苦参颗粒与苦参煎剂药效及毒性的对比性研究

摘要：目的：对苦参颗粒与苦参煎剂的药效及毒性进行对比研究，探讨苦参配方颗粒的可行性。方法：选用醋酸致小鼠腹腔毛细血管通透性增加及二甲苯致小鼠耳廓炎症模型，观察苦参颗粒的抗炎作用；采用鸡红血球致敏法观察苦参颗粒对免疫功能的影响，采用改良寇氏法观察苦参颗粒的毒性作用。结果：苦参颗粒能减少醋酸致小鼠腹腔毛细血管通透性增加时伊文思蓝的渗出量(P＜0.05～0.01)，减轻二甲苯致小鼠耳朵炎症反应的肿胀度(P＜0.05)；能降低小鼠溶血素的含量(P＜0.05～0.01)，能降低小鼠吞噬细胞的吞噬指数及吞噬活性，(P＜0.05～0.01)；结论：苦参颗粒有抗炎及抑制免疫的作用，且其作用与苦参煎剂的作用差别不显著(P＞0.05)。小鼠一次灌服苦参颗粒溶液的LD50是：(51.14±9.0827)g生药／kg体重。

关键词：苦参颗粒；苦参煎剂；药效；毒性；对比性研究

中图分类号：R285.1

文献标识码：A

文章编号：1673-7717(2007)08-1602-03

中药苦参是豆科槐属植物苦参(Sophora flaveacensait)的根，味苦，性寒，具有清热利湿、抗菌、抗过敏等多种作用，用于治疗急性菌痢、大便秘结、利尿、抗病原体及滴虫性阴道炎等多种疾病。对急性传染性肝炎的治疗也有一定的疗效。本研究依据苦参的功效，进行了抗炎、免疫及毒性等方面动物实验的对比性研究，现将实验结果报道如下。

1　实验材料

1．1　药物

苦参颗粒：三九医药股份有限公司提供，批号：20050502，规格：9.93g生药/kg颗粒。苦参药材：三九医药股份有限公司提供，批号：20050602，规格：20050101。苦参煎剂：由本教研室制备：先用1:4自来水浸泡1.5h，然后隔水蒸煮1h，浓缩成所需浓度。硫酸罗通定：广东省博罗先锋药业集团有限公司产品。批号：030412，规格：60mg/mL。醋酸泼尼松：广东华南药业有限公司产品。批号：050504，规格：5mg/片。

1．2　动物

NIH小鼠，由广州中医药大学动物中心提供，许可证号：粤监证字2005A004SCXK(粤2003-0001)。

1．3　仪器

722光栅分光光度计：上海第三分析仪器厂。HANG-PING JA1023电子天平：上海天平仪器厂。

2　实验方法与结果

2．1　抗炎作用

2．1．1　对毛细血管通透性的影响　①实验方法：选用18～22gNIH小鼠78只，雌雄各半，随机分为6组，按20mL/kg体重容积灌胃给药，对照组灌服等量的蒸馏水，每天1次，连续3天，于末次药后1h，按毛细血管通透性实验法实验，用722分光光度计测定小鼠腹腔洗出液伊文思蓝的含量。实验结果作t检验。②实验结果：高、中、低3个剂量的苦参颗粒可显著减少醋酸致小鼠腹腔毛细血管通透性增加时伊文思蓝的渗出量，与对照组比较(P＜0.05～0.01)，表明苦参颗粒能降低毛细血管的通透性，有一定的抗炎作用，其作用与等效剂量的苦参煎剂相近(P＞0.05)，结果见表1。

2．1．2　对二甲苯致小鼠耳朵炎症反应的影响　①实验方法：选用18～22gNIH小鼠78只，雌雄各半，分组与给药方法与1.1相同，于末次药后1h，按小鼠耳肿胀法给各组小鼠左耳滴等量的二甲苯致炎，15min脱颈椎处死小鼠，剪取两耳，并打下耳片，用电子天平称重，以两耳重量差值为炎症肿胀度。实验结果作t检验。②实验结果：高剂量的苦参颗粒可显著减轻二甲苯致小鼠耳朵炎症反应的肿胀度，与对照组比较(P＜0.05)，表明苦参颗粒有一定的抗炎作用，其作用与等效剂量的苦参煎剂相近(P＞0.05)，结果见表2。

2．2　对免疫功能的影响

2．2．1　对体体液免疫的影响　①实验方法：选用18～22gNIH小鼠72只。随机分为6组，灌胃给药(20mL/kg体重)，每天1次，连续15天。于药后的第9天给各组小鼠ip0.5％鸡RBC生理盐水0.2mL／只进行免疫，于免疫后7天，眼眶静脉取血，按鸡RBC作免疫原的溶血素测定法测各组小鼠的溶血素含量。实验结果作t检测。⑦实验结果：高、中剂量的苦参颗粒均可显著降低小鼠溶血素的含量，与对照组比较(P＜0.05)，表明：苦参颗粒有抑制小鼠体液免疫的作用，其作用与等效剂量的煎剂相近(P＞0.05)；实验结果见表3。

