复方夏枯草膏质量标准研究

摘要：目的 建立复方夏枯草膏的质量标准。方法 采用薄层色谱法，对夏枯草、甘草、玄参进行定性鉴别。采用反相高效液相色谱法测定制剂中迷迭香酸的含量，以甲醇-0.1%三氟乙酸（40∶60）为流动相，检测波长为330 nm。结果 薄层色谱法专属性强、阴性无干扰。迷迭香酸在0.049 9～0.998 0 ?g范围内线性关系良好，平均回收率为100.99%（RSD=1.11%）。结论 本方法简便、准确、稳定，且无干扰，可作为该制剂的质量控制方法。

关键词：复方夏枯草膏；质量标准；薄层色谱法；高效液相色谱法

DOI：10.3969/j.issn.1005-5304.2013.06.020

中图分类号：R284.1 文献标识码：A 文章编号：1005-5304（2013）06-0053-03

复方夏枯草膏现执行标准收载于《卫生部药品标准・中药成方制剂》第七册，由夏枯草、甘草、玄参等14味中药组成，具有清火散结等作用，主要用于瘿瘤瘰疬、结核作痛等症。现行质量标准仅有“性状”及“检查”项，无法对其进行有效的质量控制，故完善、提高复方夏枯草膏的质量标准极为必要。本研究对方中的夏枯草、甘草、玄参进行了薄层色谱定性鉴别，同时建立夏枯草中迷迭香酸的含量测定方法，从而全面、有效、准确地对该制剂进行质量控制。

1 仪器与试药

AX-200电子天平；XS205电子天平；岛津LC-20AD高效液相色谱仪；SPD-M20A二极管阵列检测器。

夏枯草对照药材（批号120993-200604）、甘草对照药材（批号120904-201117）、玄参对照药材（批号121008-200906）、哈巴俄苷对照品（批号111730-201106）及迷迭香酸对照品（批号1118871-201102）均由中国食品药品检定研究院提供。复方夏枯草膏（批号120201、120202、120203）及阴性对照品由上海雷允上药业有限公司提供。甲醇为色谱纯（Merck），其他试剂均为分析纯。

2 方法与结果

2.1 薄层色谱鉴别

2.1.1 夏枯草 取本品1.5 g，加70%乙醇30 mL，超声30 min，

2.1.2 甘草 取本品10 g，加水30 mL，摇匀，用乙醚提取2次，每次20 mL，弃去乙醚液，再用水饱和正丁醇提取3次，每次20 mL，合并正丁醇液，用氨试液40 mL洗涤，弃去氨试液，正丁醇液蒸干，残渣加甲醇1 mL使溶解，作为供试品溶液。取甘草对照药材0.2 g，加水煎煮1 h，滤过，滤液蒸干，残渣加水10 mL使溶解，同法制成对照药材溶液。另取甘草阴性对照品（相当于供试品的量），按供试品溶液的制备方法制成阴性对照溶液。照薄层色谱法试验，吸取上述2种溶液各10 ?L，分别点于同一用1%氢氧化钠溶液制备的硅胶G薄层板上使成条状，以甲苯-乙酸乙酯-甲醇（7∶3∶1.5）为展开剂[2]，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在105 ℃加热至斑点显色清晰，置紫外光灯（365 nm）下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点，且阴性未见干扰。

2.1.3 玄参 取玄参对照药材0.4 g，加水50 mL煎煮1 h，滤过，滤液按“2.1.2”项下供试品溶液制备方法操作，为对照药材溶液。取玄参阴性对照样品（厂家提供，取相当于供试品的量），按供试品溶液的制备方法制成阴性对照溶液。另取哈巴俄苷对照品，加甲醇制成每1 mL含1 mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法试验，吸取对照药材溶液、对照品溶液及“2.1.2”项下供试品溶液各10 ?L，分别点于同一硅胶G薄层板上使成条状，以乙酸乙酯-冰醋酸-甲酸-水（15∶1∶1∶2）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5%香草醛硫酸溶液，加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照药材及对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的条斑，且阴性未见干扰。

2.2 含量测定

2.2.1 色谱条件 色谱柱为Alltima HP C18柱（250 mm×4.6 mm， 5 ?m），流动相为甲醇-0.1%三氟乙酸（40∶60），流速1.0 mL/min，检测波长330 nm，柱温30 ℃[1]，进样量为10 ?L。理论板数按迷迭香酸峰计算应不低于4000。在此条件下，迷迭香酸峰与其他组分均能达到基线分离。

2.2.2 对照品溶液制备 取迷迭香酸对照品适量，精密称定，加稀乙醇制成每1 mL含0.02 mg的溶液，即得。

2.2.3 供试品溶液制备 取本品约0.6 g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入稀乙醇50 mL，摇匀，称定质量，超声处理（功率90 W，频率59 kHz）30 min，放冷，再称定质量，用稀乙醇补足减失的质量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

2.2.4 阴性对照溶液制备 取相当于供试品量的缺夏枯草阴性对照品，按供试品溶液制备方法制成阴性对照溶液。

2.2.5 专属性考察 取对照品溶液、供试品溶液和阴性对照溶液各10 ?L，按“2.2.1”项下色谱条件进样测定。结果表明，此试验条件下，迷迭香酸的色谱峰分离良好，且阴性对照无干扰。见图1。