地瓜藤提取物的活性成分研究

摘要：研究地瓜藤（Ficus tikoua Bur.）提取物的活性成分，经初步提纯后得到3个含量较多的组分，分别对其进行抗氧化和抗菌试验。结果表明，C组分对DPPH自由基、羟基自由基以及超氧阴离子自由基的清除率均比A、B组分的要高，且随着浓度的增加，各组分的清除率均呈上升的趋势。C组分对大肠杆菌、表皮葡萄球菌、志贺杆菌、金黄色葡萄球菌的抑制作用比A和B组分强，且3种组分的抑菌作用均随浓度的增加而增加。A、B、C 3种组分的MIC分别为1.03、1.04、0.51 mg/mL。

关键词：地瓜藤（Ficus tikoua Bur.）；活性成分；抗氧化；抗菌

中图分类号：R284.2 文献标识码：A 文章编号：0439-8114（2017）01-0112-03

DOI：10.14088/ki.issn0439-8114.2017.01.028

Active Components Research of Ficus tikoua Bur. Extracts

CHENG Ying，LIU Su-jun，SONG Jiu-hua

（Department of Chemistry， Leshan Normal College，Leshan 614004，Sichuan，China）

Abstract：The active components of Ficus tikoua Bur. crude extracts was studied. Three components extracted from Ficus tikoua Bur. were tested respectively through the antioxidant and antibacterial experiments. Results showed that the C composition was higher than part A and B on DPPH，hydroxyl and superoxide anion free radical. With the increase of concentration，the removal rate of three components were rised. The C composition was stronger than A and B for four bacteria，and increased with the increase of the concentration. At last，the MIC of A，B，C were 1.03 mg/mL，1.04 mg/mL and 0.51 mg/mL，respectively.

Key words： Ficus tikoua Bur.； active components； antioxidant； antibacterial

地瓜藤（Ficus tikoua Bur.）为桑科榕属植物地瓜榕的全草，具有清热解毒、祛风化湿、舒筋活络、通利乳汁、益气健脾、消肿止痛、活血等功效。中国约有120多种，其中作为药用的有20个种和3个变种，但进行过化学成分和药理作用研究的仅有10余种[1]。该属植物因生于荒滩野岭，被人们视为“野草”，国内外对此研究较少，主要集中在化学成分的研究[1，2]，而对其药理活性的研究较少。本研究利用溶剂提取法提取地瓜藤中活性物质，采用抗菌及抗氧化试验[3]探讨其生物活性，以便深入研究地瓜藤的活性成分，扩大其药源，以期充分利用中国野生植物资源。

1 材料与方法

1.1 材料、试剂及仪器

地瓜藤采自乐山郊区，由乐山师范学院生命科学学院鉴定。

正丁醇、甲醇、乙酸乙酯、无水乙醇（均为AR）、琼脂粉（成都市科龙化工试剂厂）；蛋白胨、牛肉膏（北京奥博星生物技术有限责任公司）；DPPH（1，1-diphenyl-2-picrylhydrazyl，日本和光纯a业株式会社生产）；大肠杆菌、表皮葡萄球菌、志贺杆菌、金黄色葡萄球菌，由乐山师范学院微生物实验室提供。

V-630型紫外分光光度计（日本分光株式会社）；LDZX-40H型立式自动电热压力蒸汽灭菌器；LR-250生化培养箱（上海一恒科学仪器有限公司）；QYC-200型恒温摇床（上海福玛试验设备有限公司）。

1.2 方法

1.2.1 提取与分离 地瓜藤粉末用95%的乙醇在常温下进行渗滤，浓缩渗滤液，将浓缩液（400 g）分别用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取，各部分再用梯度洗脱的方式进行分离浓缩，最后得到A组分10 g（石油醚∶乙酸乙酯=5∶1）、B组分7 g（乙酸乙酯∶丙酮=1∶7）、C组分8 g（正丁醇∶乙醇=2∶1），这3个组分含量较多，分别将其进行抗菌和抗氧化试验。

1.2.2 提取物抗氧化性质研究

1）提取物对DPPH自由基的清除作用：称取一定量样品，分别用无水乙醇配成浓度为2.5、5.0、10.0、20.0、40.0 mg/mL的待测溶液，吸取各待测溶液2.0 mL，加入0.2 mmol/L DPPH溶液2.0 mL，u匀，放置30 min，其吸光度为A样品。样品溶液2.0 mL与无水乙醇2.0 mL混合液的吸光度为A对照，2.0 mL DPPH溶液与2.0 mL无水乙醇的吸光度为A空白。对DPPH自由基的清除率按公式计算：清除率=[1- （A样品-A对照）/A空白]×100%。

2）提取物对羟基自由基的清除作用：根据Fenton反应，取1 mL 0.75 mmol/L邻二氮菲无水乙醇溶液，加2 mL的0.2 mmoL/L磷酸盐缓冲液（pH 7.4），充分混匀后加入0.75 mmol/L硫酸亚铁溶液 1 mL，最后加入0.01%H2O2 1 mL为对照；反应液在37%保温1 h，于536 nm处测定吸光度。按照以上方法，依次加入1 mL浓度为0.5、1.0、1.5、2.0、2.5 mg/mL的样品为处理样，在536 nm处测定吸光度，平行测定3次。对羟自由基的清除率按公式计算：清除率=（A处理-A对照）/（A空白-A对照）×100%。