IL17在肝癌患者血清中表达增高对肝癌诊断的研究

摘 要 为了早期发现并监测肝癌，通过ELISA法检测肝癌组与正常组血清IL17细胞因子水平，运用ROC统计学分析比较其与AFP诊断肝癌的诊断效能，logistic回归获得IL17和AFP两者联合诊断的模型预测肝癌.结果发现肝癌组的IL17质量浓度（5.76±2.35 ng/L）较对照组（2.98±2.53 ng/L）明显增高（P*

关键词 肝癌；IL17；logistic 回归；受试者诊断特征曲线；甲胎蛋白

中图分类号 R7357文献标识码 A文章编号 10002537（2014）03001905

肝细胞癌（Hepatocellular Carcinoma， HCC）是最常见的肝原发恶性肿瘤， 因为发病率较高、发现困难、治疗方法少等原因，在导致人类死亡的各种疾病中位居前列[1].目前，原发性肝细胞癌在全球范围内致死率位列第五位，而在一些非洲和亚洲国家，原发性肝细胞癌在肿瘤性死因中已经位居首位[23].肝癌早期转移和术后复发是肝癌患者生存率低的主要原因.目前有效的肝癌诊断标志物寥寥无几，当前的检测技术仍然不能及时发现和有效检测早期阶段的肝癌[45].

超声和AFP检测是最常用的筛查肝癌方法，然而超声检测依赖于医师的专业知识和设备实际灵敏度，难以对肿块的良恶性予以评估和诊断.AFP被认为是用于筛查和早期诊断肝癌最实用且可行的方法，40%～60%HCC患者的AFP值增高，然而还有很大一部分肝癌患者其AFP值没有增高[67]，因此AFP用作唯一的工具来诊断肝癌仍然存在较大的漏诊率[89].

IL17具有促肿瘤生长、转移的作用.动物实验研究表明IL17具有促进多种肿瘤生长的作用，这些肿瘤包括纤维肉瘤、结肠癌、皮肤癌、非小细胞肺癌等[1012].研究认为IL17能通过聚集血管内皮细胞而促进肿瘤血管的形成，也能促进成纤维细胞产生血管内皮生长因子、前列腺素、趋化因子、巨噬细胞炎性蛋白2，转化生长因子的产生促进肿瘤细胞的粘附和运动，为肿瘤血管的形成和癌细胞播散提供条件[1213].

基于以上IL17与肿瘤和肝癌的各种相关报道，结合已有的AFP的临床价值，检测IL17在肝癌血清中的表达情况及评估与AFP的相关性显得非常有意义，这样更有利于系统地分析和检验二者的检验效能，以便更好地对其进行利用.

1 方法

1.1 实验分组

筛选2013年9月和2013年12月在湖南省人民医院就诊的肝癌病人和健康体检者，其中肝癌患者入组条件为：未经过任何治疗，经病理或者临床诊断为肝癌的患者.共有84名受试者参与，并分为以下两组：健康对照组，包括32名，年龄范围为21～72岁（平均年龄43±15岁）；肝癌组共52名，男45例，女7例，年龄范围为27～80岁（平均年龄54±12岁），各组人员在入院后进行相应治疗之前，完成CT、超声、血生化常规、血清AFP检测，各组实验对象资料见表1.

1.2 标本收集

用真空采血针取患者晨起空腹3 mL静脉全血，4 ℃ 4 000 r/min离心10 min，提取离心后的血清.血清保存在-80 ℃，保存至同批测定.

1.3 酶联免疫吸附实验（ELISA）

酶联免疫吸附实验（Enzymelinked Immunosorbent Assay）检测人血清IL17质量浓度.使用人IL17酶联免疫吸附试剂盒（ CSBE14917H， Cusabio Biotech），检测浓度下限（LLD）为7.8 ng/L.批内精密度（化验内精度）CV%

1.4 应用Roche电化学发光法测定血清AFP质量浓度

按试剂盒说明书处理样本后，吸取10 μL标本与生物素化抗AFP单克隆抗体和钉标记的抗AFP抗体混匀，加入链霉亲合素包被的微粒，反应混合液吸到测量池中，微粒通过磁铁吸附到电极上，电极加电压后产生化学发光，通过光电倍增管进行测定.检测结果由Elecsys软件自动测出.

1.5 软件分析

应用SPSS17.0统计软件进行统计分析.应用受试者诊断特征曲线（receiver operator characteristic curve ROC）评估指标的预测效能，得到曲线下面积（Area Under the Curve， AUC）.最大约登指数计算临界值（Cutoff points），约登指数（Youden index）=敏感度+特异度-1.各组均值比较，两独立样本t检验.logistic逐步回归分析.所有结果以双尾检验P

2 结果

2.1 正常组与肝癌组血清IL17的质量浓度

图1 正常组与肝癌组血清IL17质量浓度

Fig.1 Serum levels of IL17 in HCC group and control group

结果显示IL17在肝癌组中质量浓度明显高于正常组，分别为5.76±2.35 ng/L和2.98±2.53 ng/L（P*