沾化冬枣核中多糖的体外抗氧化活性研究

摘要：利用滨州沾化冬枣枣核为试验材料，进行了冬枣核多糖体外抗氧化活性的试验研究，结果表明：沾化冬枣核对ABTS自由基、羟基自由基、DPPH自由基均有良好的清除作用，对几种自由基的抑制能力为ABTS+自由基清除率>DPPH自由基>羟基自由基，为沾化枣核的应用提供了依据。

关键词：冬枣核；多糖；体外抗氧化活性

中图分类号：TS255.4

文献标识码：A文章编号：1674-9944（2016）22-0149-02

1引言

沾化冬枣（Zyzyhpusjujuhadates）是鼠李科枣属的植物，属于鲜食的一种优质的枣类资源[1]。当前，多糖作为植物中一种重要活性物质，有研究显示具有免疫调节、抗肿瘤、抗衰老、降血糖等多种功效[2]。沾化冬枣枣核中的体外抗氧化能力，需要通过测定枣核中多糖对ABTS+自由基清除率、羟基自由基、DPPH自由基的清除能力来研究的。研究采用浸提法提取冬枣枣核中的水溶性多糖，再以枣核粗多糖为原料通过一系列反应制备出冬枣核多糖，通过冬枣核多糖对ABTS+自由基清除率、羟基自由基、DPPH自由基的清除效果来分析研究冬枣核多糖的抗氧化活性[3]。

2试验材料和方法

2.1材料的来源

从市场上采购滨州沾化冬枣，取枣核，烘干至恒重后用微型试样粉碎机粉粹，置于棕色瓶中并低温保存备用。

2.2实验材料

2.2.1药品及试剂

30%过氧化氢、硫酸亚铁、铁氰化钾、水杨酸、三氯化铁、盐酸、邻苯三酚、氯化铁、磷酸氢二钠、磷酸二氢钠、无水乙醇、三羟甲基氨基甲烷（Tris）、乙二胺四乙酸（EDTA）等。

2.2.2实验仪器

所用实验仪器及生产厂家如表1所示。

2.3实验方法

2.3.1多糖的提取

采用微波辅助浸提法提取多糖，每次称取冬枣枣核粉4g，按一定的料液比混合成溶液，微波处理后浓缩至原体积的1/4，再经过离心、去杂蛋白、真空干燥、脱色、乙醇沉淀等步骤得到多糖浸提液。

2.3.2对DPPH自由基清除能力的测定

参考Luo等[4]的方法，同时又有一定程度上修改。将试验重复3次求得清除率的平均值。

2.3.3对羟基自由基（・OH）清除能力的测定

用Fenton氧化法产生羟基自由基（・OH），H2O2/Fe2+体系可以通过Fenton反应产生如下化学反应H2O2+Fe2+・OH+OH-+Fe3+，Fenton反应是在酸性条件下进行的，H2O2在Fe2+的催化作用下氧化产生有色物质和具有强氧化能力的・OH，同时，Fe2+被氧化成为Fe3+产生有色物质[5，6]。

2.3.4对ABTS+自由基清除能力测定

将ABTS水溶液与过硫酸钾水溶液在暗处反应一定时间，得到ABTS+・离子液；使用前将离子液在734nm波长处的吸光度进行调整，30℃条件下平衡30min；取2.0mLABTS+・，加入一定量待测样品，室温混匀反应一段时间后，于同样波长处测定吸光度[7]。

3结果与分析

3.1沾化冬枣核多糖提取液对DPPH・清除作用

DPPH自由基清除能力的测定作为一种普遍的抗氧化能力的测定方法。抗氧化剂能够给稳定的DPPH自由基提供氢离子使其失去稳定性，由蓝色变成黄色[8]。

水提醇沉多糖液对DPPH・清除效果见图1。由图1可以看出，枣核多糖对DPPH・自由基的清除率，在试验浓度范围内，随样品质量浓度升高而增大，随浓度的增大有一定的效量关系。

3.2沾化冬枣核多糖提取液对ABTS+・的清除作用

由图2可知，对ABTS+・的清除率，在相应的溶液质量范围内，随样品质量浓度升高而逐步增强，最高可达65.32%；与同质量浓度的VC标准品相比，冬枣核多糖对ABTS+・的清除能力相对较弱[9]。

3.3沾化冬枣核多糖提取液对・OH的清除作用

以空白对照作为基准，测量各浓度样品的吸光值，可得多糖对羟基自由基的清除效果（图3）。由图3所示，核中的多糖在比较低的浓度范围时，对羟基自由基有一定的清除能力，并且可以从该图看出，在所测定的范围内，清除率与多糖的含量有一定的量效关系。当多糖浓度高达120μg/mL时，清除率为36.28%[10]。

4结论和展望

4.1结论

通过研究，可得以下结论：枣核多糖具有良好的抗氧化活性，并且其抗氧化能力呈现出明显的剂量依赖关系。从这次试验中可得，本研究从ABTS+自由基清除率、羟基自由基、DPPH自由基3个方面测定了多糖的体外抗氧化活性，均具有很好的清除作用，对几种自由基的抑制能力由大到小依次为ABTS+自由基清除率>DPPH自由基>羟基自由基。

4.2展望

枣核多糖具有很高的自由基清除活性，即沾化冬枣枣核是一种新型的天然的抗氧化剂，可用于枣核多糖药物和功能性食品的开发。

参考文献：

[1]于洪长，高新一.珍惜果品：沾化冬枣[J].植物杂志，1998（3）：8～9.

[2]申利红，王建森，李雅，等.植物多糖的研究及应用进展[J].中国农学通报，2011（27）：349～352.

[3]张越锋，李福燕，吴瑛.红枣多糖及红枣硒多糖抗氧化活性的比较研究[J].食品研究与开发，2015，2（36）：4～9.

[4]LUOW，ZHAOMM，YANGB，etal.IdentificationofbioactivecompoundsinPhyllanthusemblicaL.fruitandtheirfreeradicalscavengingactivities[J].FoodChemistry，2009（114）：499～504.

[5]张燕平，张虹，洪咏平，等.食品安全营养与发展[M].北京：中国农业科技出版社，2002.

[6]黎云龙，于震宇.骏枣多糖提取工艺优化及其抗氧化活性[J].食品科学，2015（36）：45～49.

[7]彭长连.用清除有机自由基DPPH法评价植物抗氧化能力[J].生物化学与生物物理进展.2000，27（6）：658～661.

[8]朱会霞.覆盆子黄酮抗氧化活性研究[J].现代食品科技，2012，28（7）：10～18.

[9]LIJW，AILZ，HANGF，positionandantioxidantactivityofpolysaccharidesfromjujubebyclassicalandultrasoundextraction[J].InternationalJournalofBiologicalMacromolecules，2014（63）：150～153.

[10]渠琛玲，马玉洁，罗莉，等.硫酸化修饰对大枣多糖抗氧化活性的影响[J].食品研究与开发，2013，34（18）：9～12.