HSP27在胃癌中的表达及意义

[摘 要] 目的 研究胃癌组织中热休克蛋白27（HSP27）的表达及与临床、病理资料之间的关系。方法 收集佳木斯大学附属第一医院病理科20072009年未接受任何干预治疗的原发性胃癌病人标本60例，正常胃组织22例，所有标本均经病理学证实。采用免疫组织化学方法，检测HSP27在其中的表达情况，结合临床病理资料进行统计分析。结果 HSP27的表达：在60例胃癌组织中的阳性表达率为73.3%，在22例正常胃组织中为31.8%，说明HSP27在胃癌组织和正常胃组织中的表达具有显著差异（P0.05）；与肿瘤分化程度、远处转移和临床病理分期具有相关性（P

关键词：胃癌 HSP27 免疫组化

[Abstract] Objective： To study the heat shock protein in gastric carcinoma 27 （HSP27） expression and the clinical and pathological data relationships. Methods： Pathology in our hospital from 2007 to 2009， which did not receive any intervention treatment of patients with primary gastric cancer resection specimens of 60 cases， 22 cases of normal gastric tissue， all samples were confirmed by pathology. Immunohistochemistry was used to detect HSP-27 expression in which， combined with clinical data were statistically analyzed. Results： HSP27 expression： in 60 cases of gastric carcinoma HSP27 positive expression rate of 73.3%， in 22 cases of normal gastric tissue was 31.8%， indicating that HSP27 in gastric cancer and normal gastric tissues significant difference （P = 0.001 0.05）； in gastric HSP- 27 expression and tumor differentiation tumor、 metastasis、clinical pathological stage correlated （P

Key words：Gastric carcinoma； Heat shock proteins； Immunohistochemistry

中图分类号：R246.5 文献标识码：B 文章编号：1004-7484（2010）11-0017-03

研究发现HSP在某些肿瘤组织中的表达与在正常组织中的表达不同[1-2]，在很多恶性肿瘤中存在着HSP27的过度表达，如前列腺癌、胃癌、卵巢癌，提示HSP27参与了肿瘤的发生、发展过程，但其确切作用及机制目前尚不清楚。为了进一步研究HSP27与胃癌的发生、发展的关系，本实验采用免疫组织化学方法探讨其在胃癌中的表达及与临床病理学特征的关系，从而为胃癌的发展和预后提供理论依据。

1 材料与方法

1.1 标本来源 收集佳木斯大学附属第一医院手术切除、经病理诊断证实为胃腺癌标本60例，在术前这些患者均未接受任何抗癌治疗，男性43例，女性17例。本组患者的平均年龄是（60±12）岁（平均60.5岁，33～81岁）。另收集22例正常胃组织。根据Lauen分类法（1965年）将肿瘤分类：60例中，肠型20例，弥漫型40例。按照肿瘤的分化分三类：高分化4例，中分化10例，低分化46例。根据国际抗癌联盟（UICC）1987年公布的胃癌TNM分期法将肿瘤分期：Ⅰ期11例，Ⅱ期19例，Ⅲ期20例，Ⅳ期10例。17例阳性患者淋巴结阴性，43例阳性患者淋巴结阳性（N1，27例；N2，16例）。在检查的60例中有3例远处转移。所有标本经10%福尔马林固定，常规石蜡包埋，4um厚切片。

