免疫组织化学技术在兽医诊断中的应用

摘 要：免疫组织化学技术是通过利用抗原抗体特异结合的原理，把相关的物质标记在抗体上，来表示复合物的存在和状态。随着我国科学技术的发展，免疫组织化学技术越来越成熟，已被广泛应用于兽医的诊断过程中。免疫组织化学技术应用的范围非常广泛，主要包括：对病原体检测、定位、动态分布，以及新病原体的发现、固定组织的研究过程中，是现代兽医诊断中主要的技术手段之一，该文通过查询大量的中外文献，以及向相关人士咨询，就免疫组织化学技术在兽医诊断中的应用进行浅要分析，希望对相关部门有一定帮助。

关键词：免疫组织化学技术 兽医诊断 应用分析

中图分号：S854.4 文献标识码：A 文章编号：1674-098X（2016）09（a）-0094-02

免疫组织化学技术在国际上简称为IHC，是依靠组织化学发展起来的一种新型兽医诊断技术，其主要的原理是利用抗原和抗体特异性结合的原理，把抗体当作特异性染色的主要载体，并且把相关的物质标记在抗体分子中，以便在显微镜下对抗原抗体进行全方位仔细的观察，最终达到对细胞和组织内的相应抗原进行定性和定位检测。免疫组织化学技术的发现和发展使得传统兽医诊断发生了很大变化，使得传统病理学逐渐发展成为免疫信号和形态相结合的现代病理学。自从20世纪70年代末期开始，免疫组织化学技术就对兽医诊断的发展有着不可替代的作用。这主要是由于IHC可以在石蜡切片、冰冻组织和细胞制品上检测组织中种类广泛的病原，以及对活体动物中病原的检测，亦可用于对动物体内病原的动态分布、半定量等研究。此外，IHC还可对固定组织进行回顾性研究。免疫细胞化学技术在细胞、亚细胞水平原位检测抗原分子，是其他任何生物技术难以达到和代替的，它能在细胞基因和分子水平同时原位显示基因及其表达产物，形成新的检测系统。虽然聚合酶链反应（polymerasechain reaction，PCR）方法已经广泛应用于疾病的诊断，但由于不能在组织和细胞内进行明确的定位而限制PCR在病理组织学上的应用。该文就着重对免疫组织化学技术在兽医诊断中的应用进行简要分析，希望对我国兽医诊断部门有一定的借鉴。

1 免疫组织化学技术对病原体的检测

近年来，随着我国科学技术的发展，免疫组织化学技术已被广泛应用于兽医诊断过程中，尤其是在兽类传染病的诊断过程中发挥了不可替代的作用，免疫组织化学技术在兽类传染病诊断过程中的作用有很多方面因素的影响，其中最主要的原因是因为免疫组织化学技术能够快速准确地检测到病原体，比如：病毒、细菌的种类，还能检测出某些不能在体外分离培养的病原体和病毒。我国著名免疫组织化学技术研究专家周春宇通过多年的工作经验和大量的实验建立了检测鹅细小病毒的间接酶免疫组织化学方法。这种检测方式的发明使得鹅细小病毒对兽类组织器官和细胞的抗原定位检测更加清晰明了[1]。除此之外，免疫组织化学技术也可以应用于同一检样品病原比的检测和识别过程中，国外研究者曾经利用免疫组织化学技术检测了某养殖场公牛心肌炎的主要病原体，并取得了辉煌的成绩，检测了90头死于心肌炎的公牛感染组织，每个标本都使用了4种抗病原体，即：嗜血杆菌病抗病原体、牛病毒性腹泻病毒抗病原体、牛支抗病原体、溶血性曼氏杆菌抗病原体。大约有65头牛在心脏受损中发现了嗜血杆菌，而牛病毒性腹泻病毒只有4头，从这几组数据中可以清楚看到嗜血杆菌才是导致公牛心肌炎的主要病原体。也有人通过免疫组织化学技术检测到犬瘟热病毒、衣原体等病毒很难在体外分离，并且培养起来非常费时、费力。也有人通过免疫组织化学技术检测兽类组织切片中活着的非可培养状态的副溶血性弧菌，发现利用免疫组织化学技术能够准确检测出非可培养状态的副溶血性弧菌的位置，大大节省了实验人员的精力和时间，把兽医诊断检测人员从繁重的工作中解放出来，所以说免疫组织化学技术不但能够减少兽医诊断的工作量，还能提高兽医诊断的准确性和效率[2]。

2 免疫组织化学技术对病原机体的定位

免疫组织化学技术具有很多优点，但是我国免疫组织化学技术的起步比较晚，相关技术还不够成熟，还不能精确地测量出病原体的含量，但是免疫组织化学技术却能使得病原检测变得更加直观清晰，还可对病原体进行准确定位。比如：利用免疫组织化学技术能够快速准确地对犬类传染性肝炎病毒定位在细胞核内，能够把狂犬病病毒定位到细胞质当中，这是传统的兽医诊断所达不到的技术高度，使得原来被称为不治之症的狂犬病有了治愈的希望。我国著名免疫组织化学专家陈海军曾建立了检测石蜡组织切片中I型鸭肝炎病毒的间接免疫酶染色方法，利用免疫组织化学技术对I型鸭肝炎病毒导致鸭死亡的组织器官进行深入研究和分析，检测结果显示，I型鸭肝炎病毒在死亡鸭的肝、心、盲肠、直肠中的免疫组织化学检测都是阳性，这个实验可以清楚看出I型鸭肝炎病毒主要分布在感染细胞的细胞质当中[3]。

3 病原在机体的动态分布研究

病原在机体的动态分布研究是兽医诊断动物传染病的基础，能够为动物发病的机理研究提供理论依据，对养殖业控制动物病情有非常重要的意义。我国对病原在机体的动态分布研究起步比较晚，到目前为止，主要利用生物学技术、免疫酶组化法进行研究。通过利用免疫组织化学技术能够清晰明了地观察到病原在组织细胞中的生长动态，也就能观察到病毒从一个部位到另一个部位的扩散过程，有助于兽医研究疫病发病的原因和过程。同时，免疫组织化学技术还能检测出肉眼病变不明显的组织内的病因发病过程和状态[4]。

4 结语

免疫组织化学技术应用的范围非常广泛，除了应用在医院诊断过程中，还应用在兽医疫病疾病的研究过程中。随着我国科学技术的发展，生物分子技术和遗传技术得到了广泛发展，使得免疫组织化学技术越来越完善，免疫组织化学技术在兽医诊断过程中发挥的作用和价值越来越大，该文通过查阅大量的中外文献，分析免疫组织化学技术对病原体的检测，免疫组织化学技术对病原机体的定位，病原在机体的动态分布研究，希望对兽医诊断发展有一定帮助。

参考文献

[1] 万美梅，孙彦伟，林乃锋.免疫组织化学技术在兽医诊断中的应用[J].动物医学进展，2013（6）：94-97.

[2] 孙亚妮.免疫组织化学技术在鸡三种病毒性肿瘤病鉴别诊断中的应用[D].山东农业大学，2014.

[3] 庄金秋，梅建国，沈志强.胶体金免疫层析技术在兽医临床诊断中的应用进展[J].中国动物检疫，2012（9）：70-75.

[4] 温涛，赵建增，罗胜军，等.化学发光免疫分析在兽医诊断中的应用[J].中国畜牧兽医，2013（10）：73-75.