自体TIL细胞合并凝血酶治疗恶性血性胸腔积液

[摘要] 目的 自体肿瘤浸润性淋巴细胞（TIL）合并凝血酶治疗恶性血性胸腔积液疗效观察。 方法 对6例恶性血性胸腔积液患者，行胸腔积液闭式引流后，凝血酶胸腔灌注合并胸腔积液TIL体外扩增后并自体回输，观察近期疗效。 结果 6例患者胸腔积液均获部分缓解，均无明显不良反应，生活质量均得到改善。 结论 自体TIL细胞合并凝血酶治疗恶性血性胸腔积液有良好的临床大规模应用研究价值。

[关键词] 恶性血性胸腔积液；肿瘤浸润性淋巴细胞；凝血酶；疗效观察

[中图分类号] R730.5 [文献标识码] B [文章编号] 1674-4721（2013）05（c）-0188-02

癌性胸腔积液为恶性肿瘤晚期常见并发症，胸腔积液是由肿瘤细胞浸及胸膜，使其渗出增多产生，胸腔积液中往往含有大量肿瘤细胞。胸腔积液使肺的机械性膨胀受到限制而影响心肺功能，常造成严重的呼吸困难和循环衰竭，若不及时治疗，平均生存期仅为3个月。而癌性血性胸腔积液更是已属肿瘤晚期，此时患者通常已处于免疫力低下的状态，无手术治疗机会，临床主要采用内科治疗以缓解症状，多以尽量抽干积液，随后腔内灌注化疗药物的方法，但往往存在不良反应重、耐受性差和使患者免疫力变得更差等问题。肿瘤生物免疫治疗是继手术、放、化疗之后肿瘤治疗的第四大治疗模式。它是在不破坏机体免疫系统功能的前提下，通过特异性的识别肿瘤细胞，进而消灭组织中的肿瘤细胞[1]。研究证据显示，采用单独TIL细胞行胸腔内灌注治疗晚期肿瘤患者的恶性胸腔积液疗效肯定，不良反应小，安全性好，在控制胸腔积液的同时，不影响患者的免疫力[2]。

肿瘤治疗强调综合治疗，我们首次应用自体TIL细胞联合凝血酶治疗癌性血性胸腔积液取得了较好的效果，现报道如下：

1 资料与方法

1.1 一般资料

2011年4月～2012年8月入住本科6例恶性血性胸腔积液患者，均知情同意接受自体TIL细胞联合凝血酶治疗，其中，男4例，女2例，平均年龄52岁，B超显示均为单侧大量胸腔积液，原发肿瘤分别为腮腺癌1例，肺癌3例，乳腺癌2例。胸腔积液均为有病理细胞学依据的癌性积液。

1.2 治疗方法

胸腔积液经B超定位后，经闭式引流，尽量排尽胸腔积液后（但每次不超过1000 mL）胸腔内注入凝血酶3000 U，同时肝素抗凝无菌留取积液送实验室做分离TIL并行体外培养。细胞培养期间据患者实际情况按需引流积液，每次引流后胸腔内再注入凝血酶3000 U。细胞培养7～14 d后，细胞与凝血酶3000 U同时胸腔回输，回输之前，留取胸腔积液作另一次TIL细胞分离培养，同样7～14 d后回输。如此反复回输1～4次，直到胸腔积液完全消失或明显减少。如经4次回输胸腔积液量无明显减少者则判定无效。每次回输后均密切观察患者的血压、心跳、呼吸、体温等生命体征及不良反应，随访心电图及肝肾功能等。

1.3 疗效评定

疗效评价按照WHO疗效评定标准[3]。完全缓解（CR）：积液消失或基本消失，症状完全缓解，持续4周以上；部分缓解（PR）：积液明显减少>50%，症状改善达4周以上；无效（NR）：未达到上述指标。胸腔积液量根据B超检查来判定，总有效率为CR+PR。生活质量按WHO推荐的Karnofsky评分标准（KPS），在治疗后KPS增加10分以上者为改善，治疗后减少10分以上者为减退，介于两者之间为稳定[3]。

