细菌标本的采集与处理

【中图分类号】R446.5【文献标识码】B【文章编号】1672-3783（2012）12-0315-02

临床微生物是一门实践性很强的学科。随着医学事业的发展和进步，微生物检验人员不仅要具备扎实的医学理论知识，同时也要有丰富的实践经验。必须理论和实践有机的结合，才能为临床提供正确的检验结果，并指导临床医师及时合理使用抗生素药物。

从临床标本中分离细菌的目的是为疾病的病原学诊断，也即查找与疾病相关的微生物，及其对抗生素的敏感性，对临床诊断治疗预后和流行病学调查很有价值。然而正确的微生物学检验始自正确的标本分离，临床医师、护师、检验技师都必须通晓其要理。在分离标本时应掌握以下原则。

1.如何正确进行痰培养

正常人的呼吸道、口腔有不少的正常菌群呼吸道感染是最为常见的疾病，尤其是住院病人，因其抵抗力下降，易获得条件致病菌的感染。对指导用药、痰培养（或咽拭子培养）就显得十分重要。留取合格标本是做好痰培养的基本保证。应在医护人员指导下留取标本，告诉病人先用冷开水漱口清洗咽喉咳出痰后置于无菌广口容器中，只要痰涂片镜检合格，低倍镜视野中wbc>25个，鳞状上皮细胞

1.1病人是否在使用抗生素的情况下留取标本。抗生素或多或少会影响细菌生长。

1.2考虑合并感染的可能性，应该注意到细菌病毒之间的微生物{支原体、衣原体等}引起呼吸道感染的频率也较高。近年来由于抗生素的广泛运用，真菌感染的发病率有增高的趋势。如果病人的呼吸道感染症状严重，而痰液为泡沫性痰，无脓性痰，则多要考虑支原体类微生物感染的可能性。如果病人用过大量抗生素而症状无缓解，痰液出现胶胨状，要考虑真菌感染的可能性。

2.如何进行尿培养

正常人体内膀胱中的尿液是无菌的，从膀胱穿刺取出的尿应无细菌。尿液经尿道排出时受到尿道中细菌的污染而混有细菌经尿道排出的中段尿，细菌数不超过103cfu/ml.患有泌尿系感染时，尿中的菌落数高于104-105cfu/ml.因而以此界限作为诊断泌尿系感染的依据。有关尿培养问题，有以下几点需注意.

2.1正确留取尿细菌培养标本。应采用无菌容器收集尿标本，医务人员帮助病人清洗外，特别是女性患者。具体清洗方法是：首先用1：1000的新洁尔灭浸泡过的棉球反复擦洗外，再进行尿道口消毒，之后再打开无菌容器，让患者自然排尿。只收集中段尿液，留取后立即盖好容器并尽快送到微生物实验室。如需要做结核菌培养，应尽量留取清晨第一次的全部尿液送检。

2.2及时送检最好，细菌繁殖的速度是惊人的，尿里有供细菌生长的应验营养成分，九置的尿标本会使菌落计数的结果偏高而影响培养结果。而有些对酸、碱度较敏感的细菌如链球菌、淋球菌等，在偏酸的尿中放置久了会影响生长，影响培养结果。所以尿液标本放置的时间尽量不要超过1小时，及时送检最好，检验人员要及时接种。

2.3培养结果的处理原则：10%.的尿路感染患者可能会在同份尿标本中分离到二中细菌，并都是病原菌。若同份标本中检到三中以上不同种微生物，应认为收集或处理标本不当被污染，一般认为：尿标本中G-杆菌菌落计数>105cfu/ml.G+球菌菌落计数>104cfu/ml有诊断意义，报告鉴定结果集药敏诊断对于尿培养出真菌（排出污染可能）任何数目都有意义。均需做细菌鉴定和药敏试验。

3.如何解释脓性标本无细菌生长。

脓性标本未培养出细菌的确是微生物检验人员感到尴尬的问题，常常会搜到收到临床医生的质疑，分以下几种情况供临床医生参考：

3.1弄醒标本细菌培养没有细菌生长，首先要明确标本时有细菌而培养不出还是标本里没有细菌而培养不出细菌，结合标本直接涂片染得镜检可以解决接种有无细菌问题。

3.2标本中的脓细胞可能是白细胞吞噬细菌后中毒而死亡的尸体，细菌被白细胞吞噬收白细胞及死亡后的尸体释放出某些抑菌物质抑制了细菌的进一步防止。

3.3深部脓液内本来是厌氧菌生长，用常规有氧条件培养，细菌不会生长。

3.4标本种可能存在苛养菌或慢生长菌，受接种的培养基、培养环境、培养时间等因素的影响可能导致脓性标本培养不出细菌。

4.讨论总之从临床标本中分离细菌的目的是seiko疾病病原学诊断查找与疾病相关的微生物及其对抗生素的敏感性对临床诊断治疗、预后和流行病学检查很有价值。然而“正确的微生物学检验始自正确的标本采取，临床医师、护师及检验技师都必须通晓其要领”。标本的正确采集时确保微生物检验质量的前提，微生物检验者一定要有扎实的理论知识和丰富的实践经验，才能使微生物检验结果准确无误，一定要加强与临床科室的交流与联系，不能因为培养结果与临床不符就无端怀疑。体外药敏试验和体内药物疗效确实有差异。主要是因为4.1体外盒体内的环境不同，有些细菌可以利用体内的一些物质合成抵抗抗菌素的成分，导致出现体外敏感而体内耐药的情况。

4.2某些细菌产生耐药性，如产超广谱b-内酰胺酶的大肠埃稀释氏菌和克雷伯菌属，对头孢菌素、氨曲南，沙门氏、志贺氏菌对第一、二代头孢菌素及氨基糖苷类药物的体外药敏试验敏感，但临床治疗师无效的，报告药敏结果时需对此类结果进行修正和说明。因此对感染性疾病的治疗，要将细菌检验报告与临床用药情况和病人临床表现结合起来，综合分析后进行治疗。

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