海芋\银杏叶活性成分对钉螺的毒性作用研究

摘要：海芋和银杏叶作为主材料，分别取海芋的地上、地下部分和银杏叶做对比试验，进行灭螺效果的比较。

Abstract: The giant alocasia and ginkgo leaf as the main material, and the on ground and underground part of the giant alocasia and the ginkgo leaf are collected to conduct the tests for comparing the mollusicidal effect.

关键词：海芋；银杏叶；钉螺；活性成分

Key words: giant alocasia；ginkgo leaf；oncomelania；active ingredient

中图分类号：Q94文献标识码：A文章编号：1006-4311（2011）03-0303-02

0引言

血吸虫病是世界上仅次于疟疾的第二大寄生虫病，它广泛流行于热带和亚热带的74个国家和地区，6亿人有感染的危险，2亿多人已经感染，中国是血吸虫病的重灾区，1980年WHO报道通过钉螺控制是减少血吸虫病的传播的一个迅速而有效的方法，导致了灭螺剂的大量使用。

5年后，随着诊断技术和化学疗法的进展，WHO修改了策略，重点转向控制发病而不是控制血吸虫传播。近半个世纪以来，各种各样的灭螺措施倍受重视。

本文拟采用银杏和海芋各部分新鲜材料水浸液和干样分别进行灭螺实验的研究，并对其EST酶带进行分析，探讨银杏叶和海芋灭螺的可能性及其作用机理，旨在为生态工程灭螺提供依据。

1海芋和银杏叶新鲜材料对钉螺的浸杀实验

通过采取新鲜海芋（分地上和地下部分）和凋落的银杏叶的水浸液对钉螺进行浸杀实验，测定不同处理浓度下钉螺的死亡率。

1.1 水浸液的配制

将采到的新鲜海芋（分地上和地下部分）和银杏叶擦净，剪成约1cm2的碎片。用1份植物材料和99份无氯清水配成1%水浸液，浸泡3天后，用尼龙网纱滤去浸泡物，滤液作为母液配制所需各浓度处理液。取以上两种植物的溶液母液分别稀释后配成1％、0．5％、0．1％、0．05％四个不同浓度梯度的水浸液，共12种水浸液。

1.2 钉螺的处理方法

实验于2008年10月至12月在常温下进行，选取健康钉螺30只为一组，每10个装入一个尼龙网袋中，分别将各组（3袋/组）钉螺浸入盛有500ml不同浓度的海芋（分地上和地下部分）和银杏叶溶液的烧杯中，另设1ppm氯硝柳胺水溶液处理和无氯清水饲养为对照。

在实验处理2、4d后，分别将各处理中的钉螺随机取出1袋，用无氯水冲洗数次，再放入清水中静置1d，然后作存活检查。

1.3 测定数据及测定方法

本实验所测定数据为不同处理浓度下钉螺的死亡率。死亡率采用水测法进行，将待测钉螺浸泡于盛有去氯清水的培养皿中，培养皿下垫有做好10个固定标记的滤纸，在每个标记上放置1个钉螺，置于室温1天，凡能爬动或吸附于培养皿沿壁上的钉螺，皆为活螺，未能吸附或移动的钉螺，用镊子清除其片，如能快速收缩，则为活螺，如无反应，则为死螺。

2海芋和银杏叶有机提取物活性成分及毒性机制分析

将采集到的海芋地上部分和地下部分、银杏叶分别放在室内阴干，然后用碾钵碾成粉末备用。

2.1 提取方法

用电子天平称取100g已粉碎的银杏叶和海芋地上部分和地下部分三种干样，包成圆柱形，放入索氏提取器内，在烧瓶里加入20倍的乙醇（正已烷），水浴加热回流提取，再放在水浴锅上蒸干，直至提取物呈浸膏状。

2.2 提取后物质做灭螺实验

将提取的物质先用电子天平称重，后分别配制20，40，60，80，100mg/L不同浓度梯度的溶液放入试管中，用尼龙网盖住管口，保证透气性又要防止钉螺逃逸，定期补充蒸发的水分。经处理的试验螺在无氯清水中静置5d后统计死亡率，设置清水处理为对照。

统计同一浓度5d内钉螺的死亡率，试验重复3次，平均值作为试验结果。

3实验数据与结果分析

3.1 海芋和银杏叶新鲜材料对钉螺的浸杀实验

本实验测得的数据为两种植物的溶液母液分别稀释后配成1％、0．5％、0．1％、0．05％四个不同浓度梯度的水浸液，将钉螺分别投入水浸液中处理2、4d后得到的钉螺死亡率。

通过实验发现：

①在相同的实验条件下，各水浸液在处理钉螺时，对于钉螺都具有较好的杀灭作用，在各水浸液浓度在0.5%以上，处理时间在2天以上，钉螺的死亡率能达50%以上。

②同一浓度下，各水浸液处理钉螺2天、4天钉螺的死亡率不同，如：将钉螺置于海芋地下部分0.5%浓度下，处理2天和4天,钉螺的死亡率分别为80%和100%,灭螺效果是随处理时间的延长而死亡率增高的。

③从表中还可以比较出：海芋地下部分各浓度水浸液的灭螺效果最好，海芋的地上部分次之，银杏叶效果不及海芋的地上、地下部分。

3.2 用正已烷和乙醇提取两种植物的干样进行灭螺实验

3.2.1 二种植物干样提取物的质量。

实验测定的数据为，用不同的有机溶剂（乙醇、正已烷）对海芋和银杏叶进行提取，得到的提取物的质量。各有机溶剂提取得到的提取的质量如表2所示：

实验表明：

①用正已烷对海芋的地上部分、地下部分、银杏叶进行提取，所获得的有效物质比用乙醇提取的物质多一些。

②无论是用正已烷、乙醇提取，海芋的地下部分获得的提取物质明显多于另外二种植物。

3.2.2 提取物灭螺活性初试结果。

实验测定的植物干品材料各有机溶剂（乙醇、正已烷）的提取物在浓度为40mg/L时对钉螺处理4天后钉螺的死亡率如下表3所示：

从实验结果可以看出：

①海芋的地下部分各提取物的灭螺活性都很高分别达到了80%和100%，银杏叶、海芋的地上部分各提取物的灭螺活性也较高，都超过了50%。

②用正已烷的提取物做灭螺实验效果都明显好于另外二种植物的效果。

从个实验结果来看：新鲜海芋的地下部分（块茎）的灭螺效果明显高于银杏叶与海芋的茎叶，同时三者的干粉有机物提取物的灭螺效果也是海芋有地下部分（块茎）的灭螺效果好。

本文通过一系列的实验来研究海芋和银杏叶灭螺的效果以及灭螺的机理。实验得出如下结论：

通过对海芋和银杏的水浸液处理钉螺分析，证明它们对钉螺具有不同的程度的毒杀作用，其中，毒杀作用最强的是海芋；海芋的地下部分经有机溶剂提取的提取物灭螺效果也很强，可以考虑继续进行机理研究，以利于将其推广应用于灭螺。