消炎痛凝胶剂中欧前胡素含量测定的研究

摘 要：目的 建立高效液相色谱法测定消炎痛凝胶剂中欧前胡素含量的方法。方法 甲醇-水（55：45）为流动相；检测波长：300 nm；流速：1.0 mL・min-1；柱温：30 ℃。结果 本法可测定欧前胡素的含量，其在0.8～16 ?g范围内线性关系良好，平均回收率为99.53%；RSD为1.82%。结论 该方法简便、准确，可作为消炎痛凝胶剂的含量测定方法。

关键词：凝胶剂 欧前胡素 高效液相色谱法

中图分类号：R286 文献标识码：A 文章编号：1674-098X（2014）06（a）-0214-02

Determination of Imperatorin in Xiaoyantong Gel

ZHU Yanhua WANG Xinggan GUO Xin YAN Xueying

（Heilongjiang University of Chinese Medicine，Harbin，Heilongjiang，150040）

Abstract：Objective：To establish a HPLC method for determination of imperatorin in Xiaoyantong gel.Methods：Mobile phase was methanol-water（55：45）.Detection wavelength：300nm.Flow rate：1.0mL min-1.Column temperature：30℃.Results：The content of imperatorin is determined by this method，while the linear relation was good.The average recovery was 99.53%.The RSD was 1.82%.Conclusions：This method is simple，accurate and can be used for determination of Xiaoyantong gel.

Key words：Gel Imperatorin HPLC

消炎痛凝胶剂是由白芷浸膏、薄荷脑等药组成。具有消炎止痛的功效，临床上主要用于治疗肌肉痛、关节痛、腰腿痛、跌打损伤及网球肘引起的肿痛。为了有效控制消炎痛凝胶剂的质量，参考相关文献[1-4]采用高效液相色谱法建立了其主要药味白芷中欧前胡素的含量测定方法，结果表明该方法准确可靠。

1 仪器与试药

高效液相色谱仪（LC-2010 AHT，日本岛津公司）；消炎痛凝胶剂（自制，批号：20130912、20130913、20130914、20130915、20130916）；欧前胡素对照品（购自中国药品生物制品检定所，批号： 110826-201013）；甲醇为色谱纯；水为超纯水；其他所用试剂均为分析纯。

2 方法与结果

2.1 色谱条件与系统适应性试验

色谱柱：（250 nm×4.6 nm，5 ?m）；流动相：甲醇-水（55∶45）；检测波长：300 nm；流速：1.0 mL・min-1；柱温：30 ℃；理论塔板数不得低于2000。

2.2 对照品溶液的制备

取欧前胡素对照品，加甲醇制成每1 mL含100 ?g的溶液，作为对照品溶液。

2.3 供试品溶液的制备

取凝胶剂约1g，精密称定，置具塞玻璃试管中，加0.1 mol・L-1盐酸0.1 mL，用甲醇定容至刻度，超声30 min，取出后补加甲醇至刻度，用0.45 ?m的微孔滤膜过滤，取续滤液作为供试品的溶液。

2.4 阴性溶液的制备

按处方比例称取除白芷浸膏外的其他药物，按照供试品溶液的制备方法制备阴性供试品溶液。

2.5 干扰试验

照上述色谱条件，分别取对照品溶液、供试品溶液、阴性对照品溶液注入色谱仪，记录色谱图，欧前胡素对照品、供试品在9 min左右出现吸收峰，阴性样品无干扰。

2.6 线性关系考察

吸取欧前胡素对照品溶液，加入甲醇制备成浓度分别为0.8、1.0、2.0、4.0、8.0、16.0 μg・mL-1的溶液。分别进样10 ?L，以进样量为横坐标，峰面积为纵坐标，进行回归处理得回归方程：A=1.6×105C-14356，R2=0.9995，表明欧前胡素在0.8～16 ?g范围内线性关系良好。

2.7 稳定性试验

取消炎痛凝胶剂（批号：20130912）按2.3项下供试品溶液的制备方法制备供试品溶液，照上述色谱条件，分别在第0、12、24、36、48、60、72 h进样，每个时间点进样3次，测得峰面积积分值，RSD为2.2%。结果表明供试液在72 h内基本稳定。

2.8 精密度试验

取本品（批号：20130912）按2.3项下供试品溶液的制备方法制备供试品溶液液10 μL，进样6次，分别记录峰面积积分值，RSD为1.9%。结果表明此方法的日内精密度良好，符合含量测定的要求。

2.9 重复性试验

取本品（批号：20130912）按2.3项下供试品溶液的制备方法平行制备6份供试品溶液，照上述色谱条件重复测定3次，结果表明该法测定欧前胡素含量重复性良好，RSD为1.57%。

2.10 加样回收率试验

取已知含量的本品（批号：20130912）9份，每份约0.1g精密加入欧前胡素对照品1 mL，浓度分别为12 ?g・mL-1、10 ?g・mL-1、8 ?g・mL-1，每个浓度三份，按2.3项下供试品溶液的制备方法制备供试品溶液，进行含量测定，并计算回收率。结果平均回收率为99.53%；RSD为1.82%，加样回收率符合要求，表明该方法准确。

2.11 样品的测定

按2.3项下供试品溶液的制备方法制备供试品溶液，取供试品溶液和对照品溶液，分别进样，测定5批样品中异欧前胡素的含量，结果平均含量为0.1692 mg・g-1，RSD为0.18%（表1）。

3 讨论

3.1 流动相的选择

通过对乙腈-水，甲醇-水等多个流动相系统，以及甲醇-水的多个比例进行了考察，结果表明甲醇-水（55∶45）系统作为流动相，供试品色谱图中欧前胡素与其它峰能够达到很好的分离。因此选择该系统作为流动相。

3.2 提取溶剂的选择

试验中曾经选用丙酮、乙酸乙酯、甲醇、乙醇进行提取，结果以甲醇提取测得的含量较高且分离度好，乙醇提取测得的含量虽高，但有一些杂质峰的分离不好，故选用甲醇作为样品前处理溶剂。

3.3 超声提取时间选择

研究比较了超声提取10、20、30、40 min，结果表明超声30 min欧前胡素提取率高于10、20 min，并与40 min提取率基本相同，故本试验采取了超声30 min的方法。

参考文献

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[3] 胡华杰，楼招欢，吕圭源，等.HPLC测定不同产地白芷饮片中欧前胡素和异欧前胡素的含量[J].浙江中医药大学学报，2010，34（3）：418.

[4] 刘伟明，王金荣，高晓杰.HPLC法测定复方羊角片欧前胡素[J].中国实用医药，2008，3（11）：134-135.