇（色谱纯，上海化学试剂公司）；更昔洛韦对照品（湖北科益药业有限公司）；注射用更昔洛韦（湖北科益药业有限公司）；阿昔洛韦对照品（中国药品生物制品检定所）；其他试剂均为分析纯。

2 方法[1]

2.1 对照品溶液的制备

精密称取更昔洛韦对照品50 mg，置50 ml量瓶中，加0.4%氢氧化钠溶液5 ml使溶解，用水稀释至刻度，摇匀，制成浓度为1 mg/ml的溶液。精密量取该液2 ml，置100 ml量瓶中，用水稀释至刻度，作为对照品溶液（20 μg/ml）。

另精密称取阿昔洛韦对照品50 mg，同上法操作，制成阿昔洛韦对照品溶液（20 μg/ml）。

2.2 供试品溶液的制备

精密称定注射用更昔洛韦适量（约相当于更昔洛韦50 mg）置50 ml量瓶中，加0.4%氢氧化钠溶液5 ml使溶解，用水稀释至刻度，摇匀，精密量取2 ml，置100 ml量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液。

2.3 色谱条件与系统适应性试验

色谱柱：Kromasil C18柱，5 μm，4.6 mm×150 mm；流动相：甲醇-水（10∶90），流速：0.6 ml/min，检测波长：255 nm，灵敏度:0.2 AUFS，进样量：20 μl，按外标法进行测定。

3 结果

3.1 色谱行为

取更昔洛韦对照品溶液与阿昔洛韦对照品溶液各适量混合后进样，更昔洛韦保留时间为4.08 min，阿昔洛韦保留时间为6.16 min，二者分离度大于1.5，理论塔板数为2 000。

3.2 线性关系和灵敏度

精密量取更昔洛韦对照品溶液（1 mg/ml）0.5、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0 ml，分别加水定容至100 ml，配制成不同浓度的对照品溶液，各进样20 μl，以峰面积A对浓度C（μg/ml）作回归计算，得回归方程为A=6.534 8 C×103 -101.26，r=0.9998（n=6），灵敏度为0.2 AUFS。以基线噪音3倍计算，更昔洛韦最低检出限为0.5 μg/ml。

3.3 精密度和稳定性

取浓度为10、20、30 μg/ml更昔洛韦对照品溶液及相对应的浓度为10、20、30 μg/ml的供试品溶液按外标法测定含量，以峰面积计算，3个浓度各样进样测定5次，RSD

3.4 回收率和样品测定

取已测定含量的注射用更昔洛韦5份，精密称定，每份约0.027 g，分别加入更昔洛韦对照品溶液（5 mg/ml）5.000 ml，按前述色谱条件进行色谱分析，测定更昔洛韦含量。计算回收率，结果5次测定平均回收率为99%，RSD

4 结论

按卫生部药品标准鉴别下试验，阿昔洛韦的紫外吸收图谱与更昔洛韦的紫外吸收图谱极其相似，鉴别反应均呈正反应，可见按此检验方法无法辨别其真伪。采用高效液相色谱法测定注射用更昔洛韦的含量及鉴别，具有结果准确、灵敏度高、专属性强的特点。

[参考文献]

[1]国家药典委员会.中国药典[M]. 二部.北京：化学工业出版社，2000.332-333.

（收稿日期：2006-12-22）