料液比对酶解豆粕酸溶性蛋白和水溶性蛋白含量的影响研究

摘要：为了研究在不同料液比条件下添加中性蛋白酶对豆粕的酶解程度，试验设定6个处理，分别为料液比（质量比，下同）1.0∶1.0、1.0∶1.5、1.0∶2.0、1.0∶2.5、1.0∶3.0、1.0∶3.5，每个处理3个重复，以酸溶性蛋白和水溶性蛋白为考察指标，研究不同料液比对豆粕酶解效果的影响。结果表明，当料液比为1.0∶2.5时豆粕中的酸溶性蛋白含量最高，达到13.52%，与其他各处理相比差异极显著（P0.05），但与其他各处理间差异显著（P

关键词：料液比；酶解豆粕；酸溶性蛋白（TCA-N）；水溶性蛋白

中图分类号：S816.32 文献标识码：A 文章编号：0439-8114（2013）23-5814-02

豆粕是畜禽饲料中主要的植物性蛋白原料之一，但因其蛋白质分子结构复杂，并含大豆抗原蛋白、抗胰蛋白酶及植物凝集素等抗营养因子，在很大程度上限制了其应用的程度和范围。豆粕酶解在很大程度上可以降低抗营养因子的含量[1-3]并且增加小分子蛋白的含量[4-6]。饲料酶制剂的应用为豆粕资源的利用开辟了新的思路。目前对酶的种类、酶解的条件和工艺研究报道正逐步深入。本试验以豆粕为研究材料，通过酶解，以酸溶性蛋白和水溶性蛋白为考察指标，研究在不同料液比情况下酶对豆粕的改性程度，旨在为酶的应用和豆粕资源的深度开发和应用奠定基础。

1 材料与方法

1.1 材料

豆粕：试验用豆粕为美国嘉吉公司出品的粗蛋白含量为43%的豆粕，经粉碎机过1.5 mm筛片待用。

蛋白酶：为南宁庞博生物有限公司出品的食品级中性蛋白酶，酶活为20万IU/g。

试剂：浓硫酸、硫酸钾、硫酸铜、三氯乙酸、盐酸、氢氧化钠、硼酸等化学试剂均购自中国医药集团上海试剂公司。

主要仪器：恒温培养箱（黄石恒丰SP-01型）、电子天平、离心机、FOSS 2300型全自动凯氏定氮仪、干燥箱等。

1.2 方法

1.2.1 试验分组与处理 分别称取80 g豆粕于18个500 mL的烧杯中，平均分为6个处理，每个处理3个重复。准确称取1.440 0 g中性蛋白酶溶解于3 240 g的水中，混合均匀，配成酶液。分别按料液比（质量比，下同）1.0∶1.0、1.0∶1.5、1.0∶2.0、1.0∶2.5、1.0∶3.0和1.0∶3.5的比例称取一定质量的酶液与烧杯中豆粕混合均匀，置于37 ℃恒温培养箱中静置培养24 h，后置于105 ℃的恒温培养箱中灭活15 min，使酶充分失活。然后置65 ℃条件下烘干粉碎待测。

1.2.2 检测方法

1）酸溶性蛋白含量的检测：酸溶性蛋白含量的检测参照GB/T22492-2008。

2）水溶性蛋白含量的检测：准确称取5.000 0 g烘干样品于100 mL的三角瓶中，量取50 mL的蒸馏水于三角瓶中充分溶解，置120 r/min摇床30 min。取上清液于5 000 r/min离心3 min，取上清液10 mL于凯氏烧瓶中检测粗蛋白的含量。

1.3 数据处理

试验数据采用SPSS 18.0统计软件进行方差分析，差异显著者采用LSD法进行多重比较，结果均以平均值±标准差表示。

2 结果与分析

试验结果见表1。由表1可见，当料液比为1.0∶2.5时豆粕中酸溶性蛋白含量最高，达到13.52%，与其他各处理相比差异极显著（P0.05），但与其他各处理间差异显著（P

3 讨论

3.1 不同料液比对酶解豆粕酸溶性蛋白含量的影响

豆粕是一种优质的植物性蛋白饲料资源，具有较高的蛋白质含量，其氨基酸也比较平衡，是一种潜在的优质小肽资源。最新研究[7，8]表明，小肽能以完整的形式和游离氨基酸同时被动物直接吸收利用，具有强化养分与吸收、促进胃肠道消化功能、参与机体的免疫调节等功能。因此，用酶制剂对豆粕进行改性是豆粕资源使用的另一有效途径，同时可以将酸溶性蛋白的含量作为酶解过程中的一个重要参数。

酸溶性蛋白是指能溶于15%三氯乙酸的分子质量在5 ku以内的多肽或小肽，也包括了游离的氨基酸，所以通过检测处理样品中的酸溶性蛋白含量，可以反映豆粕蛋白被降解的情况。本试验中随着酶解条件的不同，豆粕的酸溶性蛋白含量呈现先升高后下降的趋势（表1），这与方乐等[6]的试验结果一致。试验结果表明，就酸溶性蛋白含量而言，其最优料液比为1.0∶2.5。

3.2 不同料液比对酶解豆粕水溶性蛋白含量的影响

营养物质大部分是以水为媒介在胃、小肠、大肠内吸收，水溶性物质的含量一定程度上会影响到营养物质的消化与吸收。有资料报道[1]，水溶性蛋白含量的升高有助于动物机体的消化吸收，加速蛋白质的沉积，进而促进动物生长。豆粕蛋白质成分比较复杂，80%的蛋白质分子质量在100 ku以上，并且主要以大豆球蛋白和β-大豆伴球蛋白为主，这是影响动物健康和造成其生长不良的主要原因。本试验中豆粕经酶解后其水溶性蛋白含量明显升高，并且在料液比1.0∶1.5时达到最高，随后有一定程度的下降（表1）。水溶性蛋白含量的升高，说明豆粕蛋白成分得到明显的改性，可能会对动物的生长产生积极作用。

4 小结

豆粕经中性蛋白酶处理后，其酸溶性蛋白和水溶性蛋白含量明显升高，其最高含量时的料液比分别为1.0∶2.5和1.0∶1.5，在此条件下，豆粕蛋白质成分得到了明显改性。

参考文献：

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