2．2．2　对非特异性免疫的影响(小鼠碳粒廓清法)　①实验方法：分组和给药方法同2．2．1，于末次给药后12h按小鼠碳粒廓清法，眼眶静脉取血，测定光密度(OD值)。计算各组小鼠的吞噬指数K及吞噬活性，实验结果作t检测。②实验结果：高剂量的苦参颗粒可显著降低小鼠吞噬细胞的吞噬指数及吞噬活性，与对照组比较(P＜0.05)，表明：苦参颗粒有抑制小鼠非特异性免疫功能的作用，其作用与等效剂量的煎剂相近(P＞0.05)；实验结果见表4。

2．3　毒性试验

2．3．1　苦参颗粒　①预试：实验方法：按急性毒性试验，选用18～22gNIH小鼠9只，雌雄各半，按30、20、10mL/kg一次灌服636.54％苦参颗粒溶液，每个剂量3只小鼠，药后观察小鼠在3天内的死亡、活动及饮食情况。结果：药后1天，高剂量3只全死，中剂量死1只，低剂量全不死。根据预试情况，计算r=1.316，以此设6个剂量组进行急性毒性试验。②急性毒性：实验方法：选用18～22g NIH小鼠60只，雌雄各半，按急性毒性试验，小鼠饥饿12h后随机分为6个剂量组，按30mL／kg容积给小鼠一次灌服苦参颗粒溶液，药后观察小鼠7天内饮食、活动、大小便及死亡情况。实验结果按孙氏改良综合计算法计算。③实验结果与小结：在实验中观察到，部分小鼠于药后30min活动、呼吸减慢，药后1h出现死亡，小鼠死亡多出现在药后12小时内，将死亡小鼠解剖，肉眼观察，心、肝、脾、肺、肾、肾上腺等脏器均无异常发现。药后第8天，将存活小鼠解剖，肉眼观察，心、肝、脾、肺、肾、肾上腺等脏器均无异常发现。根据小鼠药后7天内死亡情况，按孙氏改良综合计算法计算LD50，结果见表5。

按孙氏改良综合计算法计算：LD50=51.14生药／kg体重；LD50的95％可信限=(51.14±9.0827)g生药／kg体重。

2．3．2　苦参煎剂　①预试：实验方法：按急性毒性试验法，选用18～22gNIH小鼠9只，雌雄各半，按20、10、50mL/kg一次灌服400％苦参煎剂，每个剂量3只小鼠，药后观察小鼠在3天内的死亡、活动及饮食情况，结果：小鼠药后1天高剂量3只全死，中、低剂量全不死。根据预试情

况，计算r=1.19以此设7个剂量组进行急性毒性试验。②急性毒性：实验方法：选用18～22g NIH小鼠70只，雌雄各半，按急性毒性试验法，小鼠饥饿12h后随机分为7个剂量组，按20mL/kg容积给小鼠一次灌服苦参煎剂，药后观察小鼠7天内饮食、活动、大小便及死亡情况。实验结果按孙氏改良综合计算法计算。③实验结果与小结：在实验中观察到，部分小鼠于药后30min活动、呼吸减慢，药后1h出现死亡，小鼠死亡多出现在药后12h内，将死亡小鼠解剖，肉眼观察，心、肝、脾、肺、肾、肾上腺均等脏器无异常发现。药后第8天，将存活小鼠解剖。肉眼观察，心、肝、脾、肺、肾、肾上腺等脏器均无异常发现。根据小鼠药后7天内死亡情况，按孙氏改良综合计算法计算LD50，结果见表6。 按孙氏改良综合计算法计算：LD50=45.688g生药／kg体重；LD50的95％可信限=45.688±6.14g生药／kg体重。

3　讨论

中药是中国的传统医药，从古至今已经有两千多年的历史，深得人们的信赖。中药在防病、治病和康复、保健，保障人民身体健康等方面起了重要作用，随着社会的进步，科技的发展，人们生活水平的提高，尤其是在当今经济快速发展的社会，人们生活节奏也随之越来越快，在保证疗效不变甚至更好的前提下，人们希望生产一种服用更为方便、携带更简便的剂型的越来越强烈；另外中药复方水煎剂还有它的不足之处：如由于产地不同，各人煎煮时间和火候不同，特别是一些含有大量挥发油的药物或水溶性较差的中药，在煎煮的过程中，要不就是把挥发油挥发掉，或有效成分提取较少，而影响治病的效果，同时浪费时间，为此中药现代化研究，是使中药迈入世界经济市场的重要举措。配方颗粒是中药现代化研究的其中之一，它可以依据中药的特性，采取不同提取方法，同时在制备过程中可制定其规范化的制备工艺及其工艺技术参数，这样可建立较系统的完善可控的质量标准，能解决中药煎煮存在的问题，保证或提高中药的疗效，部分药物尚可减少毒性。如本实验研究结果表明苦参颗粒不仅保持了抗炎及抑制免疫作用等方面与等效剂量的苦参煎剂相近，而且毒性比苦参煎剂小，由此可以证明苦参颗料配方是可行的。