双黄连鼻喷剂的制备及质量控制

摘要：双黄连鼻喷剂是通过改进生产工艺；经鼻腔给药的一种新剂型。该剂型避免了胃肠道消化液对药物的破坏，给药剂量小，奏效迅速，使用方便，适合大量生产。

关键词：双黄连；鼻喷剂；生产工艺；质量标准

中图分类号：R283.6　文献标识码：A　文章编号：1673-7717(2007)11-2252-02

双黄边鼻喷剂是通过改进生产工艺，经鼻腔给药的一种新剂型。该剂型避免了胃肠道消化液对药物的破坏，给药剂量小，奏效迅速，使用方便，适合大量生产。

1　处方

金银花300g，黄芩300g，连翘600g

2 黄芩苷提取工艺研究

2.1　实验材料①仪器与药品：高效液相色谱仪Wa－ters510泵，岛津Catalog7125型进样器，SPD－6AV紫外检测仪，CR－6A数据处理机；对照品：黄芩苷(含量测定用，中国药品生物制品检定所)；除药用乙醇外，所用化学试剂均为分析纯；②实验材料：黄芩饮片经鉴定为正品黄芩Seutellaria haicalensis Georgi。

2.2　实验方法①色谱条件：色谱柱YWG10μmC184.6mm×250mm；流动相：甲醇-水-磷酸(45:55:0.0125)；检测波长：280rim；流速1.0ml.／min；柱温30℃。②黄芩苷标准曲线：精密称取在60℃真空干燥4h的黄芩苷对照品2.79mg，定容100mL，作为对照品溶液。按色谱条件，分别选择1、2、4、8、160,L，测得峰面积，线性回归方程为：y=3098769x-5621.r=0.9999，结果表明：在0.0279～0.464μg范围内呈良好线性关系。③提取方法的比较：黄芩饮片在60℃烘干，粉碎过10目筛。称取100g，用表1中不同溶剂以10倍、8倍量分两次提取，每次1h，滤过。合并滤液，浓缩至干，称重。水煮醇沉法例外，先将提取液浓缩至药材6倍量，加入等量95％乙醇，搅匀，放置过夜，滤过，合并上清液及沉淀洗涤液，浓缩至干，称重。精密称取相当于生药20rag的上述浸膏，用80％甲醇适量超声溶解30min，定容至10mL，进样3～71μL。④黄芩苷的纯化：取前述60％乙醇提取滤液，减压回收尽乙醇后，补足蒸馏水至药材的15倍量，作为待纯化样品溶液。结果见表1。

测定结果以60％乙醇作溶剂，黄芩苷提取率最高。

纯化方法：①酸沉法：取上述待纯化样品溶液，加浓盐酸调pH3～4，静置1h后滤去杂质，滤液再于40℃调pH1.5～2，保温30min，静置，抽滤，沉淀用水洗至pH6.5～7.0，干燥即得黄芩苷粗品。②碱酸法：取上述待纯化样品溶液，加浓盐酸调pH 1.0，放置15h。1500r／min离心1h，取沉淀物进行干燥，称重。加6倍量水，70℃水浴加热，10％NaOH溶液调pH 6.0，搅拌，使全溶。加入等量45％乙醇，放置1h，抽滤，沉淀用45％乙醇洗涤，所得滤液加浓盐酸调pH 1.0，70℃下保温1h，放置10h，抽滤，所得沉淀干燥即得黄芩苷粗品。

取酸沉法或碱酸法所得的黄芩苷粗品，用60％乙醇溶解，定容至5mg(生药)／mL，进样2～30,L，测定结果见表2。

根据以上结果，得到一种新的黄芩苷提取分离方法，即醇提酸沉法。该方法与传统的水提酸沉法和水提碱酸纯化法比较，黄芩苷的转移率有极大提高。该方法的具体操作应为：黄芩粗粉以60％乙醇10倍、8倍量回流提取2次，每次1h，滤过，滤液减压回收尽乙醇，补足蒸馏水至药材的15倍量，加浓盐酸调pH 3～4，静置1h后滤去杂质，滤液再于40℃调pH 1.5～2，保温30min，静置，抽滤，沉淀用水洗至pH 6.5～7.0，干燥即得黄芩粗品。

3　金银花连翘的提取

金银花与连翘分别以6倍、4倍95％乙醇回流提取2次，每次1h，合并醇提液，浓缩回收乙醇至无醇味，加3～4倍于药量的水，放置过夜，滤取上清液，浓缩收膏，60℃真空干燥，得干浸膏。

4 配液

黄芩粗品，加蒸馏水适量，搅拌使溶解，滤取上清液，加入金银花、连翘浓缩膏，搅拌使溶解，滤取上清液，调pH值4.8～6.5之间，灌装。

5　质量标准

5.1　外观性状本品为红棕色澄明液体。

5.2　pH值(以《中国药典》1995年版二部附录)取本品，置酸度计中，测得PH4.8～6.5。

5.3 薄层层析定性鉴别黄芩苷①供试品溶液制备：取本品1mL，加75％乙醇溶液，摇匀，滤取上清液，作为供试品溶液。②黄芩对照药物溶液的制备：取黄芩对照药材1g，加75％乙醇溶液，超声处理20min，滤取上清液，作为对照药物溶液。③阴性对照溶液的制备：除黄芩外，处方其余各味药，模拟制法制成空白对照品，制成阴性对照溶液。④对照品溶液的制备：取黄芩苷作为对照品，以75％乙醇制成每1mL含11.2rag的溶液。⑤薄层层析：取供试品溶液，对照药物溶液，阴性对照溶液，对照品溶液各适量，分别点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿：甲醇：水(30:3:1)为展开剂展开，取出晾干。供试品色谱与对照药物及对照品在相应位置显相同斑点，阴性对照溶液在此位置上不显斑点。

5.4　局部刺激试验参考文献，以蟾蜍作试验，将蟾蜍仰卧固定在蛙板上，使口腔张开，用止血钳牵拉，手术剪分离上颚黏膜。取约3mm×3mm黏膜，用生理盐水洗净血块以及黏液，黏膜面向上平铺于载玻片上，于黏膜表面滴加0.2mL药液，轻轻盖上盖玻片，在室温下置40倍光学显微镜下观察，并记录从点药开始到纤毛停止摆动所经过的时间。

6 讨论

双黄连制剂是近年推出的疗效较好的抗菌、抗病毒中成药，由金银花、黄芩、连翘中提取的有效成分配制而成，目前剂型有口服液、注射液、粉针剂、颗粒剂等。黄芩为清热燥湿之剂，连翘、金银花为清热解毒之品，三药协同，表里双解，气血两清，具有良好的清热解毒功效。临床用于肺炎、上呼吸道感染、扁桃体炎、支气管炎、咽炎、急性肺炎、泌尿系统感染等

由于双黄连鼻喷剂药液直接作用于鼻黏膜，药液的pH值、渗透压直接决定对黏膜的刺激，如果制剂不当，使用后会出现明显的刺痛，肿胀等不适症状。

目前双黄连的剂型较多，但双黄连鼻喷剂市面未见。由于双黄连鼻喷剂有效成分复杂，且性质差异大，要建立一套完善的方法对其进行质量控制，目前还很困难，需要今后进一步研究。