醒脑静注射液对大鼠创伤失血性休克合并内毒素血症模型的保护作用

摘 要: 目的：研究醒脑静注射液对创伤失血性休克复合内毒素血症模型大鼠的保护作用。方法：制作大鼠创伤失血性休克合并内毒素血症动物模型，经静脉给予醒脑静注射液干预治疗，检测血清中TNF-α、IL-1β、IL-10含量的变化及大鼠肺组织的病理改变。结果：醒脑静注射液干预治疗组大鼠血清中TNF-α、IL-1β的水平较致伤组降低(P＜0.05)，血清中IL-10的含量较致伤组明显升高(P＜0.01)，大鼠肺组织炎症病理改变较致伤组7明显减轻。结论：醒脑静注射液对大鼠创伤失血性休克合并内毒素模型有明显保护作用。

关键词: 醒脑静 创伤失血性休克

资料与方法

主要试剂仪器和实验动物：TNF-αELISA试剂盒、LPS、醒脑静注射液、IL-1βELISA试剂盒、IL-10 ELISA试剂盒、全自动酶联仪、SD大鼠。

创伤失血性休克合并内毒素打击大鼠动物模型的制作：SD大鼠18只，雌雄不限，体重250～300g，标准条件喂养，参照Fan等［1］方法和Chaudry［2］方法加以改进，大鼠用20%乌拉坦(7ml/kg)肌肉麻醉，气管切开置14G导管，颈动脉、颈静脉分别置24G导管，用特制钳钳夹致大鼠双侧股骨骨折及周围软组织损伤，在20分钟内自颈动脉放血致休克1小时，维持平均动脉压(MAP)45mmHg，回输失血及2倍于失血量的乳酸钠林格氏液，液体复苏2小时后由颈静脉给予LPS(1.4mg/kg)，通过多导生物信号传导仪监测实验动物的心率和平均动脉压。

实验分组：动物以完全随机方式分为三组，每组6只，A组为对照组，B组为创伤失血性休克合并内毒素血症组，C组为醒脑静干预治疗组，即在创伤失血性休克合并内毒素打击的模型中，于内毒素给予前30分钟经颈静脉给予醒脑静注射液(10ml/kg)干预治疗。

血清TNF-α、IL-1β、IL- 10的检测：于LPS给予后90分钟，由颈动脉取血置于试管中，离心(3000转/分)10分钟，收集上层血清，严格参照ELISA试剂盒说明书操作步骤检测血清中TNF-α、IL-1β、IL-10的含量。

病理学检查：于LPS给予后4小时取大鼠肺组织，按常规方法制作HE染色石蜡病理切片，光镜下观察病理结果。

统计学分析：采用完全随机设计资料，所得数据用均数±标准差(X±s)表示，用统计软件SPSS10.0做单因素分析，两组间的显著性比较用t检验。

结 果

醒脑静注射液治疗对创伤失血性休克合并内毒素血症大鼠血清细胞因子TNF-α、IL-1β、IL- 10含量的影响：TNF-α在 B组血清中的含量较A组明显升高，C组血清中TNF-α的含量较B组明显下降。IL-1β在 B组血清中的含量较A组明显升高，C组血清中IL-1β的含量较B组明显下降。IL-10在A组血清中的含量极微，几乎测不出，B组血清中IL-10的含量较A组明显升高，C组血清中IL-10的含量较B组有明显的升高。见表1。

醒脑静注射液对创伤失血性休克合并内毒素血症大鼠肺组织病理的影响：A组为对照组肺组织；B组肺泡间隔较A组明显增宽，肺泡腔内有大量炎性细胞及浆液渗出，毛细血管有充血扩张表现；C组肺泡间隔无明显增宽，肺泡腔内仅有少量炎性细胞及浆液渗出，毛细血管无明显充血扩张表现。

讨 论

TNF-α、IL-1β是两种重要的促炎细胞因子。本实验中，B组血清TNF-α、IL-1β含量较对照组明显升高，给予醒脑静注射液干预治疗后血清中这两种因子的水平都明显下降，说明醒脑静注射液可明显降低炎症反应中TNF-α、IL-1β的血清含量，缓解由这些炎症因子引起的各种病理生理改变。

本实验中，A组血清IL-10的含量极微，几乎测不出，B组血清中IL-10的含量较对照组明显升高，给予醒脑静注射液治疗后，血清中IL-10的含量较B组明显升高。IL-10作为抑炎因子在免疫抑制及内毒素的耐受中起重要作用，可下调巨噬细胞对多种刺激的反应，抑制单核巨噬细胞诱导产生TNF-α、IL-1、IL-6、IL-8及粒细胞集落刺激因子(GM-CSF)。 B组中肺组织炎性水肿非常明显，肺泡内有明显的炎性渗出，肺泡间隔增厚，充血明显，C组肺组织病理改变明显减轻，说明醒脑静注射液对该模型大鼠重要脏器有明显保护作用。

醒脑静注射液是中药复合制剂，由麝香、栀子、郁金、冰片等组成，在中西医结合治疗危重病的临床实践中,醒脑静的应用比较广泛,并取得了较好的临床效果。曾有研究显示，醒脑静注射液在体外可以抑制多种细菌生长，可以减轻肠黏膜的再灌注损伤，保护肠黏膜的屏障功能，防止肠道内毒素入血［3］。本实验中的创伤失血性休克合并内毒素血症动物模型模拟了临床上严重创伤感染、休克后体内炎性因子大量释放的病理状态，实验结果表明应用醒脑静注射液对该模型有明显的保护作用,这可以为临床中应用醒脑静注射液抢救急危重患者提供实验参考依据。

参考文献

1 Fan J,Shek PN,Suntress ZE,et al:Liposome antioxidants provide prolonged protection against acute respiratory distress syndrome.Surgery 2000,128:332-338.

2 Chaudry I H.Rat and mouse models of hypovolumic-traumatic shock.In:Schlag G, Fedl H(ed):Pathophysiology of shock, sepsis and organ failure.Germany:Springer-Verlag Berlin Heidelberg,1993,371-376.

3 张路晗,向金莲,程睿,等.醒脑静注射液的药效学研究.华西药学杂志,2001,16(6):429-431.