乳铁蛋白在DMH―DSS诱导大鼠大肠癌中的抑制作用

时间:2022-10-03 12:35:38

摘要:目的:探讨乳铁蛋白(LF)在DMH-DSS(1,2-二甲基肼一葡聚糖硫酸钠)诱发大鼠大肠癌中的作用。方法:Wistar大鼠随机分为3组:对照(水)组12只,500 mg・kg-1・d-1LF组(LF低剂量组)12只和1000 mg・kg-1・d-1LF组(LF高剂量组)12只。所有实验大鼠在饮用1%DSS 1周后,皮下注射DMH(20 mg/kg),每周1次,连续8周。于注射DMH开始25周后处死所有大鼠。在显微镜下检测大肠腺瘤和腺癌发生的情况。结果:LF低剂量组和LF高剂量组与对照组大鼠相比,腺瘤和腺癌的数量明显减少.差异有统计学意义(P

关键词:乳铁蛋白;大肠癌;1,2-二甲基肼一葡聚糖硫酸钠

中图分类号:R735.34 文献标志码:A 文章编号:1008-2409(2016)03-0018-04

大肠癌(CRC)是一种常见的消化系统恶性肿瘤,在我国发生率占各种恶性肿瘤的第3位。溃疡性结肠炎又称慢性非特异性溃疡性结肠炎或特发性溃疡性结肠炎,是一种常见的慢性肠道疾病,并且是CRC的高危因素。有研究表明,健康的饮食可能成为预防癌症的有效方法。

乳铁蛋白(LF),是一个分子量为80 kDa的单链糖蛋白,属转铁蛋白家族成员。LF最初是人乳中提炼出来的,主要存在于嗜中性粒细胞的分泌颗粒中和各种分泌液中,如牛奶、眼泪、鼻腔液、唾液、胰腺液和胃肠液中。LF具有多种生理作用,包括抗癌、抗菌、抗炎和免疫调节作用。1,2-二甲基肼(1,2-Dimethylhydrazine,DMH)是被广泛使用在制作大肠癌动物模型中的致癌剂。葡聚糖硫酸钠(DSS)是一种合成的硫酸化的多聚葡萄糖,多用于诱发结肠炎的动物模型。

本实验主要探讨乳铁蛋白(LF)对DMH-DSS诱发大鼠大肠癌的抑制作用。

1材料和方法

1.1动物与饮食

36只5周龄雄性Wistar大鼠由桂林医学院实验动物中心提供。动物的保护和使用符合中国法律和桂林医学院伦理委员会指导原则。大鼠被安置在桂林医学院动物实验中心一个标准的空调房,循环光照12 h,环境温度控制在(23±2)℃,湿度控制在(50±10)%。大鼠自由饮水并饲喂基础饮食。

1.2实验分组及处理

36只雄性大鼠随机分为3组(每组12只):对照(饮水)组,LF低剂量组,LF高剂量组。DMH(Sigma公司)溶解在0.9%氯化钠溶液中,用NaHCO3将pH值调整到6.5,过滤除菌。所有实验大鼠饮用1%DSS(Sigma公司)1周后,皮下注射DMH(20 mg/kg)每周1次,连续8周,并于注射DMH 25周后处死,解剖后检测大肠肿瘤发生的情况。

1.3组织学分析

动物处死后,迅速取下整段结直肠,并沿肠管纵轴纵向剖开,用预冷的0.9%NaCl溶液漂洗清洁,黏膜面朝上置于滤纸上,用10%缓冲福尔马林固定,石蜡包埋,4μm切片,HE染色,在光学显微镜下观察(Olympus日本),并计数腺瘤和腺癌发生的数量。

1.4统计学分析

实验数据采用Statcel统计软件(KaleidaGraph4.1版)分析,P

2结果

LF低剂量组和LF高剂量组大鼠发生的腺瘤数及腺癌数量均比对照组减少,差异有统计学意义,且LF高剂量组腺瘤及腺癌数比对照组显著减少。见表1,图1~2。

3讨论

溃疡性结肠炎(UC)是一组反复发作的慢性非特异性肠道炎症性疾病。常高发于25~35岁和55~65年龄段。UC病变常局限于结肠黏膜,多累及远端结肠,向近端发展,临床表现以腹痛、腹泻、黏液脓血便为主。有研究表明随着病程的延长,UC发生癌变的风险将增加,约高于普通人群2至5倍。近年来大量研究发现健康饮食和生活方式同样在肿瘤的发生过程中起重要作用。LF在动物初乳及乳腺分泌物中含量丰富,并被广泛地认为有预防和抑制癌转移的能力。有研究显示炎症的微环境与肿瘤的发生和进展密切相关,LF通过激活Th1免疫反应并刺激抗肿瘤细胞释放抗肿瘤因子可能为抗癌作用的关键。Togawa等研究发现,LF能下调促炎因子TNF-α的表达,而TNF-α是巨噬细胞在感染或者应激情况下分泌的炎症因子,是肿瘤炎症微环境中最主要的促炎症细胞因子,可促进肿瘤的侵袭和转移。而笔者以往的研究也显示,乳铁蛋白能显著抑制LPS诱导大鼠牙周炎的发生。本研究发现,LF低剂量组和LF高剂量组与对照组相比在大肠中发生腺瘤及腺癌数量显著减少。在其他的动物模型实验中也表明LF具有抑制肿瘤发生、发展的作用,LF有明显抑制N-丁基-N-亚硝胺诱导大鼠膀胱癌的作用。同时在氧化偶氮甲烷诱导鼠的结肠癌中,LF也能显著降低肠腺癌的发生率并且没有明显的毒副作用。另外LF对肺癌、食道癌、肝癌及肿瘤转移同样有预防与抑制作用。

此外,乳铁蛋白也能通过调节细胞周期蛋白表达起到抗癌作用。最近研究发现,在头颈部癌细胞系中,LF通过P27/cyclin E途径抑制细胞由G1期向S期转变,进而调控细胞的增殖。虽然,LF能抑制癌症的机制尚未完全了解,但是其抗癌活性是比较肯定的。

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