1.2 方法

1.2.1 免疫组织化学染色 ElivisionTMplus试剂盒将多个抗鼠和抗兔IgG分子与辣根过氧化物酶聚合，所形成的聚合物直接与一抗结合，从而放大了抗原抗体结合的信号。其染色步骤如下：（1）石蜡切片脱蜡和水化。（2）根据每一种抗体的要求，对组织抗原进行柠檬酸修复液（PH值，6.0）热修复20分钟。（3）每张切片加1滴或50µl 3%过氧化氢溶液，室温下孵育10分钟，以阻断内源性过氧化物酶。PBS冲洗3×3。（4）甩去PBS液，每张切片加1滴或50µl的第一抗体，室温下孵育60分钟或4℃过夜。（5）PBS冲洗3×5。（6）甩去PBS液，每张切片加1滴或50µl聚合物增强剂（试剂A），室温下孵育20分钟。（7）PBS冲洗3×3。（8）甩去PBS液，每张切片加1滴或50µl酶标抗鼠/兔聚合物（试剂B），室温下孵育30分钟。（9）PBS冲洗3×3。（10）甩去PBS液，每张切片加2滴或100µl新鲜配置的DAB显色液，显微镜下观察3-10分钟，阳性显色为棕色或红色。（11）蒸馏水或自来水冲洗，苏木素复染，0.1%盐酸分化，自来水冲洗，PBS冲洗返蓝。（12）用DAB显色，切片经过梯度酒精脱水干燥，中性树胶封片。

1.2.2 免疫组织化学染色结果判断 （1）阳性染色细胞是通过在每种条件下都由两个独立的观察者在不知全部观察者所认同的临床数据的情况下所获得的。（2）阳性结果判定：免疫组化的阳性表达均为各自染色条件下结构完整、定位明确、染色对比清晰，以细胞浆出现棕黄色染色或伴有胞核棕黄色颗粒的细胞。（3）切片在200倍镜下观察5～10个视野，每个视野计数100～200个肿瘤细胞，共计1000个细胞，根据阳性细胞表达率分为：阴性为无着色细胞、背景同阴性对照或者阳性细胞率

1.3 统计学方法 采用SPSS17.0软件对数据进行处理，各样本资料差异的统计学分析采用X²检验、秩和检验及Fisher确切概率法。

2 结果

2.1 HSP27的表达情况 在胃癌组织中HSP27的阳性率为73.3%，在正常胃组织中为31.8%，说明HSP27在胃癌组织和正常胃组织中的表达具有显著差异（X²=11.8，P=0.001

2.2 HSP27的表达与临床病理特征的关系 胃癌组织中HSP27的表达与患者年龄、性别、肿瘤组织类型和浸润胃壁深度无关（P>0.05），与肿瘤分化程度、远处转移和临床病理分期具有相关性（P

上图依次为低分化、中分化、高分化胃腺癌组织中HSP27的阳性表达及正常胃组织中的阴性表达（×200）

3 讨论

HSP家族在肿瘤的发病、治疗和预防中的作用和意义十分重大，是近年来备受关注的热门研究领域之一。

本实验中HSP27在胃癌组织中高表达，阳性率为73.3%，正常胃组织的阳性率为31.8%与之前的报导大致相同。HPS27的表达阳性率的多少应与机体当时所处的状态有关，当机体处于应激状态或在某种疾病过程中，HSP27都有超量表达，其主要表达形式是瞬间表达，但某些时段在肿瘤组织中的表达也可能是持续性的，这样也就决定了在肿瘤发病的不同阶段，HSP27的表达规律必将不同。我们就可以有针对性的研究HSP27在肿瘤发展的同一阶段和患者所处的同一机能状态中的表达规律，对于阐明HSP27的临床应用价值非常重要。实验证实HSP27的表达与肿瘤分化程度、远处转移和临床病理分期明确相关，与病人年龄、性别、肿瘤组织类型和浸润胃壁深度无关。国内文献报道胃高分化腺癌HSP27表达高于低分化腺癌，但本实验中胃低分化腺癌HSP27表达相对较高，其原因可能是不同部位和不同类型的癌组织HSP27表达具有特异性，也可能与检测手段和结果判定标准的不同有关。

目前，需要有进一步的研究来澄清HSP27在肿瘤生长、侵袭性和转移的分子事件的分子机制，如此的研究对新的治疗策略是必要的，并且为胃癌提供了预后指征。

参考文献

[1] 郭云鸿，田晓予，米建强，等.宫颈鳞癌组织中HSP70和Bcl-2的表达及意义[J].山东医药，2006，46（24）：11-12.

[2] 栗军香，张瑞英，魏红，等.HSP70在急性白血病外周血细胞中的表达及临床意义[J].山东医药，2007，47（17）：44-45.