2 结果

2.1 疗效

6例患者均部分缓解，血性积液明显减少，积液颜色明显变浅，胸部B超均提示胸腔积液呈包裹性，胸腔积液内见纤维条索分隔。

2.2 毒副反应

6例患者在治疗过程中均无明显不良反应，未出现心电图及肝肾功能变化，未发现骨髓抑制及变态反应。

2.3 生活质量

6例患者的生活质量均有不同程度的改善。治疗后患者胸闷、气促、咳嗽等症状均有不同程度减轻或消失，精神好转，食欲不振、乏力症状也减轻。KPS增加10～20分。

3 讨论

我们首次应用自体TIL细胞联合凝血酶治疗癌性血性胸腔积液是出于以下考虑：

3.1 对于TIL及凝血酶的选择

国内张新等[4]报道：TIL治疗癌性胸腔积液总有效率达70.5%，与胸腔内化疗和胸膜粘连疗法的有效率不相上下，但却没有类似化疗的不良反应。陈建清等[5]同样报道：采用TIL细胞行胸腔内灌注治疗晚期肿瘤患者的恶性胸腔积液疗效肯定，不良反应小，安全性好，能有效提高患者的生存质量。凝血酶是一种速效局部止血剂，可直接作用于纤维蛋白原，使其变成纤维蛋白致血液凝固堵塞出血点而达到止血目的，且有促进上皮细胞有丝分裂加速创面愈合的作用。吕章春等[6]报道凝血酶是一个安全有效的抗恶性血性胸腔积液药物，它可用于老年人，能增强博来霉素的疗效，两者合用能起协同作用。柳伟明[7]也报道了相似的研究内容。综上所述，基于TIL及凝血酶在治疗恶性血性胸腔积液上都具有疗效肯定、不良反应小、安全性好的特点，我们选择了TIL及凝血酶的组合治疗。

3.2 期待TIL及凝血酶合用能产生协同作用

吕章春等[6]报道博来霉素联合凝血酶治疗恶性血性胸腔积液的有效率高于单博来霉素组和单凝血酶组，说明凝血酶能增强博来霉素的疗效，两者合用能起协同作用。柳伟明[7]报道了应用凝血酶联合顺铂治疗恶性胸腔积液有效率达86.9%，高于单顺铂组。两者合用具有协同作用。陈红海等[8]亦报道：榄香烯乳凝血酶治疗恶性血性胸腔积液，两者合用具有协同作用，能使治疗恶性胸腔积液的有效率大大提高且毒副作用轻。各种研究证据显示，凝血酶与它药联用时能起协同作用。

最关键的是，我们考虑单用TIL细胞治疗出现取胸腔积液后分离培养TIL细胞这一段治疗空白期，加用凝血酶可消除单用TIL细胞治疗而出现的细胞培养时段的治疗空白期。且加用该药可通过减少癌肿的局部出血来减少胸腔积液量，从而更有利于细胞发挥作用。

本研究用TIL联合凝血酶的方法，治疗了6例恶性血性胸腔积液患者，6例皆收到较好的疗效，且治疗过程中未见明显不良反应，未见毒副反应，生存质量都有明显提高。这为后续的针对原发病灶的治疗可能提供可贵的机会。因为经济问题，虽然只有6例接受此方法治疗，没法与单独TIL进行对比研究，但我们认为此方法有良好的临床大规模应用研究价值。

[参考文献]

[1] Rosenberg SA，Pachard BS，Aebersold DM，et al. Use of tumor-infiltrating lymphocytes and interleukin-2 in the immunotherapy of patients with metastatic melanoma[J]. N Eng J Med，1988，319（250）：1676-1680.

[2] Baxevanis CN，Dedoussis GV，Papadopoulos NG. Tumor specific cytolysis by tumor infiltrating lymphocytes in breast cancer[J]. Cancer，1994，74：1275-1282.

[3] 董粉英，刘洪，梁金华，等. 胸腔置管引流后灌注顺铂与香菇多糖治疗恶性胸腔积液30例[J]. 肿瘤学杂志，2008，14（3）：230-231.

[4] 张新，李菁，贾友明. 自体TIL治疗癌性胸水的临床疗效观察[J]. 中国临床医学，2000，7（2）：180-181.

[5] 陈建清，曾道林，康美玲. TIL细胞治疗恶性胸水的疗效观察[J]. 中国肿瘤临床与康复，2011，18（1）：56-57.

[6] 吕章春，胡谷冰，朱佩珍. 博来霉素联合凝血酶治疗恶性血性胸水[J]. 肿瘤防治研究， 2002，29（3）：632-633.

[7] 柳伟明. 凝血酶联合顺铂治疗恶性血性胸水[J]. 中国肿瘤，2004，13（8）：537-538.

[8] 陈红海，姚克青，刘爱华. 榄香烯乳凝血酶治疗恶性血性胸水临床观察[J]. 中华临床防治医学杂志，2007，2（1）：72-72.

（收稿日期：2013-01-15 本文编辑：郭静娟）